杨佳佳
- 作品数:6 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省社会发展科技计划云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法及其应用
- 本发明公开一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法,将登革病毒标准株进行RT‑PCR扩增,分别得到I‑IV型登革病毒的NS1全基因,再与pMD19T载体连接,然后进一步得到pET30a‑NS1质粒,将所得pET30...
- 孙强明王晓丹席珏敏陈俊英潘玥姜黎明罗佳杨佳佳
- 文献传递
- Ⅱ型登革病毒前膜抗体对该病毒在THP-1细胞中复制能力的影响
- 2018年
- 目的探讨Ⅱ型登革病毒(dengue virusⅡ,DENVⅡ)前膜(presynaptic membrane,prM)抗体对DENVⅡ在THP-1细胞中复制能力的影响。方法采用不同稀释度(1/4~1/16 384)的DENVⅡanti-pr M单克隆抗体分别与不同MOI的DENVⅡ(MOI分别为3、0.75及0.19)复合感染THP-1细胞。建立DENVⅡ荧光定量PCR检测标准曲线,检测THP-1细胞培养上清液的病毒拷贝数。结果 DENVⅡ按MOI=3感染THP-1细胞,当prM稀释度为1/16和1/16 384时诱发THP-1细胞产生病毒的载量较高,prM稀释度为1/64和1/256时抑制病毒生长;DENVⅡ按MOI=0.75感染THP-1细胞,当prM稀释度1/16时可诱发更高浓度病毒载量;DENVⅡ按MOI=0.19感染THP-1细胞时,不会诱导产生高浓度的病毒载量。结论中浓度pr M抗体可抑制DENVⅡ在THP-1细胞中的复制能力,而高及低浓度prM抗体可促进DENVⅡ在THP-1细胞中的复制能力。
- 姜黎明杨佳佳罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词:前膜抗体THP-1细胞
- Ⅲ型登革病毒在THP-1细胞上的ADE模型建立
- 2017年
- 登革热(dengue fever,DF)是由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型登革病毒(dengue virus,DENV)引起的急性传染病,抗体依赖增强感染(antibody-dependent enhancement,ADE)是自限性的登革热以及危及生命的登革出血热(dengue hemorrhagic fever,DHF)或登革休克综合症(dengue shock syndrome,DSS)等重症的主要原因。采用不同稀释度的Ⅱ型登革病毒prM前膜抗体与分离自云南西双版纳重症病人的Ⅲ型登革病毒复合感染THP-1细胞,通过实时荧光定量PCR发现亚中和浓度prM前膜抗体诱发THP-1细胞液中更高浓度的病毒载量。在THP-1细胞系上的研究可为后续研究登革病毒ADE打下坚实的基础。
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- 关键词:THP-1细胞
- 登革病毒感染C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞CPE的比较及病毒检测被引量:1
- 2017年
- 目的比较感染登革病毒(dengue virus,DV)的C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞的CPE情况,并进行病毒检测。方法将分离自云南西双版纳的Ⅲ型DV中国株D13053和广东省疾病预防控制中心惠赠的Ⅱ型中国株D10156,以5 MOI感染C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞,同时将Vero和C6/36细胞来源的DV,分别以5 MOI感染C6/36细胞,连续观察CPE至第10天,并利用DV通用引物,RT-PCR法鉴定细胞培养上清中的病毒。结果C6/36细胞对DV最敏感并有明显的病变,细胞几乎100%聚集、破碎并呈网格状;Vero、BHK-21细胞至第5天出现脱落、破碎和悬浮等病变,对DV有一定的敏感性;THP-1细胞至第10天未出现CPE。PCR核酸检测发现,感染DV的C6/36、THP-1、BHK和Vero细胞培养上清中可检测到DV,而Vero细胞来源DV感染的C6/36细胞未检测到DV。结论 DV对不同细胞系的感染能力和感染DV后CPE的表现形式存在较大差异。
- 杨佳佳姜黎明罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词:登革病毒C6/36细胞BHK-21细胞THP-1细胞
- 一种58型HPV病毒E6/E7致癌基因拷贝数的绝对定量检测方法
- 本发明提供一种58型HPV病毒E6/E7致癌基因拷贝数的绝对定量检测方法,通过检索NCBI 58型HPV病毒基因组序列,获取其E6及E7基因序列信息,以47‑941位点区域构建58型HPV病毒E6及E7致癌基因共同标准品...
- 孙强明席珏敏陈俊英潘玥王晓丹姜黎明罗佳杨佳佳
- 文献传递
- Ⅰ-Ⅳ登革病毒基因同源性分析及Ⅱ型C蛋白二级结构预测被引量:1
- 2017年
- 目的对登革病毒(dengue virus,DENV)Ⅰ~Ⅳ基因同源性进行分析,同时对DENVⅡC蛋白的二级结构进行预测,为更深入了解DENV 4个血清型间差异及衣壳蛋白C构想。方法通过DNAMAN分子生物学分析软件和蛋白结构在线预测网站分别对登革病毒基因同源性及C蛋白的二级结构进行预测。结果在登革病毒基因组同源性中,DENVⅠ与Ⅲ同源性最高为72%,发现DENVⅠ与Ⅳ同源性最低为67%;在登革病毒基因中,前膜基因prM的的同源性最高为82.5%,非结构基因NS2a的同源性最低为55.28%。在编码capsid的氨基酸中,占组成比例最多的为是精氨酸,可能存在的蛋白结合位点较多。结论通过基因组同源分析图谱看出Ⅰ~ⅣDENV在结构基因(C、prM、E)之间和非结构基因NS1,NS2b和NS3中的同源性较高,同时蛋白二级结构预测发现DENV ⅡC蛋白可能具有分子识别和蛋白骨架等功能。
- 姜黎明杨佳佳罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词:登革病毒同源性CAPSID