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鸡马立克氏病病毒编码的miRNA表达特征分析: miRNA是一类非编码单链RNA,通过与靶nRNA3’UTR互补结合,从而降解mRNA或抑制翻译,进而影响细胞分化和凋亡等许多过程。至今,在疱疹病毒基因组中发现的miRNA已达100多种,其中多种miRNA在肿瘤发生发展...; 郑惠文; 关键词：马立克氏病病毒荧光定量PCR MIRNA 病毒载量; 文献传递

感染MDV鸡羽髓组织中CyP、LASP1和PCBP1蛋白的表达分析: 2013年; 本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究以MDV GA强毒株感染SPF鸡,应用荧光定量PCR和westernblot检测病毒感染14 d和21 d后这3种蛋白在羽髓组织中的表达水平。检测结果表明,病毒感染14 d后,羽髓组织中这3种蛋白的mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的下调,其中LASP1 mRNA和PCBP1蛋白分别下调62%和48%(p<0.05);在21 d,除CyP蛋白表达基本不变外,其他mRNA和蛋白均不同程度下调,其中LASP1蛋白下调达到46%(p<0.05)。结果表明在两个不同的MDV感染时期,MDV均可以不同程度的抑制羽髓组织中这3种蛋白的表达,本研究为进一步阐释MDV与羽髓组织的相互作用机理提供有价值的参考。; 谭成章张艳萍李志杰郑永胜郑惠文刘长军; 关键词：马立克氏病病毒 CYP

鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析: 2014年; 最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用。为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征。结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关。该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据。; 郑惠文李志杰张艳萍包珂岩郑永胜刘长军王笑梅; 关键词：鸡马立克氏病病毒 MIRNA 荧光定量PCR

鸡马立克氏病强弱病毒株PCR鉴别检测方法在诊断中的应用评价被引量：2: 2016年; 为在现地准确诊断鸡马立克氏病(MD)以及区分发病鸡中MD病毒(MDV)野毒株和疫苗株的感染,本研究选择MDV血清1型(MDV-1)基因组中两个特有的、强弱毒株存在序列差异的基因片段132 bp重复序列(132 bpr)和meq基因作为靶基因,建立了MDV的PCR检测方法。特异性试验和敏感性试验表明该PCR方法特异性强,敏感性高,132 bpr和meq基因两对引物对阳性重组质粒的检测下限分别为1.0×103拷贝/μL和1.0×102拷贝/μL。通过对近10年的1057份临床样品的检测对该PCR方法进行应用评价。结果表明病毒分离与PCR检测结果的符合率为100%,PCR检测结果可信度高;琼脂扩散试验(AGP)对MDV PCR检测阳性样品的检测阳性率为86.25%,PCR法检测敏感性明显高于AGP法。此外,对分离病毒株meq基因序列分析结果表明,所有分离株均具有中国野毒株特征,即突变主要出现于其编码蛋白的6个氨基酸中(K77E、D80 Y、V115 A、T139 A、P176 R或P217A),表明该PCR检测方法具有良好的特异性。本研究建立的MDV PCR检测方法特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性,可以用于MD的临床诊断。; 吕红超张艳萍孙国荣高玉龙李志杰郑惠文包珂岩王笑梅刘长军; 关键词：鸡马立克氏病 PCR检测 MEQ基因

鸡马立克氏病病毒疫苗株对强毒株的复制抑制作用被引量：1: 2014年; 为研究鸡马立克氏病(MD)疫苗株对强毒株体内复制的抑制作用,本研究依据鸡MD病毒(MDV)R-LORF2基因序列设计引物和探针,建立特异性定量检测MDV流行强毒株L-CY的荧光定量PCR方法,并且应用该方法对CVI988疫苗株免疫后不同时间间隔L-CY株攻毒鸡体内不同组织的强毒载量进行动态的定量检测。结果显示,免疫后7 d和14 d攻毒鸡体内不同组织强毒载量显著低于单独攻毒鸡;而同时免疫和攻毒组鸡中强毒载量无明显降低。在免疫后7 d攻毒组中,法氏囊中的强毒载量始终稳定在低水平,但羽髓和肾脏中的强毒载量自攻毒后21 d开始明显上升。结果表明,至少要在感染L-CY株14 d前免疫,CVI988疫苗株才能有效抑制强毒株在体内的复制。此外,当免疫后7 d攻毒时,在羽髓或肾脏等非免疫器官中,疫苗病毒不能持续抑制强毒复制,最终导致疫苗不能提供有效的保护。本研究为MD免疫机制的进一步研究提供了依据。; 郑永胜张艳萍李志杰郑惠文谭成章刘长军; 关键词：马立克氏病病毒病毒载量荧光定量PCR

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郑惠文