王良国
- 作品数：10 被引量：71H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 左心耳封堵联合冷冻球囊消融治疗心房颤动有效性和安全性2年随访观察被引量：5
- 2019年
- 目的评估左心耳封堵联合冷冻球囊消融治疗有症状的高危脑卒中风险的非瓣膜性心房颤动(房颤)患者的有效性和安全性。方法回顾性分析2015年6月至2017年7月在温州医科大学附属第一医院行左心耳封堵联合冷冻球囊消融术的具有高危脑卒中风险的非瓣膜性房颤患者,左心耳封堵力求达到完全封堵,无残余分流。术后定期门诊随访症状、心电图、动态心电图和经食管超声心动图(TEE),观察手术的疗效和安全性。结果本研究纳入患者74例,男42例(56.8%),女32例(43.2%),平均年龄(70.2±8.1)岁,阵发性房颤患者62例(83.8%),持续时间≤3个月的房颤患者12例(16.2%),CHA2DS2-VASc评分(4.0±1.5)分,HAS-BLED评分(3.3±1.0)分。所有患者均用冷冻球囊成功隔离两侧肺静脉,并完成左心耳封堵。共成功植入Watchman封堵器55例,其中31例(56.4%)Watchman封堵器经过回收技术调整到满意位置后成功释放。共植入ACP封堵器19例,其中8例(42.1%)经过回收技术调整至满意位置后成功释放。19例植入ACP封堵器的患者中有5例为Watchman封堵器反复调整仍有残余分流改用ACP封堵器植入成功。有5例Watchman封堵器和1例ACP封堵器更换1次不同规格的同类封堵器植入成功。术中72例(97.3%)无残余分流,平均随访时间为(23.3±7.0)个月。冷冻球囊消融复发率为35.1%,术后45d,6、12个月TEE检查随访率分别为98.6%(73/74)、67.6%(50/74)和66.2%(49/74);完全封堵率为82.2%、88.0%、91.8%,无1例>3 mm残余分流。73例(98.6%)患者在3个月随访时停用了抗凝药物。1例患者出现非心脏原因死亡,1例患者出现缺血性脑卒中,2例患者出现大出血事件,1例患者出现封堵器表面血栓。结论左心耳封堵联合冷冻球囊消融对于有症状的脑卒中高危风险非瓣膜病房颤患者是一个安全有效的治疗选择。
- 肖方毅周晓东方英王良国苏蓝黄伟剑
- 关键词：心房颤动冷冻消融
- 转录因子Pax-8基因干扰后线粒体功能对心肌细胞凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的采用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达，引起线粒体功能的变化，借此探讨线粒体对心肌细胞凋亡的影响。方法将H9C2（2-1）大鼠胚胎心肌细胞分为3组：实验组[针对Pax-8基因的小干扰RNA（Pax-8siRNA）组]，阴性对照组[非特异性siRNA（NCsiRNA）组]和空白对照组（BCsiRNA组）。荧光分光光度法检测半胱天冬酶（caspase-3）活性以反映细胞凋亡，RT—PCR测定B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcelllymphoma／lewkmia-2，Bcl2）和其同源类似物Bax的mRNA表达，Westernblot测定Bcl2、Bax和胞浆细胞色素C（Cyto）的蛋白表达，流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位（△咿m，用JC-1单体／聚合物比值来衡量线粒体去极化的比例，比值越大，△ψm越低）。结果Pax-8siRNA组心肌细胞caspase-3活性（0．167±0．012）明显高于NCsiRNA组（0．075±0．021）和BCsiRNA组（0．072±0．019），P均〈0．05。Pax-8siRNA组Bcl，mRNA和蛋白的表达水平（分别为0．61±0．06和0．94±0．11）明显低于NCsiRNA组（分别为0．90±0．070和1．39±0．15）和BCsiRNA组（分别为0．94±0．09和1．49±0．20），P均〈0．05。Pax-8siRNA组BaxmRNA和蛋白表达水平（分别为1．05±0．10和1．25±0．12）明显高于NCsiRNA组（分别为0．72±0．03和0．99±0．12）和BCsiRNA组（分别为0．64±0．03和0．92±0．06），P均〈0．05。Pax-8siRNA组心肌细胞线粒体释放Cyto至胞浆的量（0．75±0．14）明显高于NCsiRNA组（0．51±0．06）和BCsiRNA组（0．48±0．07），P均〈0．05。Pax-8siRNA组JC-1单体／聚合物比值（0．163±0．011）明显高于NCsiRNA组（0．092±0．015）和BCsiRNA组（0．072±0．025），P均〈0．05，提示Aqtm明显低于NCsiRNA组和BCsiRNA组（P均〈0．05）。NCsiRNA组与BCsiRNA组上述指标比较，差异均无统计学意义。结论Pax-8基因干扰心肌细胞，促进了心肌细胞的凋亡，线粒体参与了心肌�
