陈静
- 作品数：10 被引量：47H指数：5
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表面修饰对纳米晶胶原基骨细胞相容性的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:探索纤维蛋白(fibrin,FB)修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)支架材料上成骨诱导的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)黏附、增殖及分化的情况。方法:实验分为两组:实验组,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);对照组,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。将SD大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导为成骨细胞,种植于支架材料上,体外复合培养。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3,7,10,14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶表达量以及扫描电镜观察细胞在支架材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。结果:大鼠MSCs经诱导培养14 d后,I型胶原免疫荧光染色为阳性;实验组支架材料的细胞黏附率显著高于对照组(P<0.05);且相同时间点实验组支架材料中的细胞数及碱性磷酸酶表达量也明显高于对照组(P<0.05);电镜观察发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。结论:表面修饰纤维蛋白后的nHAC支架材料具有更好的细胞黏附、增殖及促成骨分化能力。
- 马鹏徐成振徐晓峰陈静龚爱华张志坚
- 关键词：纤维蛋白修饰纳米晶胶原基骨组织工程骨
- 骨形态发生蛋白2和音猬因子体外诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化被引量：10
- 2009年
- 背景:研究表明,骨形态发生蛋白2和音猬因子联合诱导干细胞的定向分化存在理论上的可能性,但目前联合诱导间充质干细胞的方向纷繁复杂,且众说纷纭。目的:观察骨形态发生蛋白2和音猬因子在体外联合和单独应用促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的能力。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2008-12在江苏大学临床医学院实验室完成。材料:6周龄SPF级SD大鼠10只,体质量140～160g,雌雄不拘,用于间充质干细胞的获得、培养和传代。重组人骨形态发生蛋白2、音猬因子为PeproTech公司产品。方法:将SD大鼠的间充质干细胞分离培养后分为4组:重组人骨形态发生蛋白2组:加入100mg/L重组人骨形态发生蛋白2;音猬因子组:加入20μg/L音猬因子;联合组:100mg/L重组人骨形态发生蛋白2联合20μg/L音猬因子作用于SD大鼠间充质干细胞;对照组:不加任何干预措施。主要观察指标:倒置相差显微镜观察细胞形态学的变化;MTT法检测细胞培养第3,6,9,12天细胞增殖数和细胞碱性磷酸酶活性;以及成骨细胞表型的检测和Ⅰ型胶原蛋白免疫印迹分析,以比较各组诱导成骨能力的差异。结果:①间充质干细胞培养24h后部分贴壁,贴壁细胞呈圆形或椭圆形,第7天左右细胞铺满瓶底,多为梭形。条件培养基培养3d后,联合组细胞由长梭形转变为多角形。随后重组人骨形态发生蛋白2组细胞发生成骨样改变,音猬因子组细胞未见明显形态学改变。②相同时间点联合组、重组人骨形态发生蛋白2组、音猬因子组细胞吸光度均高于对照组(P<0.05)。联合组和重组人骨形态发生蛋白2组在各时间点碱性磷酸酶表达量均高于音猬因子组和对照组(P<0.05)。③间充质干细胞经诱导培养7d后,碱性磷酸酶细胞化学染色联合组和重组人骨形态发生蛋白2组呈阳性,联合组可见胞质中棕黄色颗粒,音猬因子组和对照组阴性
- 徐晓峰钱栋马鹏陈静李阳屈睿张志坚
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2音猬因子
- 纤维蛋白支架促进神经干细胞向神经元分化并抑制星形胶质细胞增生被引量：2
- 2010年
