朱艳梅
- 作品数：24 被引量：60H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫P53ES抗原基因的克隆及真核表达被引量：4
- 2009年
- 应用RT-PCR方法扩增旋毛虫ES抗原P53基因,构建P53基因绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-P53,利用脂质体法将其转染哺乳动物细胞COS-7。于转染24h后在荧光显微镜下观察到发绿色荧光的转染细胞;同时通过westen blot分析证实了P53基因表达产物的抗原性。结果表明,P53基因在COS-7细胞中表达获得了表达,而且其融合蛋白具有免疫原性。
- 朱艳梅韩彩霞路义鑫宋铭忻
- 关键词：旋毛虫P53基因克隆真核表达
- 旋毛虫ES抗原P49基因的体外表达分析被引量：3
- 2011年
- 目的克隆和表达旋毛虫ES抗原P49基因,并分析表达产物的免疫原性。方法以重组质粒pCDNA3.1-P49为模板,PCR扩增旋毛虫ES抗原P49基因,将扩增片段双酶切产物连接到质粒pEGFP-N1中,构建重组真核表达载体pEG-FP-N1-P49,利用脂质体法将其转染哺乳动物细胞COS-7。于转染24h后在荧光显微镜下观察发绿色荧光的转基因细胞;通过Western-blot分析证实P49基因表达产物的免疫原性。结果成功构建旋毛虫ES抗原P49基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-P49,并在COS-7细胞中表达了目的蛋白,并且表达的蛋白可被感染旋毛虫小鼠阳性血清特异地识别。结论成功获得了重组蛋白,并证实该融合蛋白具有免疫原性,其结果为研究其生物学功能奠定了基础。
- 韩彩霞路义鑫李晓云朱艳梅宋铭忻
- 关键词：旋毛虫真核表达
- 鹅源新城疫病毒M蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
- 2011年
- 为了筛选鹅源新城疫病毒(JS/5/05/Go)M蛋白与鸡胚成纤维细胞作用的靶蛋白,应用酵母双杂交技术构建M蛋白的诱饵载体pGBKT7-M。采用RT-PCR方法从鹅源新城疫病毒中扩增了M基因片段,将其克隆到pGEM-T载体中,经测序鉴定正确后,定向克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组诱饵载体转化酿酒酵母Y187,并验证其在酵母细胞中有无自激活和毒性作用。结果显示,成功构建了诱饵载体pGBKT7-M,并证明其对报告基因无自激活作用,且对酵母细胞无毒性。表明诱饵载体pGBKT7-M可用于酵母双杂交系统寻找与M蛋白相互作用的蛋白质。
- 段志强王郁杨朱艳梅开妍胡顺林刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒M蛋白酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- 猪源新城疫病毒研究进展被引量：1
- 2011年
- 新城疫病毒是一种变异及进化速度很快的病原,随着世界范围内新城疫病毒的4次大流行和疫苗的广泛、大量重复使用,新城疫病毒的宿主范围随之明显扩大,现已向哺乳动物——猪跨进。对猪源新城疫病毒病原学、引发的临床症状、实验室诊断方法及其毒力和基因变异等方面进行综述,并对猪源新城疫病毒发生的可能原因进行了分析。
- 段志强朱艳梅
- 关键词：新城疫病毒基因变异
- 旋毛虫Ts43基因真核表达载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达
- 2007年
- 利用RT-PCR技术从黑龙江省猪源旋毛虫获得了Ts43基因,并克隆入pcDNA3.1-CT-GFP真核表达载体中构建重组质粒,用该重组质粒在脂质体介导下转染Vero E6细胞,GFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液样品中有1条约66 ku的条带,可被小鼠旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,说明,真核表达载体pcDNA3.1-CT-GFP中的Ts43基因在VeroE6细胞中获得了表达,表达产物具有抗原性。
- 王君路义鑫姜曰晓朱江威朱艳梅袁金钱宋铭忻
- 关键词：旋毛虫克隆真核表达
- 改良型贝尔曼氏装置
- 本实用新型提供了一种检查动物和人体内的线虫时稳定性好、灵敏度高、检查时间短、成本低的改良型贝尔曼氏装置。它包括铁架台5和设置在铁架台5上的漏斗1、一端连接漏斗1底端的胶皮管2、一端连接胶皮管2另一端的试管3、装设在短试管...