- 戴晓春周希黄晓燕王良国林素杨德业
- 关键词：肌细胞细胞凋亡线粒体转录因子
- microRNA-29b在血管紧张素Ⅱ诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的:研究microRNA-29b(miR-29b)在血管紧张素Ⅱ诱导肾小管上皮细胞间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的角色。方法:实时定量PCR检测自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肾脏皮质组织miR-29b表达的差异。体外培养NRK-52E大鼠肾小管上皮细胞,给予血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)10-7mol/L(为Ang Ⅱ组),以正常培养的细胞作空白对照,实时定量PCR检测Ang Ⅱ组和正常对照组细胞miR-29b表达差异,运用WesternBolt技术和实时定量PCR技术分别检测Ang Ⅱ组和空白对照组TGF-β、α肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原蛋白(Col Ⅰ)的表达量。进一步分别再转染miR-29b inhibitor和miR-29b mimics,建立miR-29b低表达和高表达细胞模型。低表达模型实验分三组:①空白对照组:正常培养的肾小管上皮细胞未经任何处理;②低表达组:转染miR-29b inhibitor;③阴性对照组:转染随机合成NC microRNA片段。高表达模型实验分三组:①空白对照组:肾小管上皮细胞给予Ang Ⅱ(10-7mol/L)诱导;②高表达组:肾小管上皮细胞给予Ang Ⅱ(10-7mol/L)诱导,同时转染miR-29b mimcs;③阴性对照组:肾小管上皮细胞给予Ang Ⅱ(10-7mol/L)诱导,同时转染随机合成NC microRNA片段。用流式细胞仪技术检测转染率,用实时定量PCR检测转染效果,运用Western Bolt技术和实时定量PCR技术分别检测各组中TGF-β、α-SMA和Col Ⅰ的表达量。结果:实时定量PCR检测SHR大鼠肾脏皮质组织miR-29b的表达(0.76±0.01)相比WKY大鼠(1.00±0.00)下降(P<0.05),相比空白对照组(1.00±0.00),Ang Ⅱ组miR-29b的表达(0.56±0.06)明显下降(P<0.05),TGF-β、α-SMA、Col Ⅰ的mRNA表达和蛋白表达明显升高(P<0.05)。流式细胞仪技术检测NRK-52E细胞转染率为95.14%,相比空白对照组(1.00±0.00),低表达组miR-29b表达(0.07±0.02)明显下降,高表达组miR-29b表达(38.3±8.1)明显升高(P<0.05)。在低表达模型实验中,低表达组α-SMA、TGF
- 潘嘉林黄晓燕邵驾宇王本极林素王良国戴晓春杨德业
- 关键词：自发性高血压大鼠肾小管上皮细胞
- 永久左束支起搏心脏再同步治疗在左束支阻滞患者远期疗效的初步研究被引量：37
- 2019年
- 目的评价左束支起搏(LBBP)在左束支传导阻滞(LBBB)患者中应用的可行性、安全性、同步及心功能改善。方法收集2014年4月至2017年8月在温州医科大学附属第一医院心内科植入永久性LBBP,且随访时间超过2年的LBBB患者。讨论植入方法的可行性,分析与评估左束支夺获的电学特性及临床疗效,主要指标为QRS时限、阈值、感知、心功能,超声心动图结果及导线相关并发症。结果共入选成功植入永久LBBP 11例,平均年龄(71.0±12.4)岁,年龄范围41~91岁。自身QRS时限为(164.6±15.7)ms,起搏QRS时限为(113.1±17.1)ms。随访(32.5±12.1)个月。急性期阈值为(0.65±0.21)V/0.5 ms,感知为(8.3±1.7)mV,在随访2年时,阈值及感知保持稳定,分别为(0.70±0.16)V/0.5 ms,(9.1±2.7)mV。其中7例左心室射血分数(LVEF)<50%,LVEF从基线的34.0%±8.2%提升到末次随访的63.4%±9.8%,左心室收缩末期容积从(127.6±65.3)ml缩小至(37.2±13.9)ml,心功能(NYHA分级)从(3.3±0.7)级恢复至(1.3±0.5)级(P<0.05)。术后未观察到导线脱位、失夺获、阈值增高及心力衰竭再住院、死亡等不良事件。结论永久LBBP纠正LBBB,实现左心室再同步,其远期阈值稳定、感知良好、安全可靠,显著改善患者心功能,可作为双心室起搏或希氏束起搏的补充与替代。
