胡姗姗
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 白及种子表面消毒及接种的方法
- 白及种子表面消毒及接种的方法，包括如下步骤：在超净工作台中将滤膜放入注射器针头与针管之间夹紧，将白及种子放入针管中，用装有白及种子的针管吸取75％酒精10ml浸泡种子25～30秒打出酒精，再吸取0.1％升汞10ml，灭菌...
- 周琼韦远涛裴艳艳陆志森陈书权曾娜霞胡姗姗
- 文献传递
- 一种朱槿纤维快速制片的方法
- 一种朱槿纤维快速制片的方法，包括如下步骤：将剥下的新鲜植物树皮，先用质量百分数为15％‑25％重铬酸钾和8％‑15％硝酸混合液煮沸处理,再加入质量百分数为10％‑15％过氧化氢和50％‑65％醋酸混合液煮沸沸处理，将经处...
- 周琼裴艳艳辛佳佳陈书权陆志森韦远涛胡姗姗
- 用单性结实基因2A11-iaaM转化罗汉果的研究被引量：1
- 2018年
- 为了实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化,该研究利用pBI121-Gus构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因(2A11-iaaM)过量表达载体,以罗汉果雌株叶盘为材料,采用农杆菌介导法建立罗汉果高效遗传转化体系,转化和创制单性结实罗汉果种质,通过基因特异引物对的PCR扩增,初步检测出转基因阳性植株,将之移栽大田,观察转基因植株的单性结实性的表现。结果表明:构建罗汉果单性结实性相关的pBAI-Gus植物双元表达载体获得成功;建立了农杆菌介导的罗汉果叶盘遗传转化优化体系,即农杆菌菌液OD_(600)值为0.3～0.5,侵染10 min,最优选择培养基为MS+TDZ 0.7 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1)+Kan 5 mg·L^(-1)+Cef 300 mg·L^(-1);经PCR鉴定共获得4株转基因阳性雌株;将阳性植株扩繁后移栽田间,经田间调查发现,24株阳性扩繁植株中有5株正常开花,占总植株数的20.8%,且其子房未经人工授粉发育成幼果,表现单性结实性。在载体构建和农杆菌介导的罗汉果遗传转化体系优化的基础上,将外源单性结实相关嵌合基因整合进罗汉果基因组并得到表达,为后续研究单性结实罗汉果的遗传生理,创制转基因罗汉果单性结实新种质,以及克服其产业化中需要人工授粉和无籽化提供了理论和应用基础。
- 周琼胡姗姗郝庆林莫燕梅李刚唐美琼辛佳佳宁弋珍
- 关键词：单性结实转基因
- 一种朱槿纤维快速制片的方法
- 一种朱槿纤维快速制片的方法，包括如下步骤：将剥下的新鲜植物树皮，先用质量百分数为15％‑25％重铬酸钾和8％‑15％硝酸混合液煮沸处理,再加入质量百分数为10％‑15％过氧化氢和50％‑65％醋酸混合液煮沸沸处理，将经处...
