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曹永生: 作品数：15 被引量：26H指数：3; 供职机构：东北农业大学更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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rHtaA-c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用: 本发明公开了rHtaA‑c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用，rHtaA‑c蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。实验证明，rHtaA‑c蛋白可以抑制化脓隐秘杆菌和减轻化脓隐秘杆菌感染引起的组织病理损伤，因...; 曹永生张文龙白昀璐

Asia1型FMDV复合表位免疫原的研制及免疫效果研究: 口蹄疫(Foot-and-mouth Disease，FMD)作为一种全球范围内的重大动物疫病，已成为当前动物及其产品国际贸易的主要障碍。O、A、Asia1型FMD是我国一直以来的防治重点，灭活疫苗在预防和控制FMD的过...; 曹永生; 关键词：免疫效果黏膜免疫

金黄色葡萄球菌蛋白AB结构域的基因优化与原核表达及其亲和性鉴定被引量：1: 2013年; 为高效表达可特异地与人及牛、山羊、兔、豚鼠、鸡等多种动物免疫球蛋白(Ig)结合的重组蛋白BB-SPA,以金黄色葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)免疫球蛋白结合结构域(B结构域)为基因优化设计对象,人工设计了SPA B结构域基因B-SPA,将其拆分为4条寡聚核苷酸片段形式,并采用重叠延伸PCR法合成该基因,构建重组表达载体pET30a-BB-SPA,转化至E.coli Rosetta(DE3)pLysS中表达重组蛋白BB-SPA,表达的重组蛋白分子质量约为14ku,相对表达量为56%。经Western-blotting与ELISA鉴定,证实了BB-SPA具有良好的生物活性。为多种动物免疫球蛋白的纯化、检测以及诊断试剂的开发提供了物质支持。; 李迪曹永生徐晶晶王欢张润祥王君伟高明春; 关键词：密码子优化亲和层析纯化活性分析

规模化奶牛场口蹄疫O-Asia 1型二价灭活苗不同免疫程序免疫抗体水平分析被引量：5: 2011年; 口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的以感染偶蹄动物为主的急性、热性、高度接触传染性和快速远距离传播的动物疫病，以传染性强、传播速度快、危害严重而著称。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一，我国将其列为一类动物传染病。根据OIE公布数据，2009年内地全年通报了16起口蹄疫疫情，感染动物主要为牛，其中的7起为我国过去未见的A型口蹄疫感染，其余均为Asial型感染。2010年又报道多起牛、羊A型FMDV猪O型FMDV。因此，口蹄疫的防控任务依然艰巨。; 张润祥高明春刘慧环曹永生王晓东王君伟; 关键词：规模化奶牛场免疫程序灭活苗世界动物卫生组织接触传染性动物传染病

rHtaA-c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用: 本发明公开了rHtaA‑c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用，rHtaA‑c蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。实验证明，rHtaA‑c蛋白可以抑制化脓隐秘杆菌和减轻化脓隐秘杆菌感染引起的组织病理损伤，因...; 曹永生张文龙白昀璐

黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌病血清抗体回顾性检测与示范场净化效果评价被引量：1: 2014年; 采用间接ELISA、竞争ELISA对2009-2011年采自黑龙江省16个奶牛场的4 830份血清样本进行回顾性检测,并对此期间的2个布鲁菌病净化示范场样本进行验证性检测,以期了解2009-2011年间黑龙江省布鲁菌血清学状况,并对布鲁菌病牛净化示范场的净化效果进行评价。结果显示,2009-2011年间黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌血清抗体阳性率较低;2个布病净化示范牛场连续三年始终保持在布鲁菌病净化水平;采用"检疫+扑杀"的净化流程后,2个规模化奶牛场达到净化水平,说明其布鲁菌病净化程序具有实践意义,值得推广。; 邵建伟刘洪涛曹永生张润祥曹翀彭统全张永根张维银甘文平罗清华高明春王君伟; 关键词：酶联免疫吸附试验

