窦琳
- 作品数：15 被引量：15H指数：2
- 供职机构：北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 细胞外囊泡在非酒精脂肪肝发病机制及诊断治疗中的作用被引量：4
- 2018年
- 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是21世纪全球最重要的公共健康问题之一,也是我国愈来愈重要的慢性肝病问题。细胞间通讯在NAFLD病理进程中发挥重要作用。细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是近年来备受关注的细胞间通讯方式。EVs携带脂质、蛋白质、DNA、mRNA以及非编码RNA等作为信号分子在细胞间的物质和信息交流中起重要作用,参与了多个生理病理过程。目前细胞外囊泡在非酒精脂肪肝发病机制及诊断治疗中的作用方面的研究非常有限,但初步研究显示, EVs在NAFLD病程发展中发挥重要作用。因此,该文重点关注EVs参与NAFLD病程机制研究,并对其在NAFLD防治中的潜在诊疗价值作简要综述。
- 杨光窦琳沈涛唐蔚青满永黎健黄秀清
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病细胞间通讯
- G蛋白偶联受体120激动剂促进巨噬细胞胆固醇流出的研究
- 2019年
- 目的:探讨G蛋白偶联受体120(GPR120)在巨噬细胞胆固醇流出中的作用及机制。方法:培养Raw264.7巨噬细胞,以50-200μmol/L的GPR120激动剂GW9508处理Raw264.7细胞18h。NBD-胆固醇负载法检测细胞胆固醇的流出率;MTS方法检测细胞的存活率;定量PCR和Western blot方法检测胆固醇流出相关转运体ABCA1、ABCG1和SR-B1的mRNA及蛋白表达水平;定量PCR检测核受体LXRα、LXRβ和PPARα、PPARγ的mRNA水平。结果:与对照组相比,100、150和200μmol/L的GW9508均提高Raw264.7细胞NBD-胆固醇流出率,分别提高了8%、10%和18%;ABCA1的蛋白水平分别上调了1.4倍、1.8倍和4.8倍, ABCG1的蛋白水平分别上调了1.3倍、3.2倍和5.1倍,但是不影响SR-B1的蛋白水平;而且,100和200μmol/L的GW9508分别上调ABCA1的mRNA水平3.6倍和6.8倍,上调ABCG1的mRNA水平1.6倍和3.3倍;同时,LXRα的mRNA水平也分别上调了0.6倍和1.25倍,且差异有统计学意义;但是不影响SR-B1及LXRβ、PPARα和PPARγ的mRNA水平。另外,50-200μmol/L的GW9508均不影响Raw264.7细胞的存活率。结论:GPR120通过LXRα上调ABCA1和ABCG1的表达而促进Raw264.7巨噬细胞的胆固醇流出。
- 安童张小奕李红霞满永满永黄秀清窦琳
- 关键词：巨噬细胞胆固醇流出肝X受体Α
- miR-301a调节小鼠巨噬细胞中炎症因子的表达被引量：1
- 2017年
- 目的探讨miR-301a对巨噬细胞炎症因子表达水平的影响,从microRNA角度阐明动脉粥样硬化的发病机制,为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。方法高脂喂养Apo E-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,收集小鼠主动脉血管,利用real-time PCR检测组织中miR-301a的表达水平;利用脂质体在RAW264.7细胞中转染miR-301a mimic和miR-301a inhibitor,用real-time PCR检测细胞中miR-301a水平,并检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平,用Western blot检测NF-κB抑制因子(NKRF)蛋白水平,用免疫荧光染色检测p65细胞定位。结果在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a的表达水平升高;在RAW264.7细胞中过表达miR-301a可抑制NKRF蛋白水平,促进p65细胞核定位,升高细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达;在RAW264.7细胞中低表达miR-301a可升高NKRF蛋白水平,促进p65细胞质定位,减少细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达。结论在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a表达水平升高;在RAW264.7细胞中miR-301a通过调节NKRF的表达影响p65活性进而调控TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达,提示microRNA在动脉粥样硬化发病的炎症机制中具有重要作用。
- 窦琳黄秀清沈涛李林芳黎健
- 关键词：肿瘤坏死因子Α白细胞介素6单核细胞趋化蛋白1
- 长链非编码RNA URHC在肝癌细胞中的调控作用
- 目的：长链非编码RNA(Long non coding RNA,LncRNA)是一类长度大于200bp,不编码或极少编码蛋白的RNA,也在很多信号通路中,包括与糖尿病相关的胰岛素抵抗,起到关键的调控作用.URHC(up-...