- 目的探讨纤维蛋白支架对神经干细胞和星形胶质细胞分化及增殖的影响。方法分别培养胚胎大鼠脊髓来源的神经干细胞和新生鼠脊髓神经胶质细胞,接种于纤维蛋白支架上,同时用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照。于体外培养不同时间后,用神经丝蛋白(NF200)对神经细胞进行免疫荧光染色,测量各复孔(n=4)内NF阳性细胞的突起长度,计算其平均值;用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对胶质细胞进行染色,各复孔(n=4)内统计5个不同视野的胶质细胞总数和GFAP阳性细胞数,计算GFAP阳性细胞相对数量的平均值。比较在纤维蛋白支架和玻片上神经干细胞分化、神经纤维延伸及神经胶质细胞增殖的差异。同时用免疫印迹技术对荧光染色结果进行验证。上述实验各重复3次。结果纤维蛋白支架组的NF阳性纤维明显长于对照组,GFAP阳性星形胶质细胞相对数量明显少于对照组,GFAP的表达水平明显低于对照组。结论纤维蛋白支架可促进神经干细胞向神经细胞分化,并有利于神经纤维的延伸而抑制星形胶质细胞的增殖和成熟。
- 崔颜宏王穆彬陈静陈谦孙湘兰龚爱华张志坚陈永昌姜平
- 关键词：纤维蛋白神经元星形胶质细胞免疫印迹法
- 大批量二氧化硫中毒临床救治分析被引量：2
- 2015年
- 目的：探讨急性二氧化硫大批中毒患者院内救治的组织与实施，以进一步提高批量患者救治质量。方法回顾性总结2012年＂7＆#183;12＂事件中的批量患者在江苏大学附属人民医院急诊救治的相关资料，分析其救治方法及救治效果。结果本组114例患者到达医院后，通过急诊有序组织，迅速分流、合理检查、规范处置，114例患者均成功救治。结论对于大批中毒患者采用院外急救、院内无缝连接，根据病情分组救治及危重患者集中救治的原则，可以最大限度地提高批量中毒患者的救治成功率。
- 张利远李政陈静张鹏
- 关键词：二氧化硫急性中毒临床救治
- 炎症因子在脊髓损伤SD大鼠脑脊液和血液中表达的比较研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨脊髓损伤后脑脊液和外周血中TNF-α、IL-6和IL-10的表达水平及其动态变化。方法采用成年SD大鼠重击法脊髓损伤模型,用ELISA方法测定脊髓损伤急性期内炎症因子在脑脊液和血液中相对含量和动态变化;同时用免疫组织化学方法,观察炎症因子在脊髓神经细胞和胶质细胞表达情况。结果ELISA测定结果显示炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10在脊髓损伤大鼠脑脊液内有较强表达,而在血液中表达很低。免疫组织化学染色显示脊髓组织中神经细胞和神经胶质细胞大量表达炎症因子。结论脊髓损伤的急性期内,神经细胞和神经胶质细胞是脊髓损伤急性期内炎症因子的主要来源,神经细胞和胶质细胞直接参与了损伤局部组织的固有免疫反应。
- 吕志刚孙湘兰许燕龚爱华梁燕崔颜红陈静张志坚
- 关键词：脊髓损伤脑脊液血液炎症因子
- 纤维蛋白支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响被引量：6
- 2009年
- 观察纤维蛋白-纤粘连蛋白-层粘连蛋白复合支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响,评价该支架移植修复脊髓损伤的可行性。本研究将圆柱状复合支架移植入大鼠脊髓完全横断缺损部位,同时以该模型动物作为对照组。分别于术后4w、8w、12w对动物下肢运动功能进行BBB评分。然后取出支架/脊髓组织,用免疫荧光双标和免疫印迹技术分析损伤部位神经纤维再生和胶质细胞增生情况;并用透射电镜观察支架移植部位的组织学结构。结果显示:术后4～12w支架移植组动物BBB评分明显高于对照组(P<0.05)。于术后4w,移植组可见支架内有少量神经纤维,此后神经纤维逐渐增多,而胶质细胞增生不明显;对照组脊髓损伤局部可见坏死空洞,空洞周边胶质细胞增生明显。免疫印迹检测结果表明,移植组神经丝蛋白(NF-200)相对含量高于对照组;对照组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的相对含量高于实验组。以上结果提示:纤维蛋白支架移植可促进大鼠脊髓损伤后神经再生,并抑制胶质瘢痕形成。纤维蛋白(原)作为生物材料用于构建修复脊髓损伤的组织工程支架具有良好的应用前景。
- 崔颜宏王穆彬陈静龚爱华步雪峰孙湘兰谷晓楚庄琴钱雷敏姜平张志坚
- 关键词：纤维蛋白纤粘连蛋白脊髓损伤神经丝胶质纤维酸性蛋白
- 再生丝素蛋白膜作为人嗅鞘细胞移植支架的研究被引量：1
- 2009年
- 探讨再生丝素蛋白膜对人嗅鞘细胞(hOECs)生物学特性的影响。人嗅鞘细胞接种在再生丝素蛋白膜上,取不同时相的细胞做下列实验。72 h固定,用免疫荧光染色技术观察人嗅鞘细胞的标志蛋白NT-3、S-100、GFAP、NGFRp75,用电子显微镜观察细胞在再生丝素蛋白膜上的生长状况;分别于48、72、96 h提取总蛋白,用免疫印迹法分析人嗅鞘细胞标志蛋白的表达情况;用MTT法分析细胞在再生丝素蛋白膜上的生长曲线。hOECs在再生丝素蛋白膜上能够很好地附着、铺展、生长,嗅鞘细胞的形态大多为梭形,嗅鞘细胞标志蛋白NT-3、NGFRp75、S-100及GFAP均呈免疫反应阳性,且免疫印迹结果与形态学结果一致;电镜结果显示,再生丝素蛋白膜的表面微纳结构适于细胞贴附、铺展;嗅鞘细胞在再生丝素蛋白膜上的生长曲线与培养板上无明显差异。再生丝素蛋白膜适合人嗅鞘细胞的贴附、增殖、生长,再生丝素蛋白膜与hOECs有较好的相容性,可以作为hOECs生长的候选组织工程支架用于修复神经损伤。
