刘艳娟
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：生物学更多>>
- 家蝇MdSOD3基因的鉴定及其在抵抗重金属胁迫中的作用被引量：5
- 2012年
- 超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,在昆虫抗氧化保护过程中起着重要作用。本研究通过RT-PCR技术鉴定了家蝇Musca domestica MdSOD3基因(GenBank登录号为JQ408979),cDNA序列817bp,开放阅读框534bp,推导的多肽序列含有177个氨基酸。同源性分析及NJ法系统分析表明MdSOD3与其他物种的Cu/ZnSOD关系较近。荧光定量PCR检测该基因在家蝇幼虫脂肪体、肠、表皮和血细胞中不存在差异表达;在受到不同浓度重金属Cd2+刺激时,MdSOD3基因呈诱导性表达,5mmol/L时表达量最高。通过RNAi策略技术成功敲低MdSOD3表达水平。将RNA干扰60h的幼虫置于5mmol/LCd2+处理24h后死亡率明显升高,并且出现中毒表象。NBT活性染色检测到体外重组表达的MdSOD3具有明显的酶活性。结果提示MdSOD3基因可能在家蝇抗逆防御过程中起着重要作用。
- 唐婷高一夫刘艳娟葛旭东李响柳峰松
- 关键词：家蝇超氧化物歧化酶RNA干扰重金属胁迫
- 家蝇C-型凝集素的克隆与功能分析被引量：3
- 2016年
- 【目的】从家蝇Musca domestica中克隆一种C-型凝集素(C-type lectin)基因,并分析其在家蝇免疫过程中的功能。【方法】根据家蝇转录组信息,克隆了一条C型凝集素基因,将其命名为Mdlectin-C1。构建Mdlectin-C1的原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中表达并纯化r Mdlectin-C1蛋白,制备多克隆抗体。利用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及Western blot技术对家蝇不同发育阶段和细菌感染前后Mdlectin-C1的表达水平进行检测。运用RNAi技术敲低家蝇1龄幼虫Mdlectin-C1基因表达,然后进行细菌刺激并观察幼虫存活率变化。【结果】Mdlectin-C1 c DNA包含一个546 bp完整开放阅读框,编码181个氨基酸残基,所推导多肽N端包含由21个氨基酸残基组成的信号肽,成熟肽中含有一个保守的碳水化合物识别结构域(carbohydrate-recognition domain,CRD)。qRT-PCR及Western blot结果显示,家蝇从1龄幼虫到蛹的发育过程中,Mdlectin-C1表达量逐步上升,蛹期达到最大值。在革兰氏阴性菌大肠杆菌E.coli和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus刺激后,家蝇2龄幼虫Mdlectin-C1均上调表达,并分别在36和3 h时达到最高值。利用RNAi技术成功敲低Mdlectin-C1表达。对Mdlectin-C1基因敲低的1龄幼虫进行细菌刺激,敲低实验组幼虫存活率显著低于正常对照组。【结论】Mdlectin-C1可能参与家蝇抗菌免疫应答,并在此过程中具有重要作用。
- 邢建晓刘艳娟路永鹏唐婷柳峰松
- 关键词：家蝇RNAI先天免疫模式识别受体
- 家蝇C-型凝集素的鉴定与功能分析
- 家蝇/(Muscadomestica/)是一种重要的昆虫资源，通常生活在杂菌横生的环境中，传播多种疾病，而自身却很少被细菌感染。本文整理了转录组注释名录中与家蝇免疫相关的凝集素基因，取其中的一条基因Mdlectin-C1...
- 刘艳娟
- 关键词：家蝇生物信息学分析功能分析
- 文献传递
