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林秋鹏
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
华南师范大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
李晓霞
华南师范大学生命科学学院
李洪清
华南师范大学生命科学学院
罗婉冰
华南师范大学生命科学学院
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罗婉冰
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李洪清
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林秋鹏
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李晓霞
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生物工程学报
年份
1篇
2017
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采用CELⅠ酶粗提物高效鉴定CRISPR/Cas9介导的基因突变
被引量:1
2017年
CRISPR/Cas9是新兴的基因组编辑技术,该技术操作简单、效率高,已成为目前最主流的基因组编辑技术。利用该技术进行突变体创制,对基因功能研究和育种应用具有重要的意义,而快速、高效、低成本的基因编辑个体鉴定是其中的重要环节。本研究对影响CELⅠ粗提物鉴定CRISPR/Cas9介导的水稻基因编辑个体的条件,包括蛋白用量及作用时间、PCR反应缓冲液等条件进行了探索,并将整个检测体系集成于一管操作。同时,采用CELⅠ粗提物检测了CRISPR/Cas9介导水稻stn1突变的T_0代植株及后代,对杂合突变、纯合突变及双等位突变的鉴定策略进行了探讨;该方法检测正确率经测序验证达100%。上述结果表明,采用CELⅠ粗提物检测突变体与已有方法比较具有廉价、快速和高效的特点。
罗婉冰
林秋鹏
李晓霞
周泽娇
阳辉勇
杜荣裕
李洪清
关键词:
突变体
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