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类风湿关节炎血清免疫复合物的质谱鉴定与差异蛋白分析被引量：3: 2017年; 目的类风湿关节炎(RA)是一种典型的Ⅲ型超敏反应,可在滑膜组织中发现大量的免疫复合物及补体的沉积,但具体的致病机制尚不清楚。文中旨在探究RA血清免疫复合物中抗原谱的表达情况。方法血清样本取自2013年1月至2015年12月南京军区南京总医院门诊和住院RA患者共55例为RA组。RA组分为2个亚组,其中抗CCP抗体(+)RA亚组41例,抗CCP抗体(-)RA亚组14例。同时选取SLE患者41例血清样本为疾病对照组,健康体检人群41例血清样本为健康对照组。用PEG沉淀法从4组混合血清中提取免疫复合物,然后通过免疫共沉淀、胶内酶解后进行质谱分析。用Vennny2.1.0进行各组之间总蛋白差异比对,结果以RA组蛋白FOT值大于疾病对照组、健康对照组FOT值的2倍即判定为上调蛋白,小于疾病对照组、健康对照组FOT值0.5倍判定为下调蛋白。利用STRING软件对差异蛋白进行进一步功能分析。结果在RA患者血清免疫复合物中共鉴定出277种蛋白,其中抗CCP抗体(+)RA亚组有162种蛋白,抗CCP抗体(-)RA亚组有248种蛋白。相对疾病对照组与健康对照组,仅在RA组出现共有129种蛋白,其中,抗CCP抗体(+)RA亚组有38种蛋白,抗CCP抗体(-)RA亚组有109种蛋白,2亚组共有18种蛋白。RA组与对照组共有蛋白中,抗CCP抗体(+)RA亚组有2种蛋白上调,抗CCP抗体(-)RA亚组有11种蛋白上调。下调蛋白中,抗CCP抗体(+)RA亚组有17种蛋白表达下调,抗CCP抗体(-)RA亚组共计21种蛋白表达下调。结论抗CCP抗体(-)RA亚组相对抗CCP抗体(+)RA亚组鉴定出更多的差异蛋白,差异蛋白的鉴定为探究RA发病机制寻找新的生物学标记物提供新的思路和方向。; 管晓龙王海永周莹徐羽中李昂宋淑圣李晓军虞伟; 关键词：类风湿关节炎质谱免疫复合物

组织细胞内瓜氨酸化蛋白的鉴定方法被引量：1: 2017年; 瓜氨酸化是指精氨酸在钙离子存在的情况下,由肽酰基精氨酸脱亚胺酶介导引起的一种翻译后修饰。蛋白质瓜氨酸化修饰的上调参与体内多种疾病的发病机制,并具有重要的病理生理学意义。组织细胞中瓜氨酸化位点的鉴定依然迫切需要多种具有更高敏感性和特异性的定量和高通量的检测方法,随着化学衍生技术和质谱技术的发展,新的快速精准的蛋白质组学技术依然具有较好的发展和应用前景。文章主要通过介绍显色剂分析、免疫识别、质谱分析等多种瓜氨酸化多肽的检测方法,以期为复杂生物样本中瓜氨酸位点的鉴定提供新的思路和方向。; 管晓龙周莹李晓军虞伟; 关键词：瓜氨酸质谱类风湿关节炎

质谱技术对类风湿关节炎患者滑膜免疫复合物差异蛋白质的分析被引量：5: 2017年; 目的利用质谱技术对类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜中的免疫复合物进行全面的抗原谱分析。方法选取本院3例RA患者和3例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节滑膜,通过蛋白质提取、免疫沉淀、胶内酶解和液相色谱串联质谱系统,对滑膜免疫复合物进行抗原谱分析。用FOT值(fraction of total)评价蛋白质的丰度,通过FOT值的比较筛选出上调蛋白和下调蛋白。用David和String软件对差异蛋白质进行功能富集、相互作用网络和信号通路分析。结果在RA和OA患者的关节滑膜组织免疫复合物中分别鉴定出511和526种蛋白质。通过维恩图比较,仅在RA组出现的蛋白质有170种。RA组有45种蛋白质发生上调,85种蛋白质发生下调。结论热休克蛋白HSP90AA1、HSP70、人类白细胞抗原(HLA)-G、硫氧还蛋白、膜联蛋白A2和玻连蛋白可能通过不同的机制参与RA的发病过程,具有RA新的生物标志物的潜在应用价值。; 王海永管晓龙赵琴飞徐羽中张宇宋淑圣李昂吕幸周莹虞伟赵建宁李晓军; 关键词：免疫复合物质谱

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周莹

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