- 宋铭忻路义鑫马广鹏韩彩霞袁金钱朱江巍姜曰晓王君朱艳梅
- 文献传递
- 鸡胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定被引量：5
- 2011年
- 选取对新城疫病毒（NDV）易感的鸡胚成纤维细胞（CEF）,Trizol提取细胞总RNA,用SMART技术合成双链cDNA,然后利用同源重组的方法在酵母细胞内构建CEF的cDNA文库,以寻找与NDV基质（M）蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,探讨其相互作用对NDV装配和出芽的影响。结果表明：提取的细胞总RNA的D260 nm/D280 nm为1.96,甲醛变性琼脂糖凝胶显示RNA未发生降解,质量良好。获得的文库容量为3×106cfu,插入的双链cDNA片段大小为0.3~3 kb,平均长度为1.3 kb左右,文库重组率为100%。该文库的构建为发现和研究与NDV M蛋白相互作用的宿主细胞蛋白提供有效工具。
- 段志强王郁杨朱艳梅开妍胡顺林王晓泉刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒鸡胚成纤维细胞酵母双杂交CDNA文库SMART技术
- 鹅球虫病及其诊断与防治被引量：1
- 2011年
- 鹅球虫病（Coccidiosis）是由艾美耳属（Eimeria）和泰泽属（Tyzzeria）球虫寄生于鹅的肠道和肾脏所引起的一种寄生性原虫病。该病呈世界性分布,各种年龄、品种的鹅均可感染发病,但以幼鹅易感性大,发病重,死亡率高。鹅球虫病现已成为危害养鹅业发展的一种重要疾病。
- 段志强朱艳梅张妍
- 关键词：养鹅业球虫病寄生性原虫病艾美耳属易感性
- 新城疫病毒NP基因不同区域与毒力的关系
- 为了探讨NP基因主要区域与新城疫病毒毒力的关系，本研究以中等毒力BC株的NP基因及NP基因的保守区、可变区和5’端非编码区分别替换强毒株ZJ1株的对应区域，获得了4个重组质粒pZJSNP、pZJSCR、pZJSVR和pZ...
- 胡顺林朱艳梅王同燕王晓泉刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒NP基因重组质粒病毒毒力
- 2009—2010年华东地区家禽低致病性禽流感病毒的流行病学调查与分析被引量：29
- 2012年
- 为了解华东地区家禽中低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza viruses,LPAIVs)的分布规律,从2009年10月到2010年9月在华东地区某活禽市场采集鸡、鸭、鹅等家禽的泄殖腔拭子共1 650份,经鸡胚接种和HA、HI试验鉴定,结果从58份样品中分离到了LPAIVs,总分离率为3.51%。所分离到的6种HA亚型及各HA亚型分离率从高到底依次为:H6、H3、H1、H4、H9、H11。从这些样品中鉴定出7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8,二者之间有11种组合。家鸭样品中LPAIVs的分离率为7.28%,显著高于鸡源样品的分离率1.00%和鹅源样品的分离率1.02%。LPAIVs的季节性分布较为明显,3～6月份和10～12月份的分离率较高,而冬季最冷的1月份和夏季最热的7月份则没有分离到。2种或2种以上不同HA亚型混合感染的样品有6份,全部为水禽源样品,占总阳性样品数的10.34%。这些数据表明活禽市场可以作为AIV的一个重要储存库,而家养水禽可作为AIV的一个重要储存宿主,应该继续加强对活禽市场,尤其是家养水禽中AIV的监测。
- 赵坤坤仲书官赵国阮丽莎朱艳梅张妍段志强刘晓文刘文博彭大新刘秀梵
- 关键词：低致病性禽流感流行病学家禽分离率
