曹永生 作品数:17 被引量:26 H指数:3 供职机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家现代农业产业技术体系建设项目 黑龙江省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
rHtaA-c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用 本发明公开了rHtaA‑c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用,rHtaA‑c蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。实验证明,rHtaA‑c蛋白可以抑制化脓隐秘杆菌和减轻化脓隐秘杆菌感染引起的组织病理损伤,因... 曹永生 张文龙 白昀璐Asia1型FMDV复合表位免疫原的研制及免疫效果研究 口蹄疫(Foot-and-mouth Disease,FMD)作为一种全球范围内的重大动物疫病,已成为当前动物及其产品国际贸易的主要障碍。O、A、Asia1型FMD是我国一直以来的防治重点,灭活疫苗在预防和控制FMD的过... 曹永生关键词:免疫效果 黏膜免疫 奶牛OIE标准布鲁氏菌病血清与奶液ELISA检测方法在我国的初步应用 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染引起的一种人畜共患的全身性疾病。奶牛感染布鲁氏菌后引起网状内皮系统和妊娠期细胞的炎症反应,进而导致流产同时排出大量的布鲁氏菌,威胁同群其他个体~([1]),这也是布鲁氏菌病成为我国奶牛养殖重点防... 曹永生 高明春 张润祥 王君伟文献传递 金黄色葡萄球菌蛋白AB结构域的基因优化与原核表达及其亲和性鉴定 被引量:1 2013年 为高效表达可特异地与人及牛、山羊、兔、豚鼠、鸡等多种动物免疫球蛋白(Ig)结合的重组蛋白BB-SPA,以金黄色葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)免疫球蛋白结合结构域(B结构域)为基因优化设计对象,人工设计了SPA B结构域基因B-SPA,将其拆分为4条寡聚核苷酸片段形式,并采用重叠延伸PCR法合成该基因,构建重组表达载体pET30a-BB-SPA,转化至E.coli Rosetta(DE3)pLysS中表达重组蛋白BB-SPA,表达的重组蛋白分子质量约为14ku,相对表达量为56%。经Western-blotting与ELISA鉴定,证实了BB-SPA具有良好的生物活性。为多种动物免疫球蛋白的纯化、检测以及诊断试剂的开发提供了物质支持。 李迪 曹永生 徐晶晶 王欢 张润祥 王君伟 高明春关键词:密码子优化 亲和层析纯化 活性分析 规模化奶牛场口蹄疫O-Asia 1型二价灭活苗不同免疫程序免疫抗体水平分析 被引量:5 2011年 口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的以感染偶蹄动物为主的急性、热性、高度接触传染性和快速远距离传播的动物疫病,以传染性强、传播速度快、危害严重而著称。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一,我国将其列为一类动物传染病。根据OIE公布数据,2009年内地全年通报了16起口蹄疫疫情,感染动物主要为牛,其中的7起为我国过去未见的A型口蹄疫感染,其余均为Asial型感染。2010年又报道多起牛、羊A型FMDV猪O型FMDV。因此,口蹄疫的防控任务依然艰巨。 张润祥 高明春 刘慧环 曹永生 王晓东 王君伟关键词:规模化奶牛场 免疫程序 灭活苗 世界动物卫生组织 接触传染性 动物传染病 Asia1型口蹄疫病毒衣壳蛋白在毕赤酵母中共表达及免疫效果评价 被引量:3 2013年 为研究Asia1型口蹄疫病毒衣壳蛋白在毕赤酵母中共表达及其免疫原性,本研究基于酵母细胞内表达载体pPICZA,利用独立编码三个衣壳蛋白表达盒构建质粒pPICZA-vp031,重组质粒经BglⅡ线性化后进行电转化,获得重组有三个独立表达盒重组酵母菌。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明衣壳蛋白均得到正确表达且具有良好抗原性。