赵利娜
- 作品数：12 被引量：18H指数：4
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 用积分法考察黄嘌呤对Candida species尿酸酶的抑制作用被引量：4
- 2005年
- 目的:以Candida species尿酸酶为模型,考察用积分法筛选抑制剂的条件.方法:用293 nm吸收记录尿酸酶反应.用反应时间为自变量的积分速度方程拟合反应曲线确定表观米氏常数(apparentM ichaelis-M enten constant,Km app)和表观最大反应速度(apparentm axim al reaction rate,Vm app).据上述参数随抑制剂浓度的变化确定抑制类型和抑制常数(inh i-b ition constant,Ki).结果:被分析数据中的畸异值显著降低结果可靠性.通常终点底物<1/6Km app而起始底物足够高,此积分法测定Km app的偏差和变异低于20%而Vm app精度更高.用积分法所得Km app与双倒数法一致,且和黄嘌呤浓度成正比,对应Ki为(5.4±0.8)μmol/L(n=3),也与双倒数法一致.结论:被分析数据精度足够高,用无抑制剂时米氏常数(M ichaelis-M enten constant,Km)4倍以上的起始底物浓度并固定终点底物浓度<1/6Km,此积分法能用于筛选特殊类型的抑制剂.
- 赵利娜廖飞赵运胜
- 关键词：积分法尿酸酶黄嘌呤米氏常数
- 联用积分法和初速度法测定酶活性的方法
- 一种联用积分法和初速度法测定酶活性的方法；对单一酶反应体系在低于米氏常数10倍的预设底物浓度下连续监测反应3到10分钟，当起始底物浓度高于预设底物浓度70％且初速度仍在其线性范围内时测定经典初速度，当80％记录时段内底物...
- 廖飞赵运胜赵利娜陆巍杨晓兰廖红于明安桑宇
- 文献传递
- 酶抑制反应动力学过程分析的应用
- 第一部分以Candidasp．尿酸酶为模型考察用积分法测定米氏常数(Michaelis-Mentenconstant，Km)及黄嘌呤对其抑制常数(inhibitionconstant，Ki)所需条件。用293nm吸收变化...
- 赵利娜
- 关键词：积分法酶活性底物浓度
- 文献传递
- 联用积分法和初速度法测定酶活性的方法
- 一种联用积分法和初速度法测定酶活性的方法；对单一酶反应体系在低于米氏常数10倍的预设底物浓度下连续监测反应3到10分钟，当起始底物浓度高于预设底物浓度70％且初速度仍在其线性范围内时测定经典初速度，当80％记录时段内底物...
- 廖飞赵运胜赵利娜陆巍杨晓兰廖红于明安桑宇
- 文献传递
- 用线性动力学方法考察黄嘌呤对尿酸酶的抑制作用被引量：7
- 2005年
- 目的:以米氏常数相差较大的两种尿酸酶为模型,考察用两个底物浓度下标定比活性确定酶动力学参数和筛选抑制剂的可靠性.方法:用293nm吸收监测尿酸酶反应.通过两个底物浓度下标定比活性确定表观米氏常数(apparentmichaelismentenconstant,Kmapp)和表观最大反应速度(apparentmaximalreactionrate,Vmapp).据表观动力学参数随抑制剂浓度的变化确定抑制类型和抑制常数(inhibitionconstant,Ki).结果:只要所用尿酸浓度中较小者(thelowerconcentrationofuricacid,SL)大于待测Km的0.8倍且较大者(thehigherconcentrationofuricacid,SH)在SL的1.4倍以上,此线性动力学法能可靠测定Bacillusfastidiosus和Candidaspecies尿酸酶的米氏常数,且与双倒数法结果一致.如SL大于Km的3.8倍而SH为SL的3倍,此线性动力学法所得Candidaspecies尿酸酶Kmapp与抑制剂浓度成正比,Ki为(4.8±0.5)μmol/L,与双倒数法结果一致.Bacillusfastidiosus尿酸酶Km太高,底物浓度有限时不能用此方法筛选其抑制剂.结论:此线性动力学方法仅用高于Km的底物浓度也能可靠确定酶动力学参数,有利于用常规定量方法筛选对底物具有高亲合力特殊靶酶的抑制剂.
