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肝细胞癌患者PBMCs中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA水平及其意义被引量：2: 2013年; 目的探讨肝细胞癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA水平变化及意义。方法在肝细胞癌患者20例和健康对照人群10例,采用RT-PCR法检测PBMC中T-bet、GATA3和FoxP3mRNA水平。结果 HCC患者和健康对照T-bet水平分别为0.554±0.030和0.514±0.071(P=0.391);HCC患者和健康对照GATA3水平分别为0.956±0.030和0.535±0.028(P<0.01);HCC患者和健康对照FoxP3水平分别为0.976±0.073和0.772±0.083(P<0.01);HCC患者和健康对照T-bet/GATA3比值分别为0.697±0.078和0.963±0.133(P<0.01)。结论肝细胞癌患者PBMC中GATA3和FoxP3 mRNA水平上调,可能参与了HCC的发生和发展过程。; 杨智陈洪涛吴诗品; 关键词：肝细胞癌 T-BET GATA3 FOXP3

一种新的HBV DNA rtA181T耐药突变检测方法被引量：1: 2016年; 目的 :通过巢式PCR及特异引物,建立一种新的乙肝病毒(HBV)DNA rtA181T耐药突变的PCR直接扩增检测方法。方法:巢式PCR方法第1轮扩增HBV DNA逆转录酶rt活性域片段,第2轮PCR上游引物3′末端碱基设计为与HBV DNA rtA181T突变碱基相同的碱基,扩增出的目的基因片段,即为突变片段。利用该方法 ,本文检测了43例HBV DNA rtA181T变异标本,分析该方法检测的灵敏性;并比较分析低拷贝HBV DNA水平与高拷贝HBV DNA水平下,该方法与PCR-Sanger测序法检测HBV DNA rtA181T突变的一致性。结果:产物经测序证实,突变检测引物巢式PCR法能扩增出HBV DNA rtA181T耐药突变。在HBV DNA水平为24 U/μL、rtA181T突变株含量低至10%时,该方法仍能较好检测出rtA181T变异片段。对43例不同拷贝水平的HBV DNA rtA181T耐药变异临床标本检测显示,该方法检测灵敏性达100%,常规PCR-Sanger测序灵敏性为74%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :基于巢式PCR及突变引物为基础的HBV DNA rtA181T耐药突变PCR直接检测法能较好地检测HBV DNA rtA181T耐药变异发生;对HBV DNA低拷贝水平下的rtA181T耐药变异检测,该方法灵敏性优于Sanger测序法,且有较好的特异性。这对早期发现HBV DNA耐药突变、及时更改抗HBV治疗策略具有重要临床指导意义。; 陈洪涛何桂蓉吴诗品; 关键词：乙型肝炎病毒耐药性突变基因测定

2',5'-寡腺苷酸合成酶基础活性对干扰素α治疗慢性丙型肝炎信号传导的影响机制研究被引量：1: 2015年; 目的观察慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中2',5'-寡腺苷酸合成酶(2-5AS)基础活性对干扰素(IFN)信号分子改变的影响,探讨IFN-α治疗慢性丙型肝炎的作用机制。方法选择60例慢性丙型肝炎患者,抽取外周血分离出PBMC,每份标本进行2-5AS基础活性测定后分为实验组和对照组,对照组PBMC体外培养时不加IFN-α,实验组PBMC体外培养时加入IFN-α。培养24 h后,测定PBMC中2-5AS活性、IFN-α受体(IFN-αR)、信号传导及转录激活因子(Stat)1、Stat2、两面神激酶1(Jak1)和酪氨酸激酶2(Tyk2)等指标。结果实验组PBMC培养24 h后2-5AS活性、Jak1、Stat1、Stat2和Tyk2等表达明显增高(P<0.05),IFN-αR表达降低(P<0.05)。2-5AS基础活性与IFN-α刺激下PBMC中2-5AS、Tyk2和Stat1的表达呈负相关(P<0.05),而与IFN-αR、Jak1和Stat2的表达无相关性(P>0.05)。结论 2-5AS基础活性可下调PBMC对外源性IFN-α的敏感性,Stat1、Tyk2表达降低可能是下调机制发生的原因。; 苏冬娜陈洪涛; 关键词：干扰素慢性丙型肝炎信号分子

