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濒危药用植物桃儿七和山莨菪的遗传多样性分析: 针对中国甘南青藏高原边缘区代表性道地药材桃儿七（Sinopodophyllum hexandrum（Royle）Ying）和山莨菪（Anisodustanguticus（Maxim.）Pascher）进行遗传多样性分析。...; 张盾; 关键词：桃儿七山莨菪分子标记物种保护; 文献传递

山莨菪ISSR-PCR反应体系的建立与优化被引量：2: 2017年; 以山莨菪为实验材料,通过正交设计与单因素两种试验方法对山莨菪ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA浓度,Mg2+,Taq酶,d NTPs及引物)进行4水平优化与筛选。经过PCR扩增结果的比较与分析,确定各因素的最适浓度,建立山莨菪的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明,25μL最佳反应体系为:3.0 mmol/L Mg2+、0.2 mol/L d NTPs、0.4μmol/L引物、0.5 U Taq DNA酶、40 ng DNA、2.5μL 10×Buffer。在最佳优化体系条件下,从100条引物中筛选出13条ISSR扩增引物,并确定各自最佳退火温度。建立的山莨菪ISSR-PCR反应体系,经过11份山莨菪样品检测,证明该体系稳定,可用于山莨菪遗传差异性分析。; 任梦云陈彦君张盾杜乐山刘方关潇张银东; 关键词：山莨菪 ISSR-PCR 正交试验

ISSR标记技术在药用植物资源中的研究进展及应用被引量：35: 2017年; 简单重复系列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)是在简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)基础上发展起来的一种新型分子标记技术。目前药用植物研究与开发面临资源枯竭、药效物质不明确及质量难以控制等难题,DNA分子标记技术,包括ISSR技术为上述难题提供了新的解决办法。比较了几种常用分子标记的优缺点,最后着重介绍了目前广泛应用于药用植物研究中的DNA分子标记ISSR的技术原理和特点,综述了ISSR分子标记技术在药用植物的遗传多样性和遗传结构、种质资源鉴定、中药品质鉴定,以及遗传图谱等方面的研究进展及应用前景,旨为药用植物的开发和利用提供参考。; 任梦云陈彦君张盾杜乐山刘方关潇张银东; 关键词：ISSR 分子标记药用植物基因图谱

椭圆叶花锚ISSR-PCR体系的建立与优化被引量：3: 2019年; 为建立椭圆叶花锚ISSR-PCR最佳反应体系,本研究采用正交设计和单因素试验的方法,对影响ISSR-PCR反应体系的5种关键因素(DNA,dNTPs,引物,Mg^2+,Taq DNA酶)进行最适浓度筛选,并采用甘肃省的3个居群进行验证。结果表明,各因素影响大小依次为:DNA浓度>Mg^2+>dNTPs>Taq DNA酶>引物浓度。椭圆叶花锚ISSR-PCR反应的最佳体系为(25μL):50 ng DNA模板,Mg^2+2.0 mmol/L,dNTPs 0.20 mmol/L,Taq酶1.5 U,引物0.4μmol/L,2.5μL 10×Buffer。选取甘肃省3个居群进行验证,结果显示扩增条带清晰明亮且重复性好,表明该反应体系适用于椭圆叶花锚的ISSR分子标记。该反应体系的建立可为椭圆叶花锚ISSR标记开发、遗传多样性、遗传图谱构建等后续分析提供参考。; 杜乐山谷思张盾任梦云臧春鑫关潇; 关键词：ISSR-PCR 正交试验单因素试验

濒危藏药桃儿七cpSSR-PCR引物开发与反应体系优化被引量：4: 2018年; 利用桃儿七叶绿体全基因组开发cpSSR引物,使用正交设计试验,对桃儿七cpSSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA,Mg^(2+),Taq DNA酶,dNTPs及ISSR引物)进行筛选优化来研究桃儿七遗传多样性。选取甘肃碌曲县则岔石林桃儿七居群样本及13个不同桃儿七居群验证该反应体系。正交试验表明:各因素显著性为Mg^(2+)>引物>Taw酶>DNA浓度>dNTPs,桃儿七cuss-PCR反应的最佳体系为(25μL):DNA20 ng/μL,Mg^(2+)1.5 mmol/L,dNTPs 2.0 mmol/L,Taq DNA酶0.5 U,引物1.0μmol/L,2.5μL 10×Buffer。该体系具有很高的稳定性和重复性,并为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。; 张盾任梦云张银东关潇; 关键词：桃儿七引物开发正交试验

濒危藏药桃儿七ISSR-PCR反应体系的建立与优化被引量：2: 2017年; 为通过ISSR分子标记研究桃儿七遗传多样性,建立并优化桃儿七的ISSR-PCR反应体系。使用正交设计辅以单因素试验,对桃儿七ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA,Mg^(2+),Taq DNA酶,d NTPs及ISSR引物)进行筛选优化,选取甘肃碌曲县西仓神山山顶桃儿七居群样本验证该反应体系。正交试验各因素显著性为引物>Taq DNA酶>DNA浓度>dNTPs>Mg^(2+),桃儿七ISSR-PCR反应的最佳体系为(25μL):2.5 mmol/L Mg^(2+),0.2 mol/L dNTP,0.4μmol/L引物,0.5 U Taq DNA酶,40 ng DNA,2.5μL 10×Buffer。该体系具有高稳定性,多态性丰富的特点,为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。; 张盾任梦云关潇张银东; 关键词：桃儿七 ISSR-PCR 正交试验单因素试验

基于ISSR分子标记的野生山莨菪遗传多样性研究被引量：11: 2018年; 目的通过对甘肃、青海山莨菪Anisodus tanguticus遗传多样性研究,为野生山莨菪资源的保护提供依据。方法采用ISSR分子标记技术,对11个野生山莨菪居群的127份DNA进行扩增,对其扩增条带进行遗传多样性分析,在所得遗传距离的基础上进行UPGMA聚类和Mantel检验地理距离,对野生山莨菪居群间遗传多样性差异进行分析。结果 10条ISSR引物共检测到131个条带,每条引物11~15个,平均13.1个,共858个多态性位点;居群平均多态性位点百分率(PPB)59.54%;Nei’s遗传多样性指数(H)为0.220 4,Shannon信息指数(I)为0.325 4;遗传距离变化范围0.073 3~0.306 2;Mantel检验P=0.002。结论 11个野生山莨菪居群间具有较高的遗传多样性,各居群间遗传距离与地理距离显著相关,甘肃,青海山莨菪居群间存在较高多态性,物种遗传多样性较为丰富,对野生山莨菪资源的保护与可持续利用提供了参考。; 张盾任梦云张银东关潇; 关键词：山莨菪 ISSR分子标记聚类分析地理距离

一种鉴定锁阳的方法: 本发明涉及一种鉴定锁阳的方法，所述方法包括从样本中提取基因组总DNA；以提取的DNA为模板，使用用于扩增ITS序列的特异性引物对进行PCR扩增；对PCR产物进行测序；并对测序结果进行序列比对和聚类分析，绘制系统发育树；根...; 任梦云关潇李俊生臧春鑫张盾赵志平刘冬梅; 文献传递

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张盾