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松材线虫全蛋白的提取及其双向电泳体系优化被引量：2: 2011年; 目的:一种适用于双向电泳体系的松材线虫全蛋白提取方法的建立及其双向电泳体系的优化。方法:以松材线虫为实验材料,比较2种不同的蛋白提取方法,并对双向电泳中的IPG胶条长度、IPG胶条最适pH范围、上样量等3个方面的条件进行优化。结果:采用TCA-丙酮法提取的蛋白质浓度较高,达到2.18μg/μl。使用pH 5～8、24cm的IPG干胶条,上样量为120μg,经双向电泳分离可得到背景清晰、分辨率较高的2-DE图谱,能检测到2 000个左右清晰的蛋白点,含有相对丰富的蛋白信息量。结论:该实验所建立的松材线虫提取方法和优化体系可以为今后松材线虫蛋白质组学的研究奠定技术基础。; 付涵予任嘉红黄麟叶建仁; 关键词：松材线虫蛋白质提取双向电泳

一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取方法: 本发明公开了一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取方法，向产糖被细菌的培养物中加入提取缓冲液和溶菌酶，37℃下静置10min，再加入蛋白酶K，65℃下静置1h；加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液，抽提；加入氯...; 叶建仁李浩任嘉红付涵予吴小芹; 文献传递

中国松材线虫病流行动态与防控新技术: 叶建仁吴小芹陈凤毛胡林黄麟朱丽华柴忠心郝德君邱秀文俞禄珍付涵予孙波陈蔚诗刘雪莲周成龙; 松材线虫病（又称松树萎蔫病）是一种世界性重大森林病害。该病自1982年从国外传入南京至2008年，已先后在中国16省251个县区发生，每年发生面积100多万亩，致死松树数百万株。中国现有松林面积6亿亩，马尾松等14种主要...; 关键词：; 关键词：松材线虫病防控策略

松材线虫和拟松材线虫14-3-3蛋白基因全长cDNA克隆与分析被引量：5: 2011年; [目的]对松材线虫和拟松材线虫的14-3-3蛋白基因进行全长cDNA克隆,并进行序列分析。[方法]根据GenBank数据库中14-3-3蛋白EST序列BXC56(登录号为FG589472)、BMC120(登录号为FG589351),采用RACE技术获取松材线虫和拟松材线虫14-3-3蛋白的全长cDNA克隆Bx14-3-3a和Bm14-3-3a,并对克隆片段序列进行分析。[结果]Bx14-3-3a全长1 039 bp,包含一个756 bp的开放阅读框,编码蛋白含有251个氨基酸残基,包含2个14-3-3蛋白标签,编码蛋白分子量为61.43 kD,等电点为4.88。Bx14-3-3a基因组结构中包含4个外显子和3个内含子序列。Bm14-3-3a全长992 bp,有与Bx14-3-3a编码完全相同的氨基酸序列。序列比对结果表明,14-3-3在真核生物间高度保守,Bx14-3-3A和Bm14-3-3A蛋白在系统进化上与线形动物门(Nematomorpha)的物种近缘关系较近,与植物线虫南方根结线虫(Meloidogyne incognita)系统发育关系上最为亲近。[结论]Bx14-3-3a和Bm14-3-3a的成功克隆,为进一步研究其功能及其调控因子对形态、致病力、繁殖力和环境适应性等方面的分子调控机制奠定了重要基础。; 黄麟许剑涛付涵予吴小芹叶建仁; 关键词：松材线虫拟松材线虫基因结构生物信息学分析

一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取方法: 本发明公开了一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取方法，向产糖被细菌的培养物中加入提取缓冲液和溶菌酶，37℃下静置10min，再加入蛋白酶K，65℃下静置1h；加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液，抽提；加入氯...; 叶建仁李浩任嘉红付涵予吴小芹

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