IL-22和IL-17 mRNA在慢性HBV感染者PBMCs中的表达及其意义被引量：4: 2012年; 目的:探讨慢性HBV感染者外周血单个核细胞IL-22和IL-17 mRNA表达及其对病情转归的影响.方法:以慢性乙型肝炎中度患者33例、重度患者21例、重型肝炎患者16例、乙型肝炎肝硬化患者16例和健康对照10例为研究对象,采用RT-PCR方法检测患者外周血单个核细胞IL-22和IL-17 mRNA的表达.结果:CHB中度、CHB重度和肝硬化患者IL-22表达水平无统计学意义,但均高于健康对照组,差异有统计学意义(P=0.000);而重型肝炎患者IL-22表达水平低于该3组患者,高于健康对照组,但差异无统计学意义(P=0.064).各组IL-17表达水平相似但均高于健康对照组,差异有统计学意义(P=0.000);重型肝炎患者IL-17表达水平均低于其他3组患者,与CHB中度患者比较差异有统计学意义(P=0.014),与CHB重度和肝硬化患者比较差异无统计学意义(P=0.172,0.968).结论:IL-22的下调不利于肝细胞损伤后的修复,IL-22分泌的增加对减轻肝组织的损伤特别是重型肝炎的恢复可能是有意义的.慢性HBV感染患者IL-17均明显升高,提示其可能参与慢性HBV感染肝组织炎症的发生,且对慢性肝病纤维化起一定作用.; 杨智陈洪涛张毅吴诗品; 关键词：慢性HBV感染白介素-22 白介素-17

NLRP3、AIM2、IFI16炎症小体在慢性乙型病毒性肝炎患者PBMC中的活化水平和与HBV感染的相关性分析被引量：11: 2017年; 目的:探讨乙肝病毒(HBV)是否激活了慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)和干扰素诱导蛋白16(IFI16)炎症小体,分析HBV影响炎症小体活化的可能机制.方法:收集感染内科临床确诊CHB患者35例.同时选取健康住院医师28例为对照.以常规淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离健康对照组和CHB患者组静脉血得到PBMCs,采用逆转录、实时荧光定量PCR检测CHB患者组和健康对照组PBMCs NLRP3、AIM2、IFI16、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶1(CASP1)、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平,ELISA法检测两组血清中IL-1β蛋白分泌水平.结果:CHB患者组和健康对照组PBMCs ASC、NLRP3、AIM2、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平及两组血清IL-1β蛋白分泌水平无显著性差异.CHB患者组PBMCs IFI16、CASP1 mRNA表达水平显著上调,且IFI16 mRNA表达水平与患者血清HBV DNA载量显著正相关(r=0.699 8,P<0.01).结论:慢性HBV感染未导致CHB患者PBMCs NLRP3、AIM2炎症小体的活化;尽管HBV DNA可能诱导了CHB患者IFI16炎症小体的高表达,但通过抑制pro-caspase-1的活化、IL-1β的表达,HBV阻断了IFI16炎症小体的活化效应.; 陈洪涛陈月吴诗品

肝细胞癌患者外周血单个核细胞Foxp3 mRNA水平变化被引量：1: 2015年; 目的检测初发现未治疗肝细胞癌(HCC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中Foxp3 m RNA水平变化及其与血清AFP水平的关系。方法在HCC患者60例和健康人20例,采用RT-PCR法检测PBMCs中Foxp3m RNA水平,常规检测血清AFP水平。结果 HCC患者和健康对照组外周血Foxp3 m RNA水平分别为(0.976±0.073)和(0.772±0.083),差异有统计学意义(P<0.01);经Pearson相关性分析显示,HCC患者外周血Foxp3 m RNA水平与AFP水平呈正相关(r=0.226,P=0.025)。结论 HCC患者PBMCs中Foxp3水平明显升高,对肿瘤的发生发展可能具有一定的预测作用。; 杨智陈洪涛吴诗品; 关键词：肝细胞癌 FOXP3 外周血单个核细胞甲胎蛋白

