汤晓玲
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学更多>>
- 消旋1-苯基乙醇类化合物的酶拆分方法
- 本发明涉及一种基于生物酶拆分消旋体的方法，尤其是指消旋1-苯基乙醇类化合物的酶拆分方法。本发明采用的技术方案为：一种消旋1-苯基乙醇类化合物的酶拆分方法，以乙酸乙烯酯为原料，在生物酶的作用下，在有机溶剂中反应制备R-(+...
- 于洪巍王博汤晓玲刘击
- 文献传递
- 通过定向进化手段获得的RSP_2728酯酶突变基因及酯酶在扁桃酸甲酯拆分反应中的应用
- 本发明属于基因工程与酶工程领域。公开了酯酶基因RSP-2728的突变基因及其基因工程的应用。通过定向进化手段，采用易错PCR和基因克隆方法，以及一种适用于活性以及立体选择性的高通量筛选方法，通过四轮筛选，获得了最终突变酯...
- 于洪巍汤晓玲刘击
- 文献传递
- 酯酶的克隆、表达、筛选以及立体选择性的定向进化研究
- 酯酶(EC3.1.1.x)是能够催化一系列酯键生成相应的酸和醇的重要生物催化剂。其在有机溶剂中有较好的稳定性、活性及立体选择性，因此被广泛用于合成食品添加剂、农用化学品和医药中间体等重要化合物.在本课题中，我们采用分子克...
- 汤晓玲
- 关键词：酯酶大肠杆菌分子克隆定向进化高通量筛选
- 通过定向进化策略提高酯酶立体选择性的研究被引量：3
- 2011年
- 对菌株Rhodobacter sphaeroides的RSP-2728酯酶基因进行立体选择性定向进化研究,建立了有效的定向进化策略,以及通过扁桃酸甲酯水解反应所产生的酸根离子浓度来监测酶活的高通量筛选方法。利用易错PCR技术,进行了三轮突变,获得了突变株A6A5,B7F11和C8G1,对映体选择性(E值)从3.13分别提高到5.32,8.77和14.01;提高了1.7倍,2.8倍和4.5倍。序列分析表明,突变体A6A5有一个62位上的氨基酸发生了改变,由原先的天冬酰胺变成了酪氨酸;突变体B7F11的62位的天冬酰胺变成了酪氨酸,145位上的亮氨酸变成了组氨酸;突变体C8G1的62位的天冬酰胺变成了半胱氨酸,145位的亮氨酸变为组氨酸。利用定向进化策略能够有效地提高酶的立体选择性。
- 汤晓玲于洪巍
- 关键词：酯酶定向进化易错PCR高通量筛选
- 消旋1－苯基乙醇类化合物的酶拆分方法
- 本发明涉及一种基于生物酶拆分消旋体的方法，尤其是指消旋1－苯基乙醇类化合物的酶拆分方法。本发明采用的技术方案为：一种消旋1－苯基乙醇类化合物的酶拆分方法，以乙酸乙烯酯为原料，在生物酶的作用下，在有机溶剂中反应制备R－(+...
- 于洪巍王博汤晓玲刘击
- 文献传递
- 通过定向进化手段获得的RSP_2728酯酶突变基因及酯酶在扁桃酸甲酯拆分反应中的应用
- 本发明属于基因工程与酶工程领域。公开了酯酶基因RSP-2728的突变基因及其基因工程的应用。通过定向进化手段，采用易错PCR和基因克隆方法，以及一种适用于活性以及立体选择性的高通量筛选方法，通过四轮筛选，获得了最终突变酯...
- 于洪巍汤晓玲刘击