- 张旸窦琳黎健
- 关键词：肝癌细胞长链非编码RNA病理机制
- 血管紧张素Ⅱ通过AT1受体促进miR-154-5p表达导致心肌重塑发生的机制研究
- 背景：心肌重塑是为响应血流动力学负荷和/或心脏损伤以及神经激素活化,心脏结构和功能发生的变化。血管紧张素Ⅱ 可以导致心肌细胞肥大和凋亡发生,造成心肌重塑和心功能损伤。我们的前期研究发现在血管紧张素Ⅱ 诱导的心肌重塑发生时...
- 王确于晓雪窦琳黄秀清
- PI3K/AKT通过激活糖酵解促进巨噬细胞M1极化被引量：1
- 2023年
- 目的探讨PI3K/AKT通路在巨噬细胞糖酵解中的作用,拟从代谢重编程的角度阐明巨噬细胞M1极化的机制。方法以脂多糖(LPS)处理RAW264.7细胞建立巨噬细胞M1极化模型;使用2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)抑制糖酵解过程;使用LY294002抑制PI3K/AKT活性;Seahorse XF糖酵解速率试剂盒检测巨噬细胞糖酵解水平;q-PCR方法检测巨噬细胞M1型标记(诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素1β),葡萄糖酵解相关基因(Glut1、HK2、Idha和Aldoa);Western blot方法检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-p65、p65、IκB、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和GAPDH水平。结果在LPS诱导的RAW264.7细胞M1极化模型中,p-mTOR和p-AKT水平升高,HIF-1α表达水平升高,糖酵解相关基因水平升高,细胞外酸化率升高,表明LPS诱导细胞糖酵解水平升高;2-DG抑制糖酵解,降低M1极化相关因子的mRNA水平;LY294002抑制PI3K/AKT活性,降低p-mTOR水平和HIF-1α的蛋白水平,降低糖酵解相关基因水平,进而抑制RAW264.7糖酵解水平和M1极化过程。结论在RAW264.7细胞中PI3K/AKT信号通路通过激活mTOR信号通路,激活糖酵解,从而激活巨噬细胞M1极化过程。
- 马佳睿徐芳芷左惠演满永张曦月窦琳唐蔚青刘进黄秀清黎健
- 关键词：巨噬细胞糖酵解
- 蛋白磷酸酶4显性负性突变体介导的活性抑制改善棕榈酸诱导的肝细胞脂性凋亡
- 2022年
- 目的探讨抑制蛋白磷酸酶4(protein phosphatase 4,PP4)活性对肝细胞脂性凋亡的影响。方法以400μmol/L的棕榈酸(palmitic acid,PA)处理HepG2细胞24 h建立肝细胞脂性凋亡模型;以西方饮食喂养C57BL/6J小鼠16w建立非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型;构建磷酸酶活性缺失的显性负性突变体AD-PP4RL腺病毒载体;转染AD-PP4RL至HepG2细胞腺病毒以抑制肝细胞中PP4的活性;尾静脉注射AD-PP4RL以抑制肝脏中PP4的活性;转染RAC1慢病毒至HepG2细胞中抑制RAC1的表达;BoDIPY染色检测细胞及组织中脂质蓄积情况;TUNEL染色检测细胞凋亡水平;免疫沉淀结合丝苏氨基酸磷酸酶活性检测法测定PP4活力;GTP酶活性检测试剂盒检测RAC1活性;Western印迹检测脂质代谢及脂性凋亡相关蛋白的表达水平。结果①在PA处理的HepG2细胞及西方饮食喂养诱导的NASH小鼠肝脏中PP4活性升高;②过表达磷酸酶活性缺失突变的腺病毒载体AD-PP4RL能有效抑制PP4活性;③抑制PP4活性降低PA诱导的HepG2细胞及NASH小鼠肝脏中脂性凋亡水平,下调脂性凋亡相关基因PUMA、Bim及c-caspase3的水平;④RAC1介导了在PP4在肝细胞脂性凋亡中的作用。结论抑制PP4活性可以通过抑制RAC1介导的JNK信号通路的激活,改善肝细胞脂性凋亡。
- 刘进窦琳陈皓马佳睿左慧演徐芳芷张曦月满永席超黄秀清
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎蛋白磷酸酶磷酸酶活性脂性凋亡
- miR-338-3p调节小鼠肝脏葡萄糖异生的研究
- 目的：文献报道miR-338-3p在癌症和神经系统疾病的中起重要作用,然而其在肝脏胰岛素抵抗中的作用尚未见报道,本研究旨在阐明miR-338-3p调节小鼠肝脏葡萄糖异生的作用及其机制.方法：在12周龄C57BL/6J小鼠...