慢性乙型肝炎患者血清脂联素水平及其与代谢指标的关系被引量：2: 2014年; 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)和CHB合并脂肪肝患者血清脂联素(ADP)变化及与体脂、血脂、胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选择CHB和CHB合并脂肪肝患者各20例,健康对照组18例,3组年龄、性别比较差异无统计学意义。测量其空腹体质量、腰围(WC)和臀围,检测血清胰岛素(FINS)、糖(FBG)、血脂和ALT、AST等,计算身体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定血清ADP浓度。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,计数资料组间比较采用卡方检验,相关性分析用Pearson相关分析。结果 CHB患者ADP质量浓度为(10.56±2.48)mg/L,CHB合并脂肪肝患者为(4.46±2.16)mg/L,对照组为(6.38±2.91)mg/L,3组差异有统计学意义(F=30.537,P=0.000)。CHB合并脂肪肝患者的BMI、WC、WHR及血清三酰甘油(TG)均明显高于CHB组和对照组(P均<0.01);3组血清FINS、FBG、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及IR差异均无统计学意义。所有CHB患者ADP与BMI、WC、WHR、IR、FINS、FBG、TC、HDL-C及LDL-C均无相关性,仅在合并脂肪肝时与TG呈负相关(r=-0.485,P=0.015)。结论 CHB患者血清ADP水平明显升高,推测可能是ADP对肝脏产生保护作用的反应,而在合并脂肪肝时明显降低,与TG升高关系密切。; 彭红杨健麦润章陈洪涛; 关键词：肝炎乙型慢性脂联素

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞共刺激分子和FOXP3 mRNA表达的研究: 2010年; 目的探讨外周血单个核细胞共刺激分子和(CD_4)^+(CD_(25))^+调节性T细胞FOXP3 mRNA表达在慢性乙型肝炎患者免疫耐受中的作用。方法以β-actin为内参,用RT-PCR和Real-Time PCR方法对61例慢性HBV感染者(其中免疫清除期患者37例、免疫耐受期患者24例)和20例健康对照组外周血单个核细胞共刺激分子B7-2、PD-L1及FOXP3 mRNA的表达水平进行检测,并分析PD-L1/B7-2比值与FOXP3的相关性。结果外周血单个核细胞PD-L1/B7-2比值在慢性乙型肝炎患者免疫清除期和免疫耐受期均明显高于健康对照组;FOXP3 mRNA表达在免疫清除期明显高于免疫耐受期和健康对照组(P<0.01);免疫清除期PD-L1/B7-2比值与FOXP3表达呈明显正相关。结论慢性乙型肝炎患者正负共刺激分子和FOXP3 mRNA的表达有相关性;共刺激分子和(CD_4)^+(CD_(25))^+调节性T细胞可能共同参与调节机体对HBV感染的免疫耐受。; 费凌霞吴诗品孙保东孙保东; 关键词：慢性乙型肝炎共刺激分子 CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫耐受

Th22在肝炎发病机制中的作用被引量：4: 2011年; 辅助性T淋巴细胞的概念最早由Coffman和Carty及Mosmann等在1986年提出，是机体重要的免疫调节细胞，根据其产生细胞因子的不同可分为不同的功能亚群，即Th1和Th2，分别参与调节细胞免疫和体液免疫，它们之间可相互调节，影响免疫应答的格局。T淋巴细胞（简称T细胞）亚群具有功能可塑性，新近发现并描述了其他一些CD4^＋T细胞亚群，; 杨智陈洪涛吴诗品; 关键词：肝炎免疫

B7-2和PD—L1mRNA表达在慢性乙型肝炎免疫耐受中的意义被引量：1: 2009年; T淋巴细胞介导的细胞免疫反应是乙型肝炎病毒（HBV）感染的主要免疫反应，而T细胞的活化依赖于双信号的刺激，第一信号来自抗原，第二信号由共刺激分子提供。B7—2（CD86）和PD—L1（B7-H1）是正负共刺激分子的代表，B7-2组成型表达于抗原提呈细胞上，上调速度非常快，迅速促进T细胞的分化和产生效应；PD-L1被广泛地诱导性表达在身体各器官组织中，对免疫应答起负性调控作用，减弱T细胞的免疫应答，是诱导免疫耐受和T细胞凋亡的主要共刺激分子。本实验研究慢性HBV感染免疫耐受期和免疫清除期外周免疫细胞上B7-2及PD—L1mRNA的表达水平，以期阐明共刺激分子表达在慢性HBV感染免疫耐受中的意义。; 费凌霞吴诗品陈洪涛陈斌辉; 关键词：免疫耐受期 B7-2 慢性乙型肝炎 MRNA表达慢性HBV感染共刺激分子

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陈洪涛

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