马琪
- 作品数：13 被引量：101H指数：5
- 供职机构：甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家公益性行业科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理政治法律更多>>
- O型口蹄疫病毒蛋白酶3C基因在哺乳细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)蛋白酶3C基因的真核表达质粒,并在BHK-21细胞中进行表达,以RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒蛋白酶3C基因,利用XhoⅠ和HindⅢ限制性内切酶将3C基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),通过脂质体法转染重组质粒pcDNA3.1(-)-3C。PCR,双酶切鉴定及测序结果表明:重组质粒pcDNA3.1(-)-3C构建成功;Western-blot分析结果表明:重组质粒pcDNA3.1(-)-3C在BHK-21细胞中能够表达O型FMDV蛋白酶3C基因。该真核表达质粒的构建,为进一步研究O型口蹄疫空衣壳的体外组装以及O型口蹄疫空衣壳疫苗的开发建立了实验基础。
- 马琪陈豪泰薛慧文
- 关键词：O型口蹄疫病毒
- O型口蹄疫病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 为构建并表达O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的空衣壳蛋白的重组杆状病毒并鉴定其抗原性。以质粒pMD19-P12A3C为模板,扩增出编码O型FMDV衣壳蛋白前体P12A及其蛋白酶3C的P12A3C基因,插入至杆状病毒转移载体pFastBac Dual PH启动子下,构建出重组转移载体pFast Bac Dual-P12A3C,并转化DH10BacTM大肠杆菌感受态细胞,构建重组转座子BacmidP12A3C,将其转染Sf9细胞,获得表达O型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒rBac-P12A3C。增殖重组杆状病毒然后用其感染Sf9细胞,最后通过间接免疫荧光检测外源蛋白的表达。结果表明,表达产物能够被O型FMDV VP1多克隆抗体识别,并具有良好的反应原性,表明表达O型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒rBac-P12A3C构建成功。该研究为进一步研究O型FMDV空衣壳的体外组装提供前期实验材料,并为后期研制出口蹄疫的基因工程亚单位疫苗奠定基础。
- 解银丽马琪李志勇
- 关键词：O型口蹄疫病毒衣壳蛋白重组杆状病毒
- 白头翁汤中6种指标成分含量测定被引量：11
- 2019年
- 建立高效液相色谱法(HPLC)测定白头翁汤中4味中药(白头翁、黄连、黄柏及秦皮)的6种成分含量的方法。采用安捷伦色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈-1mg/mL磷酸水溶液为流动相进行线性梯度洗脱,检测波长205nm,流速0.8mL/min(白头翁皂苷B4)、检测波长335nm,流速1.0mL/min(盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、秦皮甲素和秦皮乙素)。秦皮甲素在1.04μg^6.24μg(r=0.9999)、秦皮乙素在0.92μg^5.52μg(r=0.9998)、盐酸药根碱在0.7μg^4.2μg(r=0.9987)、盐酸巴马汀在1.04μg^6.24μg(r=0.9978)、盐酸小檗碱在2.2μg^13.2μg(r=0.9979)、白头翁皂苷B4在5.5μg^33μg(r=0.9980)范围内线性关系良好。秦皮甲素、秦皮乙素、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和白头翁皂苷B4的加样回收率分别98.74%、98.12%、97.90%、96.95%、97.43%和98.45%,RSD均在2.0%以下,秦皮甲素、秦皮乙素、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、小檗碱和白头翁皂苷B4在白头翁汤供试品中的含量分别为0.7%、0.36%、0.12%、0.38%、8.26%和4.71%。所建立的方法重复性、线性及稳定性等良好,准确灵敏,可用于白头翁汤及相关制剂的质量控制。
