胡彩平
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 柱花草炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建
- 柱花草(Stylosanthes spp.)原产拉丁美洲,是全球热带地区最优良、栽培面积最大、应用最广泛的豆科牧草。炭疽病是长久以来限制柱花草生产及推广的最严重病害。至今,国内外对该病分子致病机理研究较少。本研究采用根癌...
- 胡彩平
- 关键词：柱花草胶孢炭疽菌
- 文献传递
- 柱花草炭疽病菌T-DNA插入突变体库的构建与分析被引量：1
- 2014年
- 胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的柱花草炭疽病是热带牧草柱花草的主要病害,利用根癌农杆菌介导转化(Agrobacterium tumefaciens mediated transformation,ATMT)的T-DNA插入突变技术,可使炭疽病菌基因组上被插入部位的基因丧失功能,是研究柱花草炭疽病菌致病机理的重要方法。在先前优化根癌农杆菌介导柱花草炭疽病菌遗传转化体系的基础上,构建了4 616个转化子的突变体库,从中随机选取部分突变体,对其TDNA插入拷贝数、遗传稳定性、生长速度、产孢量、分生孢子萌发等进行分析。结果表明,所得转化子多为单拷贝,能稳定遗传。一些转化子的生长速度、产孢量、分生孢子萌发率与野生型相比有明显差异。
- 高建明胡彩平郑金龙张世清陈河龙刘巧莲习金根易克贤
- 关键词：胶孢炭疽菌柱花草突变体库致病机理
- 柱花草炭疽菌突变体库致病缺陷转化子筛选及T-DNA插入位点侧翼序列分析
- 2014年
- 比较了接种病原菌侵染柱花草的几种方法的效果,选定出最佳的初筛和复筛方法,进而对1 230个转化子进行筛选,得到致病力缺陷菌23株,其中致病力减弱的菌株18株,致病力完全丧失的5株。利用TAIL-PCR扩增致病力丧失突变子t-2430的T-DNA插入位点侧翼序列,得到大小为476 bp的一段序列,BLAST比对已测序炭疽菌基因组,发现401nt和数据库的Contig464的部分序列完全一致,进一步对该段序列的功能进行预测,表明T-DNA插入在一预测基因的启动子区域,并且这个预测基因与稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的天冬氨酸转氨酶(XP_003719674.1)同源性为79%。
- 高建明胡彩平郑金龙张世清陈河龙刘巧莲习金根易克贤
- 关键词：炭疽菌侧翼序列
- 根癌农杆菌介导柱花草炭疽菌遗传转化体系的优化被引量：10
- 2013年
- 选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农杆菌AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农杆菌AGL-1介导柱花草炭疽菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢炭疽菌体系条件,使转化效率达到300～400个转化子/106个炭疽孢子,即根癌农杆菌AGL-1浓度OD600=0.8,炭疽菌分生孢子浓度为1×106个/mL,AS浓度为100μmol/L,诱导时间为6 h,共培养温度和时间分别为25℃和4 d。经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白。这为进一步开展炭疽菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究。
- 胡彩平郑金龙高建明蔡志英黄贵修习金根张世清陈河龙易克贤
- 关键词：柱花草炭疽菌
