邱宁
- 作品数：4 被引量：42H指数：4
- 供职机构：北京大学医学部基础医学院微生物学系更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项首都卫生发展科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲型肝炎疫苗应用后甲型肝炎流行特征的变迁被引量：22
- 2012年
- 甲型肝炎（甲肝）是由甲肝病毒（HAV）引起的急性肠道传染病,是全球严重的公共卫生问题之一。世界不同地区抗-HAV流行率为15%～100%。2000年世界卫生组织（WHO）报告,全球每年发生临床型甲肝约150万例[1],主要发生在亚洲、非洲等发展中国家,给社会带来了巨大的经济负担。近年来,随着社会经济的发展。
- 邱宁刘学恩庄辉
- 关键词：甲型肝炎疫苗流行病学
- 肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立被引量：11
- 2011年
- 目的建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）荧光定量聚合酶链反应（荧光定量PCR）。方法设计检测HBVDNA（tDNA）和cccDNA特异性引物及探针，用3．44×10^0～3．44×10^9copies／pl含HBV全基因组序列（C基因型）质粒作为标准品，建立荧光定量PCR检测标准曲线。取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本，验证该法灵敏度和特异度。提取肝组织中DNA，取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶（PSAD）酶切；另一部分不酶切作为tDNA和β—globin检测样本，分别进行HBV cccDNA、tDNA和β—globin定量检测，以β-globin为参比，对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化。结果检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3．44×10^0～3．44×10^9copies／μl。检测HBV cccDNA和HBVDNA下限均为3．44×10^0copies／μl。33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0．003copies／cell和0．031 copies／cell；检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性。应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性，提高cccDNA检测法特异度达7．24×10^2倍。对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次，Ct值的变异系数为0．224％-0．609％。结论该方法灵敏度和特异度高，重复性好，可用于检测肝组织中HBV cccDNA。
- 王美容邱宁卢实春修典荣于建国李彤刘学恩庄辉
- 关键词：乙型肝炎病毒实时荧光定量聚合酶链反应
- 慢性乙型肝炎患者在核苷(酸)类药物规范化治疗前耐药突变研究被引量：5
- 2014年
- 目的研究慢性乙型肝炎患者在核苷(酸)类药物(NAs)规范化治疗前耐药突变情况。方法在我国北方地区4家医院收集148例慢性乙型肝炎患者在NAs规范化治疗前的血清,提取血清中HBV DNA,用巢式聚合酶链反应-直接测序法获得HBV全长RT区序列,用生物信息学技术筛查该区内11个经典耐药突变位点(rt169、rt181、rt184、rt194、rt202、rt204、rt236、rt250、rt80、rt173和rt180)并鉴定患者HBV基因型。采用SPSS 13.0软件进行统计分析。计量资料采用x±s表示,计量资料的比较采用t检验,计数资料的比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果 148例慢性乙型肝炎患者中,有142例血清HBV RT区在11个经典耐药突变位点上均为野生型氨基酸;6例患者检出经典耐药突变,分别为rtM204I2例,rtA181V、rtA181T、rtL180M+rtM204I、rtL80V+rtL180M+rtM204I各1例,其在半年以前均有不规范NAs治疗史。148例患者基因型分布为:B基因型占4.1%(6/148),C基因型占95.3%(141/148),D基因型占0.6%(1/148)。结论依据PCR产物直接测序结果,本研究中慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗基线时体内HBV以野生株为优势株,检出NAs耐药突变株的患者均有既往不规律抗病毒治疗史。基线耐药检测有助于NAs个体化治疗方案的优化。
- 邱宁李蕊温春阳王爱平董岚于建国安永孟庆华赵平李彤刘学恩庄辉
- 关键词：肝炎乙型慢性耐药突变
- 乙型肝炎相关疾病肝移植术后患者体内HBVDNA和共价闭合环状DNA的检测及其临床意义被引量：4
- 2015年
- 目的研究乙型肝炎相关疾病肝移植术后长期生存患者体内HBVDNA和共价闭合环状DNA（CCCDNA）的存在状况，并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-PCR）检测因乙型肝炎相关疾病而行肝移植的成人患者体内[包括血浆、肝组织和外周血单核细胞（PBMCs）]的HBVDNA和teeDNA的存在状况。计量资料均数间的比较采用t检验，计数资料的比较采用x^2检验。结果60例患者参加了本研究，其中男性48例，女性12例，年龄（52．98±9．40）岁，术后随访中位时间72（25～128）个月。共获得外周血59份，肝穿刺组织标本41份，检测结果显示59例患者血浆中54（91．5％）例未检测到HBVDNA，5例为低于检测下限（20IU／L）；在PBMCs中，有4例患者检测到HBVDNA，但均未检测到CCCDNA；在肝组织内，有5例患者检测到HBVDNA，其中3例检测到CCCDNA的存在。随访结果显示有1例患者发生了乙型肝炎复发，其PBMCs内检测到HBVDNA，同时该患者存在HBV基因变异。结论尽管有术后预防HBV再感染的联合方案，仍有少部分长期生存的患者体内可以检测到微量HBVDNA或（和）cccDNA，这部分患者属于乙型肝炎复发高风险人群，长期使用乙型肝炎免疫球蛋白和抗病毒药物是必要的。
- 段斌炜卢实春邱宁李蕊刘学恩
- 关键词：肝移植共价闭合环状DNA