- 赵利娜廖飞赵运胜
- 关键词：尿酸酶黄嘌呤米氏常数
- Wnt/GSK-3β/mTOR通路在百草枯致神经祖细胞毒性中的作用
- [目的]通过观察百草枯(Paraquat,PQ)染毒后,原代小鼠神经祖细胞(mNPc)Wnt/β-catenin信号通路相关分子及自噬相关分子基因表达情况,探讨 Wnt/GSK-3β/mTOR通路在百草枯致神经毒性中的作...
- 赵利娜严梦玲常秀丽周志俊
- 关键词：百草枯WNT通路自噬作用
- 谷胱甘肽-S-转硫酶法快速测定红细胞GSH和其氧化产物
- 2006年
- 赵利娜李生兵郭睿王佚廖飞
- 关键词：还原型谷胱甘肽
- 血红蛋白测定方法抗干扰能力的比较被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨抗氧化体系干预物质和维生素C(VC)对血红蛋白(Hb)测定的干扰。方法:兔红细胞溶血后为样品。比较抗氧化酶抑制剂和VC对直接测定Hb、测定碱化Hb、测定叠氮Hb等的干扰。结果:直接测定Hb吸收、测定叠氮Hb都受到VC、超氧化物歧化酶抑制剂、过氧化氢酶抑制剂等的干扰,碘乙酰胺和谷胱甘肽过氧化物酶抑制剂干扰较小。上述物质对测定碱化Hb几乎没有干扰。结论:测定碱化Hb用于评价高浓度VC的溶血作用和机制更可靠。
- 程朝英廖蓉夏丽李生兵郭睿赵利娜廖飞
- 关键词：血红蛋白测定维生素C抗氧化体系溶血
- 联用酶反应过程分析法和初速度法测定谷胱甘肽-S-转硫酶活性
- 2011年
- 目的:考察联用谷胱甘肽-S-转硫酶(Glutathione-S-transferase,GST)产物抑制反应过程分析法和初速度法测定GST活性的有效性。方法:阳离子交换层析纯化猪肝碱性GST同工酶。在25℃,用1.0 mmol/L 2,4-二硝基氯苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和50.0 mol/L谷胱甘肽(Glutathione,GSH)跟踪产物在340 nm吸收的变化。5.0 min内底物消耗比例低于设定界限时测定初速度;否则,用以反应时间为自变量且包含产物抑制的积分速度方程分析反应过程确定最大反应速度,再换算成优化GSH浓度下的初速度。结果:优化GST产物抑制常数后,只要被分析数据中GSH消耗55%以上,所得最大反应速度对被分析数据范围不敏感。用48 mol/L GSH将最大反应速度换算成初速度,联用策略所得GST活性的线性下限略高于初速度法,而线性上限提高4倍。结论:用积分速度方程分析酶反应过程并优化最大速度换算成初速度所需底物浓度,联用策略测定酶活性线性范围更宽,有望成为测定酶活性的新方法。
- 廖娟赵利娜龙高波杨晓兰蒲军廖飞
- 分析谷胱甘肽-S-转硫酶的产物抑制反应过程测定还原型谷胱甘肽被引量：4
- 2006年
- 目的以谷胱甘肽-S-转硫酶(GST)为模型,探讨有产物抑制时用积分法分析酶反应过程测定底物量的可靠性。方法从猪肝制备GST。1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)终浓度为1.0 mmol/L,监测GST催化还原型谷胱甘肽(GSH)与CDNB结合产物在340 nm吸收变化。用积分法预测反应终点的产物吸收。结果优化产物抑制常数可使此积分法所得反应终点产物吸收对剩余底物变化不敏感。此积分法测定GSH对常见干扰有抗性。此法测定大鼠肝匀浆中外加GSH回收率大于98%,线性响应上限接近90μmol/L,下限接近2.0μmol/L,所得大鼠肝GSH含量与文献报道一致。结论有产物抑制时用积分法也可定量底物;用此积分法进行动力学酶法分析具有一定普遍性,而且有明显优势。
- 赵利娜陶佳赵运胜廖飞
- 关键词：积分法还原型谷胱甘肽