- 李林芳窦琳王淑跃黎健
- 关键词：TNF-Α
- 代谢重编程:单核/巨噬细胞训练免疫参与动脉粥样硬化的新机制被引量：2
- 2023年
- 动脉粥样硬化是血管的慢性炎症性疾病,单核/巨噬细胞的异常活化与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。近期研究发现单核/巨噬细胞可以通过训练免疫发生代谢重编程,促进炎症反应,加快动脉粥样硬化的进展,并可以导致心血管意外事件的发生。文章综述了单核/巨噬细胞代谢重编程在训练免疫发生中的作用和机制,可能为动脉粥样硬化的防治提供新的治疗靶点和方法。
- 杨尧闫明静徐昆孙升辉李汶霖窦琳黄秀清唐蔚青黎健沈涛
- 关键词：动脉粥样硬化
- 游离脂肪酸抑制AMPK信号通路促进小鼠巨噬细胞葡萄糖酵解和M1极化
- 2023年
- [目的]探讨游离脂肪酸对小鼠巨噬细胞葡萄糖酵解和M1极化的影响,从巨噬细胞代谢重编程和M1极化阐明非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病机制,为NASH的防治提供新的思路。[方法]以油酸/棕榈酸(O/P)处理RAW264.7细胞建立游离脂肪酸处理巨噬细胞模型;转染AMP活化蛋白激酶(AMPK)特异siRNA抑制AMPK表达;使用阿卡地新(AICAR)激活AMPK活性。采用qPCR检测巨噬细胞M1型分子标志物(TNF-α、IL-6和MCP-1)、M2型分子标志物(CD206和IL-10)以及葡萄糖酵解相关基因(PGM1、PGK1、GPI1、LDHA、ALDOA、GLUT1和HK2)mRNA水平,采用Western blot检测p-mTOR/mTOR、p-Raptor/Raptor、p-Akt/Akt、p-AMPK和AMPK蛋白水平。[结果] O/P处理RAW264.7细胞后,p-mTOR/mTOR和p-Akt/Akt蛋白水平升高(P<0.05),p-Raptor/Raptor、p-AMPK和AMPK蛋白水平降低(P<0.05),葡萄糖酵解相关基因PGM1、PGK1、GPI1、LDHA、ALDOA、GLUT1和HK2 mRNA水平升高(P<0.05),促炎因子TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA水平升高(P<0.05),抑炎因子CD206和IL-10 mRNA水平降低(P<0.05)。抑制RAW264.7细胞中AMPK表达后,p-mTOR/mTOR和p-Akt/Akt蛋白水平升高(P<0.05),p-Raptor/Raptor、p-AMPK和AMPK蛋白水平降低(P<0.05),葡萄糖酵解相关基因PGM1、PGK1、GPI1、LDHA、ALDOA、GLUT1和HK2 mRNA水平升高,促炎因子TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA水平升高(P<0.05),抑炎因子CD206和IL-10 mRNA水平降低(P<0.05)。激活AMPK活性可逆转O/P对巨噬细胞葡萄糖酵解和M1极化的影响。[结论]在RAW264.7细胞中游离脂肪酸通过抑制AMPK信号通路促进葡萄糖酵解和M1型极化。
- 左惠演黄秀清沈涛唐蔚青马佳睿徐芳芷黎健窦琳
- 关键词：AMP活化蛋白激酶糖酵解非酒精性脂肪性肝炎游离脂肪酸
