张卫平 作品数:11 被引量:24 H指数:3 供职机构: 安徽医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
中脑星形胶质细胞神经营养因子在利福平诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤中的作用 2024年 目的探究中脑星形胶质细胞神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)在利福平(rifampicin,RFP)诱导的胆汁淤积性肝损伤中的作用。方法借助肝细胞MANF特异性敲除(hepatocyte-specific MANF knockout,HKO)小鼠模型,观察MANF基因缺失对RFP诱导的小鼠胆汁酸转运体表达的影响。体外观察MANF敲减后对人肝癌细胞HepG2的核因子红细胞系2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的影响。结果与野生型(wild type,WT)小鼠相比,RFP处理的WT小鼠的胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)以及多药耐药相关蛋白4(multidrug resistance-associated protein 4,MRP4)的蛋白和基因表达水平增加。然而,与RFP处理的WT小鼠相比,HKO小鼠中BSEP、多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MDR1)、MRP2/3/4和有机溶质转运蛋白α(organic solute transporterα,OSTα)的蛋白和(或)基因表达水平明显降低。体外细胞MANF敲减会削弱RFP诱导的Nrf2的表达以及核内移。结论MANF可能通过调节Nrf2的表达调控BAT的适应性表达,在RFP诱导的肝损伤中发挥保护作用。 曹世国 黄梦雪 屈柳芳 李杨 洪江龙 陈刚 张卫平关键词:利福平 药物性肝损伤 氧化应激在利福平所致大鼠肝损伤适应性模型中的作用 被引量:3 2016年 目的探讨利福平致大鼠肝损伤适应性现象及氧化应激可能涉及的参与过程。方法将正常对照组和利福平实验组大鼠各16只分别予以生理盐水10 m L/(kg·d)和利福平混悬液100 mg/(kg·d)每日一次空腹灌胃,共持续7周,动态监测大鼠灌胃当天、第14天、第28天和第49天血清转氨酶、胆红素和碱性磷酸酶水平。于第14天处死两组各4只大鼠,第49天处死剩余大鼠,检测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)活性,并观察其肝组织病理学改变。结果与正常组相比,利福平实验组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)水平在第14天达高峰,之后呈缓慢下降趋势(P<0.05),至第49天时,与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。相较正常组,利福平实验组大鼠MDA水平偏高,而SOD与GPX活性偏低(P<0.05)。大体标本可见利福平实验组大鼠肝脏黄染,光镜下可见肝组织存在脂肪变性、轻度坏死和炎症。结论利福平可导致大鼠肝损伤适应性现象,且氧化应激在一定程度上参与了上述过程。 蔡轶 任晓非 张卫平 陈丽红 许建明关键词:利福平 肝损伤 氧化应激 敲低MANF对利福平诱导HepG2细胞损伤的影响及机制 被引量:1 2021年 目的探讨敲低中脑星型胶质细胞源性神经生长因子(MANF)对利福平(RFP)诱导HepG2细胞损伤的影响及机制。方法慢病毒转染技术构建MANF敲低稳转细胞株(MANF Y25)及其对照细胞株(MANF Y07)。实验分为4组:MANF Y07+DMSO组、MANF Y07+RFP组、MANF Y25+DMSO组、MANF Y25+RFP组。