史志龙
- 作品数：3 被引量：31H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金国家公益性行业科研专项国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 基于高内涵分析的山药增强巨噬细胞吞噬活性及质量评价研究被引量：4
- 2018年
- 目的比较铁棍山药与非铁棍山药促进巨噬细胞吞噬活性的差异。方法采用CCK-8法,考察不同山药在不同浓度下的细胞毒性;在无毒剂量的基础上,建立高内涵结合荧光标记技术检测RAW264.7细胞吞噬GFP-E.coli细菌的体外生物模型,计算不同山药在不同浓度下的细胞吞噬率;采用"质反应平行线法"将测定的细胞吞噬率转化为生物效价,更好地检测铁棍山药与其他山药生物效价的区别。结果在0.695~5.56 mg(生药)·m L^(-1)内,11个批次的山药样品都不存在细胞毒性;高内涵分析细胞吞噬强度结果显示,在此浓度范围内,各种山药都能促进细胞吞噬率的增高;高内涵图像能够清晰地显示出RAW264.7细胞吞噬绿色荧光蛋白标记细菌的情况。生物效价结果显示,不同批次山药的免疫生物效价介于39.56~100 U·mg^(-1)之间,以铁棍山药的生物效价为高,且平均效价值明显高于非铁棍山药(P<0.05)。结论体外实验表明,铁棍山药及非铁棍山药都能不同程度地促进RAW264.7巨噬细胞的吞噬活性;且铁棍山药的生物效价明显高于非铁棍山药,这与普遍认为的"铁棍山药质量最佳"也相符。
- 曹俊岭杨文华史志龙柏兆方王伽伯张志杰李娆娆张玉君肖小河黄璐琦
- 关键词：生物效价
- 铁棍山药促进巨噬细胞吞噬细菌的高内涵分析方法研究被引量：8
- 2017年
- 目的建立巨噬细胞系RAW 264.7对绿色荧光蛋白标记的大肠杆菌(GFP-E.coli)吞噬活性的高内涵分析方法,评价铁棍山药在体外对巨噬细胞增殖和吞噬活性的促进作用。方法采用CCK-8法测定铁棍山药作用于RAW 264.7巨噬细胞的增殖活性。采用高内涵技术,建立铁棍山药调节巨噬细胞RAW 264.7吞噬细菌活性的评价方法。结果通过考察给药时间、细菌加入量、细菌刺激时间等因素,确定所建立方法的最佳方案为给药12 h、细菌加入量为50倍、细菌刺激时间1.5 h;方法重复性考察RSD值为2.31%。与不加药组相比,在铁棍山药质量浓度为0.156~1.25 mg/m L都能促进巨噬细胞的增殖,以及单个细胞的平均吞噬率;在1.25 mg/m L时铁棍山药促进巨噬细胞的增殖及吞噬活性的能力最强。结论首次建立铁棍山药促进巨噬细胞吞噬活性的高内涵分析方法,该方法具有准确、直观、高通量等优势;铁棍山药在体外既能促进巨噬细胞增殖,又能提高单个细胞的吞噬能力,为进一步分析山药等补益类中药的免疫活性及增强免疫机制的研究提供新思路和新方法。
- 杨文华史志龙柏兆方王伽伯张玉君樊冬鹤张孟捷李朝峰戚姝娅肖小河曹俊岭黄璐琦
- 关键词：巨噬细胞细胞增殖大肠杆菌
- 基于化学指纹图谱和抗血小板聚集效价的丹参质量评价被引量：19
- 2017年
- 通过化学分析和生物活性评价考察丹参药材的品质差异,探讨丹参抗血小板聚集生物活性的主要贡献成分。采用高效液相色谱(HPLC)技术建立丹参药材HPLC指纹图谱,以抗血小板聚集相对效价作为指标,评价不同产地不同批次丹参药材的品质差异,构建基于化学表征及生物效价测定的评价模式。结果表明,不同批次丹参药材的HPLC指纹图谱相似度很高(相似度0.930~0.998),而其抗血小板聚集相对效价相差10倍,提示化学指纹图谱难以反映丹参的活性和质量差异。通过化学指纹图谱与抗血小板聚集生物效价进行谱效相关分析,筛选出与生物活性相关系数大于0.5的6个色谱峰:二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及2个未知化合物。对上述4种已知化合物单体进行活性验证发现,隐丹参酮的抗血小板聚集活性最强,而其它3种丹参酮类化合物几乎没有体外抗血小板聚集活性。进一步比较丹参中高含量成分丹酚酸B与低含量成分隐丹参酮的活性贡献,结果表明,两者的活性贡献基本相当,说明隐丹参酮是丹参中低含量高活性成分,对评价丹参质量具有重要贡献度。
- 刘振杰史志龙王伽伯张海珠李春雨牛明何琴甄汉深肖小河
- 关键词：丹参抗血小板聚集指纹图谱生物效价
