储军
- 作品数：11 被引量：24H指数：3
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重大项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生机械工程更多>>
- GFP标记的肿瘤生长和转移的整体荧光成像被引量：11
- 2004年
- Fugene6脂质体介导pEGFP C1转染人源肺癌细胞(SPC A1),经G418抗性筛选和96孔板有限稀释获得稳定高表达GFP的单克隆细胞株SPC A1 EGFP。裸鼠腹腔注射SPC A1 EGFP细胞建立自发转移模型;裸鼠尾静脉注射SPC A1 EGFP细胞建立实验转移模型。利用整体光学成像系统(whole bodyopticalimagingsystem)对荷瘤鼠整体荧光成像。结果表明,整体光学成像系统可实时非侵入监测腹腔肿瘤生长和扩散过程,通过胸腔皮瓣窗(chest wallskin flapwindow)可低侵入检测肺转移。该研究为在体监测原位移植瘤的自发转移和发现抗肿瘤新药物提供了良好实验平台。
- 储军陈延平熊涛张智红余雳骆清铭
- 关键词：绿色荧光蛋白肿瘤
- 活细胞内多对蛋白质间相互作用的同步光学成像研究
- 2009年
- 蛋白质-蛋白质相互作用几乎调控一切生命活动,近年来发展的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)分析法。
- 张智红储军秦岭松骆清铭
- 关键词：蛋白质相互作用多色
- 分子与细胞事件的光学可视化——解读2008年诺贝尔化学奖被引量：8
- 2008年
- 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)及其突变体作为报告基因,已被广泛应用于基因表达调控、蛋白质空间定位、生物分子之间相互作用、转基因动物以及药物药效评价和作用机理研究等方面,极大地推动了现代生物学的发展.随着光电信息技术的不断进步,基于荧光报告基因的光学分子成像技术将在细胞、细胞网络、组织、器官和个体等不同层次实现分子与细胞事件的实时可视化,从而在重大疾病的早期诊断和药物研发中发挥重要作用.
- 储军施华杨杰张智红骆清铭
- 一种蛋白质相互作用的检测方法
- 本发明涉及一种检测方法，属于生物分子领域。本发明利用双分子荧光互补技术，基于橙红荧光蛋白和远红荧光蛋白，可以用来检测蛋白质之间的相互作用。本发明可以应用于在活体成像检测蛋白质相互作用，同时本发明还可以同步并行检测多对蛋白...
- 骆清铭张智红储军秦岭松
- 文献传递
- 活细胞内多对蛋白质间相互作用的同步光学成像研究
- 张智红储军秦岭松骆清铭
- 关键词：蛋白质相互作用多色
- 利用基于GFP的FRET探针检测β-分泌酶的活性
- 2008年
- β淀粉样肽(amyloidβ-peptide,Aβ)在阿尔茨海默病(Alzheimeir’s disease,AD)患者脑内的异常产生和积累在AD的发病机理中扮演着重要的角色。β-分泌酶对淀粉样前体蛋白的裂解是Aβ产生的关键步骤,因此抑制β-分泌酶的活性成为AD药物治疗的一个重要策略。为了检测β-分泌酶的活性,应用基因工程技术将β-分泌酶作用底物序列(NFEV)的两端分别与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的颜色突变体--青色荧光蛋白(cyan fluorescent protein,CFP)和黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)相连,构建了一个基于GFP的荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针。荧光光谱分析结果显示,该荧光融合蛋白中CFP和YFP之间存在着较强的FRET。而当与β-分泌酶进行孵育后,FRET逐步降低,证明该探针能被β-分泌酶酶切。SDS-PAGE分析显示探针与β-分泌酶孵育后,荧光融合蛋白由60 kD大小逐渐变成30kD大小的蛋白,表明探针被β-分泌酶酶切成CFP和YFP分子,证实了荧光光谱的结果。这些结果表明,可通过检测探针的FRET效率方便地分析β-分泌酶的活性,为进一步筛选β-分泌酶的抑制剂提供了一个平台。
- 陆锦玲杨杰储军曾绍群张智红
- 关键词：阿尔茨海默病Β-分泌酶绿色荧光蛋白
- 远红色双分子荧光互补系统的建立和应用
- 蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)几乎调控一切生命活动,比如生长、发育和凋亡。近年来发展的双分子荧光互补(bimolecular fluorescencecomple...
- 储军
- 关键词：蛋白质-蛋白质相互作用
- 文献传递
- 活细胞内多对蛋白质间相互作用的同步光学成像研究
- ＜正＞蛋白质-蛋白质相互作用几乎调控一切生命活动,近年来发展的双分子荧光互补（bimolecular fluorescence complementation,BiFC）分析法,是检测活细胞内蛋白质-蛋
- 张智红储军秦岭松骆清铭
- 关键词：蛋白质相互作用多色
- 文献传递
- GFP标记的肿瘤生长和转移的整体荧光成像
- 本文利用GFP为分子探针，对活体内肿瘤生长和转移进行了实时非侵入性监测。
使用顺铂和Triton X-100分别诱导SPC-A1-EGFP细胞发生凋亡和坏死，应用荧光显微镜实时记录细胞死亡过程中单个细胞内的荧光强度变化...
- 储军
- 关键词：肿瘤生长肿瘤转移GFP标记细胞凋亡荧光显微镜
- 利用受体漂白荧光共振能量转移技术研究β-分泌酶在活细胞内的二聚化被引量：6
- 2008年
- β淀粉样肽(Aβ)在阿尔茨海默病(AD)患者脑内的产生、聚集和沉积是AD的一个固有病理特征,也被普遍认为是AD的重要发病机理之一.β-分泌酶(BACE)对淀粉样前体蛋白(APP)的裂解是Aβ产生的关键步骤,β-分泌酶抑制剂是AD药物治疗的一个重要发展方向,因此对BACE结构的了解具有重要意义.利用受体漂白荧光共振能量转移(FRET)技术首次在活细胞内研究BACE的二聚化结构.通过基因工程技术分别构建了青色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)标记的全长BACE(BACE-FL)和BACE活性部分(BACE-NT),应用共聚焦荧光显微镜和受体漂白FRET技术研究了BACE-FL和BACE-NT在细胞中的表达和定位,以及它们在活细胞内的存在形式.实验结果表明:a.BACE-FL在内质网至细胞膜均有表达,主要分布在高尔基体、细胞膜和内体等细胞器中,而BACE-NT则被滞留在内质网里.b.BACE-NT是单体结构,而BACE-FL在活细胞内则以二聚体的形式存在.证明,BACE的跨膜序列和C端对BACE的转运和定位具有重要作用,其二聚体结构由这些序列决定,而不由其活性位点决定.
- 陆锦玲储军杨杰曾绍群骆清铭张智红
- 关键词：Β-分泌酶二聚化阿尔茨海默病荧光共振能量转移