- 贾娅倩马琪张晓松魏彦明袁子文华永丽
- 关键词：白头翁汤高效液相色谱
- 当归干预血瘀证大鼠血浆代谢组学研究被引量：39
- 2018年
- 运用代谢组学方法,探讨当归干预血瘀证大鼠作用机制。连续灌胃给予大鼠当归水煎液7 d后,建立大鼠急性血瘀模型,采集血液进行血液流变学、凝血因子检测,采用LC-Q/TOF-MS技术结合多元统计比较分析各组大鼠血浆内源性代谢物,筛选差异代谢物并构建其代谢通路。结果显示,当归干预能显著降低血瘀模型大鼠血液黏度及血浆FIB含量(P<0.05),缩短TT、PT、APTT(P<0.05);血瘀模型大鼠血浆中15个内源性代谢物含量发生显著变化(P<0.05),其中磷脂酰胆碱、花生四烯酸、鞘磷脂等含量上升,甘油酸、L-谷氨酸、L-缬氨酸等含量下降,差异代谢物主要涉及D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、甘油磷脂代谢、鞘脂代谢等路径。当归干预可通过回调差异代谢物含量,调节异常的氨基酸、脂质代谢进而预防血瘀的发生。
- 袁子文钟立甲纪鹏华永丽姚万玲马琪张晓松文艳巧魏彦明
- 关键词：当归血瘀证血浆代谢组学
- 兰州市安宁区独生子女家庭养老问题研究
- 2019年
- 截至2017年末,中国大陆总人口:13亿9008万人,60周岁以上总人口为2亿4090万人,占总人口比重的17.3%,其中65周岁及以上人口15831万人,占总人口的11.4%。根据国际通用标准,我国已经步入老龄化国家的行列。我国于1980年开始实施独生子女政策,截至现在,大部分独生子女父母陆续步入老年。这些家庭结构特殊的老人的老年生活状态,是否存在一些特殊问题,以及如何去解决这些问题,都值得我们去深入思考。
- 谢君王小川窦慧琦马琪伏跟胜
- 关键词：独生子女家庭虚拟养老院
- 郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清及肠道组织胃肠激素的影响被引量：12
- 2017年
- 探讨郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清和肠道组织胃肠激素的影响。Wistar大鼠60只,体重180~220g,随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、自愈组、郁金散高、中、低剂量治疗组,每组10只。通过自由饮用蜂蜜水;前10d禁食与饲喂充足饲料并灌胃猪油隔日交替进行;之后5d每天灌白酒,并置于高温高湿环境(8h·d-1);然后腹腔注射大肠杆菌,24h后再注射一次建立大肠湿热证大鼠模型。造模成功后,分别给予高(10.4g·kg^(-1))、中(5.2g·kg^(-1))、低(2.6g·kg^(-1))剂量郁金散进行治疗。整个试验过程中观察大鼠的临床症状和体征,记录体重变化,检测血清和回肠、结肠组织中的胃肠激素含量。结果显示:模型大鼠出现便溏、粪便色黄恶臭、肛门红肿、发热等症状和体征。正常组体重逐渐上升,模型大鼠造模期间体重呈现先波状上升、再逐渐下降的趋势,郁金散治疗后体重呈逐渐上升的趋势,其中以高剂量组回升最明显,但各组均无显著性差异(P>0.05)。与正常对照组相比,模型组和自愈组大鼠血清、回肠及结肠组织中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、P物质(SP)含量极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05),血管活性肠肽(VIP)无显著变化,生长抑素(SS)含量极显著降低(P<0.01);与自愈组相比,各剂量郁金散治疗后,MTL、GAS、SP、VIP和SS都有不同程度的回调,以高剂量组回调最为明显,其中高剂量组大鼠血清、回肠、结肠中MTL、GAS和SP极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),SS极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05)。大肠湿热证模型大鼠机体出现了胃肠激素紊乱,表现为MTL、GAS、SP和VIP含量升高,而SS含量降低,郁金散能改善大肠湿热证模型大鼠机体胃肠激素异常水平,且高剂量的治疗效果最好。