- 龚爱华陈静王穆彬杨勇陶燕崔颜宏张志坚李明忠杨吉成
- 关键词：神经损伤
- 纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响。方法:将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架,用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物,培养14天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3-环核苷3-磷酸二酯酶(2′,3′cyclic nucleotide 3′phosphodiesterase,CNPase)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)进行免疫荧光染色定位和免疫印迹半定量测定,分析纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞CNPase和MBP表达的影响。结果:人嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架后,其形态为长条带状,细胞成束排列,方向一致。细胞内CNPase和MBP表达水平明显高于对照组。结论:纤维蛋白支架与人嗅鞘细胞具有很好的生物相容性并可促进细胞表达髓鞘相关蛋白CNPase和MBP;将该组织工程支架用于移植治疗脊髓损伤,有利于再生神经纤维的髓鞘形成。
- 陈静黄秋生窦毅宗海洋崔颜宏庄琴孙湘兰龚爱华张志坚
- 关键词：髓鞘碱性蛋白
- 骨形成蛋白-2结合纤维连接蛋白体外诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的观察被引量：9
- 2009年
- 目的:研究骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein,BMP-2)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)在体外联合和单独应用促进骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymal stem cells,MSCs)向成骨细胞分化的能力。方法:SD大鼠的MSCs分离培养后,分为4组:对照组;A组(加入100μg/ml BMP-2);B组(加入10 ng/ml FN);C组(加入100μg/ml BMP-2和10 ng/ml FN),通过检测不同时间点(3,6,9,12天)各组细胞数量?细胞碱性磷酸酶(ALP)活性?成骨细胞表型以及扫描电镜观察细胞在材料上的生长状况,比较分析各组成骨诱导能力的差异。结果:A组、B组和C组细胞形态,成骨细胞表型检测都发生了变化;各组的细胞数和ALP活性随着培养时间的延长而增加,但C组变化最明显,与相同时间点其他各组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察发现各组材料上均有细胞生长,但C组细胞的黏附生长状况明显好于其他组。结论:BMP-2和FN在体外能明显促进MSCs向成骨细胞分化,两者具有明显的协同效应,可以作为理想的成骨诱导剂应用于组织工程。
- 钱栋马鹏李阳陈静屈睿徐晓峰
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨形成蛋白-2纤维连接蛋白
- 不同培养代数大鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞转分化能力的比较被引量：5
- 2009年
- 为确定诱导大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞转分化的适宜培养代数,本研究比较了不同培养代数的BMSCs的转分化潜能。首先体外培养大鼠BMSCs并传代,于不同的培养代数利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)、全反式维甲酸(RA)、音猬因子(Shh)诱导分化,随后运用免疫荧光法和免疫印迹法检测诱导细胞中的神经元样细胞。结果显示骨髓基质细胞体外培养1至3代时能够被诱导分化为神经元样细胞,培养至第7代时丧失转分化为神经元样细胞的潜能。上述结果提示:传代次数增多将引起BMSCs自发分化,使其向神经元样细胞转分化的能力下降,因而BMSCs培养至第3代时适宜进行诱导分化。
- 陈谦陈静崔颜宏庄琴胡萍萍龚爱华张志坚
- 关键词：骨髓基质细胞分化神经元样细胞传代
