李雪梅 作品数:88 被引量:198 H指数:8 供职机构: 宜宾职业技术学院 更多>> 发文基金: 四川省重点科学建设项目 国家科技攻关计划 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
间接免疫酶组织化学法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒感染和抗原定位 被引量:6 2008年 以蔗糖密度梯度离心法提纯的猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)病毒SC1株作为抗原,免疫家兔制备兔抗PRRS病毒IgG,成功建立了检测PRRS病毒抗原的间接免疫酶组织化学法。该方法只与PRRS病毒感染猪组织呈现阳性反应,与猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒人工感染并致死仔猪的肝脏组织呈现阴性反应。用该方法检测PRRS SC-1株人工感染28日龄仔猪,在感染后7 d即可在肺门淋巴结、胸腺、扁桃体、十二指肠、肺、大脑和肾脏检测到PRRS病毒抗原。PRRS病毒抗原主要分布于胸腺和十二指肠感染细胞的胞浆内、肺门淋巴结小梁周围的淋巴窦和弥散的淋巴组织、扁桃体淋巴结的隐窝及其周边。该法具有特异、直观和敏感的特点,可用于PRRS病毒感染的实验室诊断、抗原定位及甲醛固定样本的回顾性诊断。 张平英 朱德康 程安春 汪铭书 刘伍梅 李雪梅 陈希文 刘菲 周毅 陈孝跃关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗原定位 改进型生物过滤器对H_2S和NH_3混合气体去除效果的研究 被引量:2 2010年 生物过滤器去除恶臭气体的影响因素包括进气的容积负荷、填料湿度、填料层高度、填料中微生物种群和数量及填料层成分的变化,为进一步了解生物过滤器的去除效果,共设计4个处理组,分别编号为A、B、C和D,用猪粪堆肥、珍珠塔、活性蚯蚓粪和锯末按不同比例组成生物过滤器填料,并添加除臭优势菌种和蚯蚓处理H2S和NH3。结果表明,生物过滤器填料中微生物数量丰富,细菌和真菌在最高的C组分别达到(2.23~3.26)×1010cfu·g-1和(2.00~3.08)×105cfu·g-1。在生物过滤器填料中各种形态氮和硫的分布不均匀,NH4+-N与S2--S由下向上递减,而NO3--N起初是下部高于上部,但随着运行时间的延长,上部的NO3--N逐渐高于下部。在该生物除臭系统中,用活性蚯蚓粪、堆肥和锯末混合填料(C)处理效果最好,是很好的生物过滤器填料,有存活的蚯蚓,其余3个处理均没有存活的蚯蚓。 白林 龚兰芳 罗庆林 李雪梅关键词:生物过滤器 硫化氢 氨气 蚯蚓 TUNEL技术在石蜡切片中的应用 2013年 TUNEL(TdT—mediated dUTP nick end labeling)技术是用于原位检测细胞凋亡情况的基本方法之一。以色列科学家Y.Gavfieli等于1992年提出TUNEL检测法,该方法可在原位单细胞水平上显现凋亡细胞。实际上TUNEL检测法是分子生物学与细胞形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确反映细胞凋亡的形态特征,可用于细胞涂片、石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片的凋亡细胞测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,具有敏感、快速、特异的特征,已广泛用于生物学和医学研究领域。 李雪梅 易宗容 李德立 庞永建关键词:TUNEL 石蜡切片 分子生物学 细胞凋亡 凋亡细胞 人工感染PRRSV仔猪肺和子宫细胞凋亡的电镜观察 被引量:10 2005年 应用透射电子显微镜对仔猪感染猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时期肺和子宫凋亡细胞的超微形态结构进行了观察。结果表明,PRRSV可诱导宿主肺和子宫发生典型的细胞凋亡,表现为细胞的超微形态结构随着病毒感染进程出现不同的特征性变化,早期(感染后第8 h至第3 d)凋亡细胞多表现为细胞体积缩小,细胞质密度增强,染色质浓缩,核仁解体,内质网扩张;中期(感染后第5 d至第9 d)凋亡细胞体积显著缩小,细胞膜突起,线粒体增多,有凋亡小体形成;晚期(感染后第10 d以后)凋亡细胞形态多表现为凋亡小体降解和消失,少数凋亡细胞在凋亡晚期表现为坏死细胞。