- 周琼裴艳艳辛佳佳陈书权陆志森韦远涛胡姗姗
- 文献传递
- 罗汉果乙烯合成酶SgA CS1基因的克隆与表达分析被引量：5
- 2017年
- 在转录组unigene序列基础上,结合RACE技术,从罗汉果总RNA中克隆乙烯合成关键酶-1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶1(ACS1)全长cDNA,同时,应用hi TAIL PCR技术获得Sg ACS1的DNA全长。通过实时荧光定量PCR检测该基因在雄株、雌株以及Ag^+处理后的雌株在取/授粉前后的叶、茎、芽、花蕾、花中的相对表达量。克隆得到1 749 bp的cDNA全长,最长开放阅读框为1 530 bp,编码509个氨基酸,命名为Sg ACS1(GenBank登录号为KX620760),编码蛋白与同源物种苦瓜的相应蛋白序列相似性为86%,该蛋白具有磷酸吡哆醛转移酶结构域和转氨酶结合结构域,属于天冬氨酸转氨酶家族;获得Sg ACS1的DNA全长为3 245 bp,其中含有3个内含子,该内含子和5'UTR含有多个高水平转录调控因子、激素响应元件和环境胁迫相关的作用元件,暗示该基因参与转氨反应、生物体内乙烯的合成代谢等生物学过程,并且与其他激素共同发挥作用维持机体的正常生命活动。实时荧光定量PCR结果表明,Sg ACS1在罗汉果各个部位和时期均有表达,其中在授粉后的雌株花蕾中相对表达量最高,其次是授粉前后雌株的花和取粉前后雄株的芽,而Ag^+处理后的雌株在授粉后的花蕾和芽中的相对表达量最低,说明该暗示罗汉果Sg ACS1参与花芽形成、雄蕊原基分化、蕾中雄蕊发育以及雌花形成,Sg ACS1在雌株蕾中受到授粉或银离子诱导上调表达。
- 曾娜霞胡姗姗周琼李刚闵丹丹
- 关键词：ACC合成酶RACEHITAIL性别调控
- pBAR载体构建及其转化罗汉果的分析被引量：1
- 2019年
- 为了创制可免除人工授粉的转基因罗汉果雌性品系,利用植物双元表达载体pBI121-Gus,构建幼果实特异启动子2A11与单性结实相关基因rolB的嵌合基因表达载体pBAR (pBI121-2A11-rolB)。以罗汉果雌株叶盘为材料,以EHA105农杆菌介导遗传转化,经PCR扩增,鉴定出阳性植株,对阳性雌株进行扩繁、生根,最后移栽大田,并观察转基因植株的单性结实性状表现。结果显示,成功构建了单性结实相关基因的pBAR嵌合双元表达载体;转化感受态根癌农杆菌EHA105后,进一步转化雌株叶片,经过对叶片分化苗的检测,得到7株阳性植株,转化率为14.29%。为提高成活率,扩繁7株阳性植株,获得37株转基因单性结实植株株系,其中有8株正常开花,占总数的21.62%,正常开花的植株,未经人工授粉,发育成幼果,表现出单性结实性状。本实验在克隆单性结实相关基因和果实特异启动子的基础上,构建嵌合基因载体,通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法,获得了转基因罗汉果单性结实雌株系,为后续研究罗汉果单性结实性的遗传、生理、品种综合改良和深入利用提供了基础。
- 宁弋珍郝庆林李刚李正文李正文胡姗姗胡姗姗裴艳艳
- 罗汉果生长素响应因子SgARF8基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2018年
- 基于转录组Unigene序列信息,结合RACE技术,克隆罗汉果生长素响应因子基因Sg ARF8的全长。采用同源克隆法获取罗汉果Sg ACTIN基因,以该基因为内参,通过实时荧光定量PCR检测Sg ARF8在罗汉果不同器官组织中的时空表达。结果表明:获得Sg ARF8基因c DNA全长序列3 266 bp,Gen Bank登录号KU949383,最长ORF为2 547 bp,编码848 aa的蛋白质,预期分子量94.42 k D,等电点5.67,该编码蛋白具有DBD、CTD和MR等转录因子ARF特征性结构域,其5'端和3'端区域比较保守;克隆得到罗汉果内参基因Actin基因部分序列,命名为Sg ACTIN,Gen Bank登录号为KU949382;实时荧光定量分析表明,罗汉果Sg ARF8在茎、叶、芽、雌蕊、雄蕊、幼果中普遍表达,并且在雌蕊和15 d幼果中表达量较高。可见Sg ARF8广泛参与罗汉果生长发育调节过程,尤其与雌蕊和幼果的器官形态建成密切相关,也暗示该基因在罗汉果性别调控和单性结实遗传改良中具有重要应用价值。
- 郝庆林郑珊李刚李正文唐美琼周琼胡姗姗宁弋珍裴艳艳
- 关键词：克隆基因表达
- 农杆菌介导iaaM基因转化罗汉果雌性系的遗传研究
- 罗汉果是我国特有的药用植物和甜料经济作物,具有广阔的开发前景和市场空间。但罗汉果属雌雄异株植物,在栽培生产中需要依赖大量人工授粉,劳动成本高;其种子中含有大量种油,既影响口感,又增加了提取纯化的难度以及加工成本,制约了罗...
- 胡姗姗
- 关键词：单性结实转基因