给予HepG2细胞100μmol/L RFP 24 h后,Western blot和qRT-PCR检测各组细胞MANF及未折叠蛋白反应(UPR)相关基因葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译启动因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、Tribbles同源蛋白3(TRIB3)、肌醇需求激酶1(IRE1)、剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-S)、非剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-U)、活化转录因子6(ATF6)的蛋白及基因表达水平;Annexin V-PE/7-AAD双染法检测各组细胞凋亡率;CCK-8法检测各组细胞增殖变化;试剂盒检测各组细胞培养上清液中细胞损伤标志物谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)相对含量变化。结果在蛋白水平,RFP激活MANF、GRP78、p-eIF2α、ATF4、ATF6的蛋白表达;在基因水平,RFP诱导HepG2细胞MANF、GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、TRIB3的基因表达,并且MANF敲低后GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、ATF6蛋白表达水平及上述UPR相关基因的基因表达水平进一步上调(P<0.05),MANF敲低后细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞增殖能力降低(P<0.01),细胞培养上清液中ALT、AST、AKP、TBIL、IBIL水平升高(P<0.05),说明细胞损伤加重。结论RFP可激活UPR,敲低MANF后这种效应进一步加强,同时细胞损伤加重,表明MANF可能通过调节URP而在RFP诱导HepG2细胞损伤中发挥保护作用。 戴琼 张卫平 陈刚 王鹏 许建明 梅俏关键词:利福平 内质网应激 细胞损伤 慢性肝病患者中小肠细菌过度生长的研究 被引量:4 2022年 目的利用乳果糖氢呼气试验(LHBT)检测肝硬化和慢性肝炎肝纤维化(CHF)患者中小肠细菌过度生长(SIBO)的发生率,探讨其与炎症因子及氧化应激相关指标的关系。方法选取38例CHF患者和60例肝硬化患者以及31例健康对照组,利用LHBT的方法评估各组SIBO发生率。然后将受试者分为SIBO阳性组和SIBO阴性组,比较两组间临床症状和实验室检查,并检测其血清脂多糖(LPS)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10水平以及二胺氧化酶(DAO)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)水平,并对所检测的LPS、IL-6、TNF-α、IL-10、DAO、SOD、GSH、CAT的浓度与LHBT集值的相关性进行统计学分析。结果①CHF组和肝硬化组以及对照组SIBO阳性率分别为36.84%、60.00%和9.68%,差异有统计学意义(P<0.01);②SIBO阳性组患者和阴性组患者在Child–Pugh(CTP)分级及腹水的表现上差异有统计学意义(P<0.05);③SIBO阳性患者血清中LPS、IL-6、DAO、CAT、SOD水平高于SIBO阴性患者(P<0.05),IL-10、TNF-α以及GSH水平与SIBO阴性组差异无统计学意义;④患者LHBT集值与LPS、IL-6、DAO、SOD、CAT呈正相关(P<0.05),与TNF-α、IL-10、GSH的相关性差异无统计学意义。结论CHF以及肝硬化患者较健康对照组更易发生SIBO,且与外周血中多种炎症因子和氧化应激指标水平升高相关。SIBO可能通过肠道菌群失调导致的炎症反应和氧化应激等途径加重CHF和肝硬化患者的病情变化。 黄梦雪 陈刚 王鹏 曹世国 许建明 梅俏 洪汝涛 张卫平关键词:肝硬化 呼气试验 氧化应激 肠道菌群 中医药干预溃疡性结肠炎信号转导通路机制研究 被引量:6 2017年 溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病,属于中医学的"泄泻"、"痢疾"、"肠癖"等范畴。中医药防治UC研究的侧重点主要集中在改善肠黏膜组织学病变、调节细胞因子及炎症介质的表达、调节细胞凋亡、影响信号转导通路、抗氧化及一氧化氮自由基、调节免疫、改善微循环、调节肠动力等方面。 张卫平 许建明关键词:信号转导 溃疡性结肠炎 中医药干预 细胞因子 炎症介质 益气养血化瘀汤治疗慢性乙型肝炎急性发作期的临床效果 被引量:3 2021年 目的观察益气养血化瘀汤治疗慢性乙型肝炎急性发作期的临床效果。