欧阳峰
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家中医药管理局基金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。
- 郝坡刘北忠欧阳峰王东生刘畅钟梁金丹婷王翀
- 关键词：诱饵载体诱饵蛋白
- 人K562细胞糖皮质激素受体基因阻断模型的建立
- 2008年
- 目的利用腺病毒载体介导的RNAi技术,建立糖皮质激素受体基因阻断的人K562细胞模型。方法将针对糖皮质激素受体发挥RNAi效应的合成寡核苷酸序列连入含有绿色荧光蛋白基因的腺病毒穿梭质粒pRNAT-H1·1/Adeno中,在含有pAdEasy-I病毒骨架的BJ5183大肠菌内进行同源重组;重组体通过脂质体介导转染293T细胞,并在293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒,通过反复感染扩增病毒以达感染靶细胞的适当滴度,通过绿色荧光表达来监测腺病毒扩增;应用Western blot法检测人K562细胞感染病毒后糖皮质激素受体蛋白的表达。结果重组腺病毒穿梭质粒psiGR/Adeno和重组腺病毒pAdEasy-siGR的成功构建;转染腺病毒载体的293T细胞表达绿色荧光,随着时间逐渐增强并且出现明显的细胞病变效应,经过3轮扩增,病毒达到合适的滴度;受腺病毒感染的K562细胞内糖皮质激素受体蛋白表达明显降低。结论可以成功构建针对糖皮质激素受体基因的RNAi腺病毒载体,为进一步研究糖皮质激素受体的生物学功能奠定基础。
- 郝坡刘北忠孟凡萍欧阳峰王东生刘畅钟梁金丹婷王翀
- 关键词：K562细胞糖皮质激素受体腺病毒载体构建RNAI基因表达
- 人K562细胞cDNA文库的扩增、纯化、鉴定和酵母细胞转化被引量：2
- 2008年
- 目的:对预转化到大肠杆菌DH5α中的人K562细胞cDNA文库进行扩增、纯化和鉴定并将文库质粒转化酵母细胞,为下一步的靶蛋白筛选做准备。方法:对K562细胞cDNA文库进行扩增,提取文库质粒,将文库质粒转化酵母Y187细胞,并用PCR和酶切鉴定转化结果。结果:成功的扩增人K562细胞cDNA文库、并验证了文库的多样性、将文库质粒成功转化酵母Y187细胞。结论:K562细胞cDNA文库的成功扩增、纯化、鉴定,为进一步的文库筛选奠定了基础。
- 欧阳峰王东生郝坡刘北忠刘畅钟梁金丹婷王翀
- 关键词：白血病K562细胞CDNA文库
- AML1融合基因致白血病作用
- 2006年
- 急性白血病是起源于骨髓造血干(祖)细胞恶性变的一组高度异质性疾病.
在人类急性白血病的65%病例中,可以发现有特异性的染色体易位.经研究发现染色体重排后形成的融合基因可以上调或降低激酶的活性、引起细胞信号传导改变和调节转录因子活性.急性髓白血病(acute myeloid leukemia 1,AML1)基因定位于21q2.2.急性白血病中AML1基因异常的比例较高,在急性髓白血病伴染色体突变的病例中占18%,30%的M2型有(8;21)的易位.本文通过对AML1的功能与其融合基因作用作一综述.
……
- 欧阳峰刘北忠涂植光
- 小分子配体酵母三杂交系统的建立
- 苦参碱能抑制白血病K562细胞的增殖【¨，但其作用的分子机制仍未明了，尤其是它的细胞内作用靶点。本课题拟构建小分子配体酵母三杂交系统以直接在活细胞内筛选与苦参碱有相互作用的靶蛋白。
该研究课题主要分为三个部分：...
- 欧阳峰
- 关键词：苦参碱地塞米松糖皮质激素受体白血病细胞增殖
- 文献传递
- 三种前处理方法对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定曲霉结果的对比研究被引量：1
- 2022年
- 目的丝状真菌在质谱前处理方法上尚无规范化指南,寻求高效前处理方法为实验的关键,该研究以梅里埃质谱仪(VITEK MS)为平台,探讨适用于质谱仪鉴定曲霉的最佳前处理方法。方法收集2021年1月至2021年12月由广东省人民医院临床分离并经基因测序的非重复曲霉114株,以及标准曲霉菌株3株,分别采用磁珠研磨法、冷冻研磨法和甲酸萃取法对117株曲霉前处理操作后进行质谱检测,比较不同前处理方法下的鉴定率、置信度、峰数量、耗时以及图谱质量的差异性。结果117株曲霉分别采用磁珠研磨法、冷冻研磨法和甲酸萃取法进行前处理后获得的质谱鉴定率分别为90.60%、61.54%和57.26%。磁珠研磨法的鉴定率显著高于其他两种方法(P<0.001),鉴定能力最佳,且获得的置信度和峰数量亦高于其他两种方法(P<0.05),所获得的蛋白特征峰数量更多、强度更强、更密集,结果可信度和图谱质量优于其他两种方法。结论曲霉使用磁珠研磨法前处理后进行质谱鉴定可获得较理想的鉴定效果和蛋白图谱质量,适合常规实验室曲霉的质谱鉴定。
- 袁凯旋欧阳峰刘泓伶胡雪姣赵云虎陈晓丽叶龙顾兵
- 关键词：曲霉基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 双培养法提高涂片阴性分枝杆菌检出率的回顾性研究
- 2022年
- 目的探讨双培养法对提高涂片阴性分枝杆菌检出率的应用价值。方法收集某院2019年1月—2021年9月送检住院首诊患者的普筛标本,并按固体培养、液体培养、固-液双培养进行分组。另选取涂片分枝杆菌阴性,固体、液体或固-液双培养阳性的患者,将其按送检标本部位分为肺分枝杆菌组和肺外分枝杆菌组,分析两组患者的临床特征。结果共调查涂片阴性患者6492例,其中固体组3234例,液体组1938例,双培养组1320例,253例培养阳性,检出率3.90%,固体组、液体组、双培养组培养阳性检出率分别为2.35%(76例)、4.54%(88例)、6.74%(89例);肺分枝杆菌检出率分别为3.11%、6.02%、7.13%,肺外分枝杆菌检出率分别为1.02%、2.68%、6.09%。253例涂片阴性培养阳性的患者中男性143例、女性110例;平均年龄(58.34±18.47)岁;检出时间中位数分别为34.65、10.45、9.89 d。肺分枝杆菌组中男性、咳嗽咳痰、呼吸道基础疾病、胸部CT有炎性渗出、结核感染T细胞斑点试验结果阳性所占比例较肺外分枝杆菌组高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。固-液体双培养组肺外分枝杆菌检出率较固体组、液体组培养高(均P<0.001),固-液体双培养组肺分枝杆菌检出率较固体组高(P<0.001)。结论肺结核患者伴有咳嗽咳痰、呼吸道疾病、胸部CT炎性渗出等特征,而肺外结核无典型特征。肺外结核的临床体征较肺结核隐匿,易漏诊,而固-液双培养法可以在优化标本前处理及工作流程方面提高分枝杆菌的检出率。
- 陈晓丽叶龙周典蓉赵越袁凯旋欧阳峰顾兵
- 关键词：分枝杆菌病检出率检出时间