- 吴圣杰苏蓝项文豪郑茹洁蔡蒙醒徐蕾方英王良国黄伟剑
- 关键词：希氏束心脏再同步治疗束支传导阻滞
- 左束支起搏在房室传导阻滞伴射血分数降低患者中的初步应用被引量：2
- 2022年
- 目的比较左束支起搏(LBBP)与右心室起搏(RVP)在房室传导阻滞伴射血分数降低患者的起搏参数、安全性及心脏结构与功能改善。方法收集2018年3月至2021年3月期间在温州医科大学附属第一医院心内科诊断为房室传导阻滞伴左心室射血分数(LVEF)降低(<50%),且初次尝试LBBP或原RVP升级LBBP患者;回顾入选我院同时期具有相同入排标准及植入适应证且初次行RVP植入患者。比较两组基线及随访1年时起搏阈值、感知、QRS时限变化、LVEF、左心室舒张末期内径(LVEDD)。结果共入选62例患者,其中LBBP组34例,年龄(69.1±16.5)岁,其中男25例;RVP组28例,年龄(70.3±16.1)岁,其中男21例。LBBP组自身及起搏QRS时限分别为(132.1±35.6)ms和(109±21.5)ms,左束支夺获阈值(0.61±0.37)V/0.5 ms,感知(9.2±6.4)mV;RVP组自身及起搏QRS时限分别为(136.3±26.6)ms,(167.9±21.1)ms,阈值(0.73±0.34)V/0.5 ms,感知(10.4±2.8)mV。LBBP组随访1年时,LVEF增幅为8.3%,LVEDD减少幅度为3.9 mm;RVP组平均LVEF增幅为2.8%(P=0.024),但LVEDD反而增大1.9 mm。LBBP组LVEF增高≥10%比例高于RVP组(41.2%对25.0%,P=0.180),未见LVEF下降超过10%患者,而RVP组中17.9%(5/28)的患者LVEF下降超过10%。结论在房室传导阻滞伴LVEF下降患者,LBBP阈值低、感知良好,参数与RVP相似,有明显的心功能及心室重构获益。
- 吴圣杰王松洁尚文轩王良国连莉优何燕磊徐蕾苏蓝黄伟剑
- 关键词：心力衰竭右心室起搏房室传导阻滞
- FGF6基因高表达对鼠心肌细胞凋亡和增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)基因cDNA的读码框(CDS),构建携带FGF6基因的重组真核表达载体,并将重组质粒转染至心肌细胞系H9C2细胞中进行表达,测定转染后FGF6基因对心肌细胞增殖及凋亡的影响。方法:从小鼠心脏组织提取总RNA,通过逆转录得到总cDNA,PCR法扩增,产物连接pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再以PCR方法扩增,将其连接入真核表达质粒PIRES2-DsRed2。以PCR、双酶切和测序鉴定正确后,将重组载体PIRES2-DsRed2-FGF6用脂质体包裹转染大鼠心肌细胞(H9C2),分组:空白对照(BC)组、转染空质粒(NC)组、转染重组FGF6-PIRES2-DsRed2质粒(P-FGF6)组,RT-PCR法检测转染后FGF6 mRNA表达水平,荧光显微镜观察转染效率。Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测转染后细胞的增殖能力;以血清饥饿诱导心肌细胞凋亡,同时进行FGF6质粒转染,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Western blot方法检测活化半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达。结果:成功克隆了小鼠FGF6基因cDNA,重组真核表达载体PIRES2-DsRed2-FGF6构建成功,且证实转染后大鼠心肌细胞的FGF6mRNA表达明显高于BC组(P<0.05)及NC组(P<0.05),转染FGF6基因能提高心肌细胞的增殖能力(P<0.05),FGF6基因能明显抑制血清饥饿引起的细胞凋亡(P<0.05),同时下调活化caspase-3表达(P<0.05)。结论:成功克隆了FGF6基因,并构建了真核表达载体PIRES2-DsRed2-FGF6,重组FGF6真核表达载体能够在H9C2细胞中获得有效过表达,并证实FGF6基因可促进心肌细胞的增殖及保护心肌细胞的凋亡。
- 林素黄晓燕王本极潘嘉林王良国杨德业
- 关键词：真核表达载体基因肌细胞心脏
- 不同剂量瑞舒伐他汀对不稳定型心绞痛患者炎症因子、内皮功能及内脂素的影响研究被引量：20
- 2016年