方法选取安徽省亳州市中医院2016年1月至2020年1月收治的慢性乙型肝炎急性发作期患者80例,按照随机数字表法将其分为两组,每组40例。对照组给予抗病毒、保肝、免疫调节等治疗,观察组在对照组基础上给予益气养血化瘀汤治疗,疗程8周。比较两组总有效率及治疗前后谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组ALT、TBil水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组IFN-γ、TNF-α水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气养血化瘀汤治疗慢性乙型肝炎急性发作期的效果较好。 李健民 张卫平 梁栋 杜大平关键词:慢性乙型肝炎 谷丙转氨酶 总胆红素 Γ干扰素 敲低PRDX6对利福平诱导HepG2细胞胆汁酸转运体适应性表达的影响 2024年 目的探讨敲低过氧化物还原酶-6(PRDX6)在利福平(RFP)诱导人肝癌细胞(HepG2)损伤及胆汁酸转运体适应性表达中的作用。方法将处于对数生长期的细胞均匀接种于6孔板中,使用特异PRDX6-siRNA、control-siRNA分别转染HepG2细胞构建敲低组及对照组。给予细胞100μmol/L RFP诱导24 h后,Western blot和qRT-PCR检测各组细胞PRDX6、多药耐药蛋白1(MDR1)、多药耐药相关蛋白2、3、4(MRP2、MRP3、MRP4)、Na+/牛磺胆酸协同转运蛋白(NTCP)的蛋白及基因表达水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率;CCK-8法检测各组细胞增殖变化;试剂盒检测各组细胞培养上清液中细胞损伤标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)相对含量变化。结果RFP可诱导HepG2细胞MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、NTCP及PRDX6的蛋白和基因表达水平升高(P<0.05),而敲低PRDX6后,MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、NTCP的蛋白和基因表达水平均有不同程度的降低(P<0.05)。此外,PRDX6敲低后HepG2细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞培养上清液中细胞损伤标志物(ALT、AST、TBIL、DBIL、TBA)水平升高(P<0.05)。结论RFP可增加HepG2细胞胆汁酸转运体及PRDX6的蛋白和基因表达量,敲低PRDX6并用RFP诱导后胆汁酸转运体的蛋白及基因表达量降低,同时细胞损伤加重,表明PRDX6在RFP诱导的HepG2细胞适应性反应中发挥保护作用。 屈柳芳 黄梦雪 曹世国 陈刚 许建明 张卫平关键词:利福平 细胞损伤 凋亡 AST/PLT比值指数与原发性胆汁性胆管炎不良预后的关系 被引量:2 2019年 目的探讨天冬氨酸氨基转移酶(AST)/血小板(PLT)比值指数(APRI)与原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者不良预后的关系。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院2008年1月至2018年5月收治的123例PBC患者的临床资料,通过Spearman秩相关分析APRI与患者肝组织学分期的关系,评估APRI、AST、1/PLT与PBC不良预后的相关性,分别绘制受试者工作特性曲线(ROC)并确定最佳截断值,选取曲线下面积(AUC)最大的指标,分析其与PBC患者预后的相关性。结果123例PBC患者中,28例出现不良预后,其中肝移植7例,肝病相关死亡21例。Spearman秩相关分析提示,APRI与PBC患者肝组织学分期秩相关系数Rs=0.552(P<0.001)。APRI、AST、1/PLT预测PBC不良预后的AUC分别为0.84(0.75~0.93)、0.76(0.66~0.86)、0.81(0.71~0.91),截断值分别为1.33、90.5U/L和0.0076×10^9/L。