- 文艳巧姚万玲杨朝雪马琪张晓松纪鹏华永丽魏彦明
- 关键词：大肠湿热证郁金散胃肠激素
- 中兽医治疗牛泄泻方剂的组方规律分析被引量：5
- 2019年
- 挖据中兽医药治疗牛泄泻方剂组方规律,为中兽医药治疗牛泄泻的科研及临床工作提供参考。收集《中国兽药典》收录、中兽医专业书籍及文献报告的中兽医治疗牛泄泻的方剂,应用Excel 2010录入方剂信息,构建数据库。分析牛泄泻方剂中常用使用频次、分类、归经和在不同证型中的分布;运用SPSS 21.0对建立的方剂数据库进行药物组合和泄泻不同证型之间关联规则分析,从而获取针对不同证型的核心药对和组方规律。结果表明,通过对422首方剂分析发现,中兽医药治疗牛泄泻的方剂根据泄泻的证型可分为9种,方剂数包括治疗寒泄75、热泄114、伤食泄42、脾虚泄116、肾虚泄32、虫泄3、脾肾阳虚泄21、由肝传脾泄14、劳伤泄泻7;使用频次≥8的有72种中药,使用频次最高的前5味分别是甘草、白术、茯苓、陈皮、党参;所有方剂中出现频次最高的药对是白术-茯苓。兽医临床上以脾虚泄、热泄、寒泄这3种证型最为常见;常用药以补气健脾、祛湿为主;证型不同,使用的核心药对也不尽相同,在临床用药治疗不同证型牛泄泻时,可以这些药对为核心组合组成方剂。
- 华永丽韦严丽胡俊杰南京宏马琪张晓松姚万玲纪鹏魏彦明
- 关键词：中兽医方剂组方规律
- 基于代谢组学和网络药理学的白头翁汤治疗湿热泄泻的作用机制研究
- 湿热泄泻(dampness-heat diarrhea,DHD)是中(兽)医临床应用中常见的疾病。白头翁汤(pulsatilla decoction,PD)是中医临床治疗湿热泄泻的经典方剂,对湿热型溃疡性结肠炎有良好的治...
- 马琪
- 关键词：白头翁汤湿热泄泻代谢组学网络药理学
- O型口蹄疫病毒衣壳酸敏感性位点的筛选
- 2015年
- 为筛选与O型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳酸敏感性相关的位点,本研究以牛源O型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性毒株筛选工作。通过给予pH 6.0酸性环境连续诱变,筛选获得6株耐酸性毒株。将诱变病毒与亲本病毒衣壳蛋白编码区P1区序列比对后发现7个核苷酸突变,即共同存在于6株耐酸毒株P1区的错义突变A1334G(Y445C)、A1643G(Q548R)、A1822G/A1823C(N608A)及同义突变G1371A,另有仅存在于耐酸毒株m2P1区的错义突变C1849T(P617S)和仅存在于耐酸毒株m1P1区的同义突变G468T。本研究为O型FMDV酸敏感性分子机制的揭示及病毒衣壳酸稳定性的提高奠定了基础。
- 解银丽马琪秦晓东殷相平柳纪省张志东李志勇
- 关键词：O型口蹄疫病毒衣壳
- 苦豆草治疗大肠湿热证大鼠血清代谢组学研究被引量：14
- 2018年
- 中药苦豆草具有清肠燥湿的功效,临床用于治疗菌痢、肠炎等疾病,但对于其作用机制尚不完全清楚。本研究以探究苦豆草治疗大肠湿热证作用机制为目的,采用高温高湿环境、高糖高脂饮食结合腹腔注射产肠毒性大肠杆菌的方法建立大肠湿热证模型。通过检测大鼠血常规和促炎细胞因子,观察其肠道组织病理学变化,并结合基于超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间二级质谱(UHPLC-Q/TOF-MS/MS)联用技术的血清代谢组学方法进行研究。结果显示,苦豆草能够缓解大肠湿热证症状,改善肠道组织病变及调节体内促炎细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α的含量异常。经血清代谢轮廓分析发现牛磺酸、色氨酸、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸、甘油二酯、鹅去氧胆酸硫酸氢盐、2-十二碳烯二酸和7-酮基脱氧胆酸等9种差异代谢物可能是苦豆草治疗大肠湿热证的潜在代谢标志物,其涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、甘油磷脂代谢、甘油酯代谢、色氨酸代谢和初级胆酸合成等5条代谢路径。本研究运用血清代谢组学方法揭示了苦豆草干预大肠湿热证的作用机制,为苦豆草临床应用提供了理论依据。
- 张晓松马琪文艳巧张亚辉何建尹博姚万玲袁子文纪鹏华永丽魏彦明
- 关键词：苦豆草大肠湿热证血清代谢组学