- 目的探讨不同剂量瑞舒伐他汀对不稳定型心绞痛患者炎症因子、内皮功能及内脂素的影响及安全性。方法选择2011年2月—2015年5月温州医科大学附属第一医院收治的不稳定型心绞痛患者120例,按随机数字表法分为观察组和对照组,各60例。患者常规治疗,对照组口服瑞舒伐他汀10 mg/次,观察组口服瑞舒伐他汀20 mg/次,治疗疗程均为12个月。观察2组患者低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、内脂素(Visfatin)、肿瘤细胞坏死因子(TNF-α)、血管性假血友病因子(v WF)、血浆内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)表达水平,测定2组患者内皮功能。观察2组患者治疗期间心血管不良事件发生率,用药后不良反应。结果治疗后,2组患者血清中HIF-1α、Visfatin、TNF-α、hs-CRP、血清中v WF、ET-1的表达水平与治疗前相比均明显下降,且观察组下降程度均优于对照组,而2组患者血清中NO的表达水平与治疗前相比明显升高,且观察组升高程度优于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,两组患者础动脉内径值,充气后动脉内径值以及FMD与治疗前测量相比均明显增高,且观察组增高程度优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组心血管不良事件总发生率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组肝功能异常发生率与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论大剂量瑞舒伐他汀用于不稳定性心绞痛患者的综合临床疗效较好,在提高患者远期疗效方面较常规剂量明显,但不良反应发生率与使用剂量相关,因此临床应权衡使用。
- 王良国高瞻夏雪朱千里胡龙陈方慧
- 关键词：瑞舒伐他汀不稳定心绞痛内皮功能炎性因子
- NR4A1基因的克隆及真核表达载体的构建
- <正>目的克隆小鼠孤儿核受体(NR4A1)基因全长cDNA的读码框,构建携带NR4A1基因的重组真核表达载体,为研究其在心肌细胞中的功能作准备。方法从pax-8敲除的小鼠心肌组织提取总RNA,通过逆转录得到总cDNA,利...
- 杨德业王良国黄晓燕林素潘加林戴晓春吴漪浩
- 关键词：心肌细胞孤儿核受体基因克隆真核表达载体
- 文献传递
- NR4A1基因的克隆及真核表达载体的构建
- 2013年
- 目的 :克隆小鼠孤儿核受体(NR4A1)基因全长cDNA的读码框,构建携带NR4A1基因的重组真核表达载体,为研究其在心肌细胞中的功能做准备。方法:从Pax-8敲除的小鼠心肌组织中提取总RNA,通过逆转录得到总cDNA,利用逆转录PCR法扩增,将目的产物与pGEM-T Easy载体连接,测序分析正确后,再以相同PCR方法扩增,将其与真核表达载体pIERS2-ZsGreen1连接,构建重组质粒。经限制性酶切及测序鉴定后,利用Lipofectamine2000将重组载体pIERS2-ZsGreen1-NR4A1转染到H9C2心肌细胞。实验分三组:①实验组(PZ-NR4A1组):细胞转染1.2μg pIERS2-ZsGreen1-NR4A1重组载体;②阴性对照组(NC组):细胞转染1.2μg pIERS2-ZsGreen1空载体;③空白对照组(BC组):给予的常规培养液,未做其他处理。并用RT-PCR法和Western blotting法检测转染后NR4A1 mRNA和蛋白的表达。结果:成功构建了小鼠pIERS2-ZsGreen1-NR4A1真核表达载体。转染重组载体到细胞后,相比BC组(1.00±0.00)和NC组(0.99±0.16),PZ-NR4A1组(2.62±0.21)NR4A1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),而BC组和NC组mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。PZ-NR4A1组(0.72±0.11)NR4A1蛋白的表达量与BC组(0.17±0.07)和NC组(0.21±0.08)相比,PZ-NR4A1组蛋白表达量明显升高(P<0.05),而BC组和NC组蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过基因重组技术,成功克隆了NR4A1基因,并构建了真核表达载体pIERS2-ZsGreen1-NR4A1,且能够在H9C2心肌细胞中获得有效过表达,这为进一步探讨NR4A1基因的生物学功能及机制奠定了基础。
- 王良国黄晓燕林素潘嘉林戴晓春王本极吴漪浩杨德业
- 关键词：真核表达载体心肌细胞基因克隆
- NR4A1基因的克隆及真核表达载体的构建
- 目的:克隆小鼠孤儿核受体(NR4A1)基因全长cDNA的读码框，构建携带NR4A1基因的重组真核表达载体，为研究其在心肌细胞中的功能做准备。
方法:从Pax-8敲除的小鼠心肌组织提取总RNA，通过逆转录得到总cDN...
- 王良国
- 关键词：真核表达载体心肌细胞基因克隆生物学功能