APRI>1.33、AST>90.5U/L、1/PLT>0.0076×10^9/L判断PBC出现不良预后的敏感性和特异性分别为85.71%、75.00%、71.43%和76.84%、81.05%、76.84%;阳性和阴性预测值分别为52.17%、53.85%、47.62%和94.81%、91.67%、90.12%;准确度分别为78.86%、79.67%、75.61%。APRI>1.33组较APRI≤1.33组生存率降低,差异有统计学意义(P<0.001)。结论APRI与PBC肝组织学分期呈正相关,基线APRI>1.33对PBC患者进展为肝移植或肝病相关死亡有一定预测价值。 陈刚 李杨 张卫平 许建明关键词:不良预后 敲减MANF对利福平诱导的HepG2细胞中胆汁酸转运体适应性表达的影响 被引量:1 2023年 目的 探讨中脑胶质细胞神经营养因子(MANF)在利福平(RFP)诱导的人肝癌细胞(HepG2)胆汁酸转运体的适应性表达中的作用。方法 使用慢病毒稳转构建对照组细胞株(Y07)和敲减组细胞株(Y25),于对数生长期的Y07和Y25细胞中加入RFP 200μmol/L处理48 h。利用qRT-PCR和Western blot检测MANF、胆盐输出泵(BSEP)、多药耐药相关蛋白2/3/4(MRP2、MRP3、MRP4)、多药耐药蛋白1(MDR1)、有机溶质转运体a/β(OSTα/β)、有机阴离子转运蛋白(OATP2B1)的蛋白和基因表达程度。检测增殖细胞核抗原(PCNA)、增殖细胞标志物Ki67蛋白和基因表达程度评价各组细胞增殖水平变化;检测C/EBP同源蛋白(CHOP)、天冬氨酸半胱氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白和基因表达程度变化评估各组细胞凋亡情况。用试剂盒检测各组细胞培养液上清中的损伤标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)的水平。结果 在蛋白和基因水平,RFP可诱导HepG2细胞的MANF、BSEP、MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、OSTα、OSTβ、OATP2B1的上升(P<0.05),而MANF敲减后BSEP、MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、OSTα、OSTβ、OATP2B1的蛋白和基因表达水平均下降(P<0.05)。在RFP作用下,敲减MANF后PCNA、Ki67的蛋白表达相对较高,CHOP、Caspase-3蛋白和基因表达上升(P<0.05),肝细胞损伤标志物水平上升(P<0.05)。结论 RFP可诱导HepG2细胞胆汁酸转运体的表达上升(P<0.05),而敲减MANF后的HepG2在RFP诱导下胆汁酸转运体的表达会明显下降(P<0.05),同时细胞损伤加重,提示MANF在RFP诱导的适应性反应中起保护作用。 曹世国 戴琼 黄梦雪 屈柳芳 许建明 张卫平关键词:利福平 细胞增殖 细胞凋亡 细胞损伤 105例药物性胆汁淤积型肝损伤患者临床特征分析 被引量:2 2023年 目的探讨药物性胆汁淤积型肝损伤患者基本信息、临床特征、影像学表现及转归。方法回顾性分析近5年来的住院患者中诊断为药物性胆汁淤积型肝损伤的病例资料,记录其临床数据,至少随访6个月。结果共有105例药物性胆汁淤积型肝损伤患者,中位年龄55岁,男性占比54.3%,多无特异性临床症状。所涉及的药物近80余种,前3位依次为中药(34.3%)、抗肿瘤药(22.9%)、抗生素(10.5%)。49例行磁共振胰胆管成像患者中,有7例(14.3%)患者存在硬化性胆管炎样改变。105例患者中治愈53例(50.5%),好转41例(39.0%),未愈7例(6.7%),死亡4例(3.8%),总有效率为89.5%。结论药物性胆汁淤积型肝损伤主要发生于老年患者,涉及药物种类较多,以中药最为多见。药物还可引起类似于硬化性胆管炎样改变,因此应将药物性胆汁淤积型肝损伤作为胆汁淤积和胆管造影异常患者的鉴别诊断之一。基础肝病对患者预后无影响。二元Logistic逐步回归分析示:Roussel Uclaf因果关系评价法(RUCAM)评分低、血红蛋白水平低、住院时间短以及白细胞计数高是药物性胆汁淤积型肝损伤患者转归的独立危险因素。 陈茜楠 徐琰 刘晓昌 梅俏 张卫平 许建明关键词:硬化性胆管炎