重组酵母菌经口服免疫小鼠后,机体能够产生血清特异性IgG抗体和黏膜sIgA抗体,淋巴细胞增殖结果显示免疫小鼠淋巴细胞特异性增殖指数显著高于灭活疫苗组,细胞因子检测结果显示经特异性抗原刺激免疫小鼠淋巴细胞分泌IL-4和IL-10与灭活疫苗组无显著差异,显著高于PBS对照组,表明重组菌能够刺激机体产生特异性细胞免疫应答。本研究为口蹄疫基因工程疫苗研制奠定基础。 曹永生 高明春 曹翀 张润祥 李迪 王欢 王君伟关键词:毕赤酵母 共表达 抗原性 rHtaA-c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用 本发明公开了rHtaA‑c蛋白在制备用于预防化脓隐秘杆菌的疫苗中的应用,rHtaA‑c蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。实验证明,rHtaA‑c蛋白可以抑制化脓隐秘杆菌和减轻化脓隐秘杆菌感染引起的组织病理损伤,因... 曹永生 张文龙 白昀璐黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌病血清抗体回顾性检测与示范场净化效果评价 被引量:1 2014年 采用间接ELISA、竞争ELISA对2009-2011年采自黑龙江省16个奶牛场的4 830份血清样本进行回顾性检测,并对此期间的2个布鲁菌病净化示范场样本进行验证性检测,以期了解2009-2011年间黑龙江省布鲁菌血清学状况,并对布鲁菌病牛净化示范场的净化效果进行评价。结果显示,2009-2011年间黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌血清抗体阳性率较低;2个布病净化示范牛场连续三年始终保持在布鲁菌病净化水平;采用"检疫+扑杀"的净化流程后,2个规模化奶牛场达到净化水平,说明其布鲁菌病净化程序具有实践意义,值得推广。 邵建伟 刘洪涛 曹永生 张润祥 曹翀 彭统全 张永根 张维银 甘文平 罗清华 高明春 王君伟关键词:酶联免疫吸附试验 4种ELISA方法检测牛口蹄疫非结构蛋白抗体的ROC评价 被引量:1 2013年 目的比较4种口蹄疫病毒非结构蛋白抗体(FMDV-NSP)ELISA的临床检测效果。方法以Ceditest?ELISA试剂盒检测结果为"金标准",应用4种ELISA方法检测164份牛血清口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,通过平行试验比较各检测方法的特异性,敏感性及检出率,然后应用受试者工作特征(ROC)曲线分析,分析各检测方法的Youden指数,并优化最适临界值,再次比较几种检测方法的特异性,敏感性及检出率。结果口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒,口蹄疫病毒非结构蛋白抗体单抗阻断ELISA试剂盒,3B合成肽ELISA试剂盒和本实验室建立的8BF-ELISA的敏感性分别为94.2%(80/85),91.9%(78/85),83.7%(71/85),91.9%(78/85);特异性分别为97.4%(77/79),91.0%(72/79),97.4%(77/79),94.9%(75/79);检出率为95.8%(157/164),91.5%(150/164),90.3%(148/164),93.3%(153/164)。。经X2检验,4种ELISA的检出率之间无显著性差异(P=0.461>0.05)。但3B合成肽ELISA试剂盒的敏感性明显低于其他3种检测方法,不适合大规模临床样本的初筛试验。结论在优化临界值后的ELISA A,ELISA B和ELISA D的敏感性和特异性都大于90%,同时有着很高的检出率,均可用于大规模临床的样本的初筛试验。 王欢 张润祥 李迪 曹永生 高明春 王君伟关键词:口蹄疫 非结构蛋白 ROC 鉴定或辅助鉴定传染性造血器官坏死病毒的组合物及其应用 本发明公开了鉴定或辅助鉴定传染性造血器官坏死病毒的组合物及其应用。该组合物由名称IHNV‑DPOF的上游引物和名称为IHNV‑DPOR的下游引物组成;IHNV‑DPOF的核苷酸序列是SEQ ID No.1,IHNV‑DP... 曹永生 郑世豪 张文龙 黄静雯 赵宏颖 董秀梅