肺细胞凋亡主要发生于肺巨噬细胞和肺泡上皮细胞,子宫细胞凋亡主要发生于子宫内膜细胞和内膜腺细胞。 刘芳 汪铭书 程安春 周毅 刘伍梅 张平英 李雪梅 陈希文 豆文波 陈孝跃关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒 仔猪 子宫 细胞凋亡 原位反转录PCR技术检测PRRSV的应用及操作体会 2014年 1987年在美国首次发现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),此后迅速蔓延到各地。1996年,在我国首次分离到猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。猪繁殖与呼吸综合征可引发妊娠母猪流产、早产和产死胎,以及仔猪、育肥猪的呼吸道疾病。 李雪梅 程安春 汪铭书关键词:反转录 阳性细胞 假阴性结果 一种利用地源性饲料资源生产发酵饲料的设备 本实用新型公开了一种利用地源性饲料资源生产发酵饲料的设备,该实用新型涉及饲料机械加工和饲料制备领域,包括:搅拌装置,设于搅拌桶内部,一端伸出搅拌桶与第一链轮固定连接,块料粉碎桶,设于搅拌桶的外侧壁上,块料粉碎双刀组,设于... 易宗容 冯堂超 曹洪志 阳刚 李雪梅 李成贤PRRS抗体间接ELISA检测方法的建立及应用 被引量:5 2005年 以差速离心法结合蔗糖密度梯度离心法提纯的PRRSVSC2株作为包被抗原,建立了检测猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA法。该法的最适抗原包被浓度为5μg/mL,最佳酶标兔抗猪抗体稀释度为1∶5000,对猪抗PRRSV的IgG检测灵敏度达到0.1μg/mL。该法只与PRRS阳性猪血清呈现阳性反应,而与PRRS阴性猪血清和猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪瘟、猪细小病毒病阳性血清呈现阴性反应。应用该法检测PRRSVORF5基因疫苗免疫猪后的抗体消长规律表明,疫苗免疫猪后第7d抗体水平迅速上升,第75d达到高峰,然后缓慢下降,至第135d时仍然极显著(P<0.01)高于空载体对照和空白对照。试验结果表明,该法具有良好的特异性和敏感性,可用于PRRS流行病学调查和PRRSV基因疫苗免疫后抗体水平检测。 希尼尼根 程安春 汪铭书 豆文波 陈希文 陈孝跃 刘伍梅 李雪梅 刘芳 文明 贾仁勇关键词:间接ELISA 抗体消长规律 银耳孢子发酵物及与pGRF基因质粒合用对断奶仔猪生长、部分免疫指标及肠道菌群的影响 被引量:7 2009年 本研究探讨了银耳孢子发酵物(TSF)及与猪生长激素释放因子(pGRF)基因质粒合用对断奶仔猪生长、部分免疫指标以及肠道菌群的影响,同时与饲用抗生素效果作比较。选用48头(28±2)日龄的断奶D×L×Y三元杂交仔猪,采用单项分类试验设计,按体重相近、性别一致的原则随机分到对照组、抗生素组(吉他霉素40 mg/kg+硫酸抗敌素20 mg/kg)、TSF(4 000 mg/kg)组和TSF(4 000 mg/kg)+pGRF组4个组中,TSF+pGRF组中pGRF基因质粒是在试验开始时于每头猪后腿肌肉注射1 mg。试验期28 d。结果表明:与对照组相比,3组均显著提高了断奶仔猪的日增重(P<0.05)及改善饲料转化效率(P<0.05)。添加有TSF的2组较对照组和抗生素组能显著提高血清IL-2浓度(P<0.05)、T淋巴细胞转化率(P<0.05)和血清猪瘟抗体滴度(P<0.05);T淋巴细胞数量也有明显的提高(P=0.10)。添加有TSF的2组乳酸杆菌和双歧杆菌均显著高于抗生素组(P<0.05),与对照组差异不显著(P=0.07)。由结果证明,TSF有促生长的作用,而且效果与吉他霉素+硫酸抗敌素相当;同时TSF还能提高断奶仔猪的免疫功能,优化肠道菌群;TSF与pGRF基因质粒合用有进一步提高生长性能的趋势,但对免疫功能和肠道菌群没有进一步的改善作用。 傅祖良 王康宁 吴仿琪 李雪梅关键词:PGRF基因质粒 免疫 肠道菌群 母兔咬仔兔的原因和预防 被引量:1 2007年 饲养家兔常会出现母兔在产后咬食兔崽的现象,这主要有六方面的原因: 傅祖良 李雪梅关键词:仔兔 母兔 产后 家兔 饲养 HDAC2在猪繁殖与呼吸综合征病毒抑制剂中的应用 本发明属于生物医药领域和病毒感染领域,具体涉及HDAC2在Nsp11核酸内切酶依赖性的猪繁殖与呼吸综合征病毒抑制剂中的应用。具体的,公开了一种组蛋白脱乙酰酶(HDAC2)基因或其表达产物在制备抗病毒药物中的应用,所述病毒... 于长清 张贺 先元华 吴洋 李明翔 李雪梅 姜法铭 杨丹 徐超 陈达海