4种ELISA方法检测牛口蹄疫非结构蛋白抗体的ROC评价被引量：1: 2013年; 目的比较4种口蹄疫病毒非结构蛋白抗体(FMDV-NSP)ELISA的临床检测效果。方法以Ceditest?ELISA试剂盒检测结果为"金标准",应用4种ELISA方法检测164份牛血清口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,通过平行试验比较各检测方法的特异性,敏感性及检出率,然后应用受试者工作特征(ROC)曲线分析,分析各检测方法的Youden指数,并优化最适临界值,再次比较几种检测方法的特异性,敏感性及检出率。结果口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒,口蹄疫病毒非结构蛋白抗体单抗阻断ELISA试剂盒,3B合成肽ELISA试剂盒和本实验室建立的8BF-ELISA的敏感性分别为94.2%(80/85),91.9%(78/85),83.7%(71/85),91.9%(78/85);特异性分别为97.4%(77/79),91.0%(72/79),97.4%(77/79),94.9%(75/79);检出率为95.8%(157/164),91.5%(150/164),90.3%(148/164),93.3%(153/164)。。经X2检验,4种ELISA的检出率之间无显著性差异(P=0.461>0.05)。但3B合成肽ELISA试剂盒的敏感性明显低于其他3种检测方法,不适合大规模临床样本的初筛试验。结论在优化临界值后的ELISA A,ELISA B和ELISA D的敏感性和特异性都大于90%,同时有着很高的检出率,均可用于大规模临床的样本的初筛试验。; 王欢张润祥李迪曹永生高明春王君伟; 关键词：口蹄疫非结构蛋白 ROC

鹅干扰素-α的毕赤酵母表达及其生物学活性分析被引量：2: 2013年; 为在毕赤酵母表达系统中表达无冗余氨基酸且具有抗病毒活性的鹅干扰素-α(IFN-α)蛋白,采用融合PCR法扩增获得鹅干扰素-α基因片段,将此片段连入pPICZαA载体,构建重组表达质粒pPICZαA-GoIFN-α,电击转化毕赤酵母感受态细胞X33,挑取阳性重组菌用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行West-ern-blot和ELISA分析,并测定重组IFN-α的生物活性。结果显示,融合基因获得高效表达,表达的蛋白以可溶形式存在,且相对分子质量较理论值稍大。经GEF-GPMV系统检测,证实表达的蛋白具有生物学活性,约为6.55×105 U/mL,比活力为1.80×105 U/mg。结果表明,利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有生物学活性的鹅IFN-α有广阔的应用前景。; 朱永梅曹永生李鑫马波张文龙高明春王君伟; 关键词：干扰素-Α 巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性

辣根过氧化物酶标记兔抗丝状噬菌体衣壳蛋白抗体的制备与初步应用被引量：7: 2013年; 为了制备用于噬菌体展示肽库的筛选及鉴定等环节的辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗丝状噬菌体(M13)衣壳蛋白抗体,试验制备了兔源的M13KE多克隆抗体,将多克隆抗体经饱和硫酸铵法和Protein G Resin层析柱纯化后运用过碘酸钠法对其进行辣根过氧化物酶标记,对标记前和标记后纯化产物进行活性测定,同时对标记后产物进行Western-blot鉴定,以及将其应用到验证已知的阳性噬菌体H11、H12、H14、H16、H18中。结果表明:兔抗M13KE多克隆抗体效价高于1∶32 000,标记后活性高于1∶4 000,标记抗体与已知阳性噬菌体的ELISA鉴定结果与前期测序结果一致。说明此酶标抗体有一定的应用价值。; 徐晶晶李迪曹永生高明春王君伟; 关键词：酶标抗体

一种鸭甲型肝炎病毒3型重组免疫原及其应用: 本发明公开了一种鸭甲型肝炎病毒3型（DHAV‑3）重组免疫原及其应用。本发明将DHAV‑3结构蛋白VP1、VP3和VP0的保护性抗原优势区经柔性Linker串联后进行原核表达，以纯化的重组蛋白（rDHAV‑3‑VP）为免...; 马波李洪涛门嘉琪于李丹依常蕊王文月曹永生闵亚宏张文龙张桂红王君伟

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