王亚芳 作品数:7 被引量:11 H指数:2 供职机构: 大连工业大学生物工程学院 更多>> 发文基金: “重大新药创制”科技重大专项 辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划 大连市科技计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 生物学 更多>>
一种新型黄原胶裂解酶的异源表达及酶学性质表征 被引量:2 2017年 黄原胶裂解酶是一种黄原胶修饰酶,对黄原胶的改性及新型黄原胶寡糖的制备具有十分重要的意义。本实验从一株性能优良的黄原胶降解菌Microbacterium sp.XT11中首次克隆出黄原胶降解酶编码基因xly。该基因编码理论分子量为122027 u的蛋白质,其N端含有一条35 aa的分泌信号肽,C端含有一段392 aa的碳水化合物结合域CBM。随后,在去除分泌信号肽及CBM的截短酶的N端融合了谷胱甘肽巯基转移酶亲和纯化标签(GST),所形成的融合蛋白XLY-GST能够在大肠杆菌BL21(DE3)中高水平可溶表达。纯化的XLY-GST表现出与天然黄原胶裂解酶一致的酶学性质,其最适作用温度为40℃,最适p H为6.0,对碱性环境具有一定的耐受力(最高耐受p H10.5)。Ca2+和Mn2+对该裂解酶有显著地激活作用,而Cu2+则对该酶有一定的抑制作用。XLY-GST对黄原胶侧链的乙酰基和丙酮酸基团修饰程度表现出较高的特异性。本实验所取得的研究结果对黄原胶裂解酶的制备及黄原胶侧链修饰的研究奠定了基础。 杜元元 郭小宇 李鹤 王亚芳 杨帆 李宪臻关键词:酶学性质 一种虫草皂及其制备方法 本发明公开了一种虫草皂及其制备方法,属于生物化工领域,本发明将虫草菌接种于液体培养基中,在摇瓶机中培养6~20天,培养结束后将菌液进行匀浆处理,经离心获得虫草培养液,将虫草培养液与皂基融合修饰,与椰子油、橄榄油、棕榈油、... 周广麒 金美芳 王亚芳 王雪 赵文良 任彩侠 阎瑞 刘嘉璐 田晶 李佥文献传递 圆红冬孢酵母类胡萝卜素代谢流的阻遏及走向 2019年 以野生型的圆红冬孢酵母为出发菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)进行诱变,筛选获得4株类胡萝卜素缺陷型圆红冬孢酵母突变株。对圆红冬孢酵母的野生型及类胡萝卜素缺陷型菌株进行发酵,并对其生物量、类胡萝卜素含量、油脂含量、脂肪酸组成及有机酸含量进行测定。结果表明,利用ARTP技术能够有效实现对类胡萝卜素代谢流的阻遏,突变株类胡萝卜素质量浓度较野生型菌株降低了70%。碳流代谢走向分析结果表明,类胡萝卜素代谢途径的阻断并未导致油脂合成途径的加强,反而造成圆红冬孢酵母生物量和油脂合成能力的分别下降48%和40%,对胞内脂肪酸组成也有较为显著的影响,其中突变株W-4所产硬脂酸、亚油酸及油酸质量分数较野生型菌株分别下降了60%、42%和77%。类胡萝卜素合成途径阻断后,碳流主要指向有机酸合成,其中乙醛酸、乳酸、苹果酸及琥珀酸变化较为显著。类胡萝卜素缺陷型突变株中大量积累的类胡萝卜素合成前体主要流入了有机酸合成途径中。 王亚芳 刘妍 李宪臻 杨帆关键词:类胡萝卜素 代谢流 从三七茎叶皂苷中分离纯化人参皂苷C-Mx1和Rb3 被引量:7 2017年 利用两步硅胶柱层析法,从三七茎叶皂苷中分离纯化人参皂苷Rb3和C-Mx1单体。30g三七茎叶皂苷,经分离得到纯度为50%~60%的粗品C-Mx1 4.66g和Rb3 8.58g;将C-Mx1和Rb3粗品皂苷进行二次硅胶柱分离,得到纯度为95%的C-Mx1单体0.92g和Rb3单体3.1g。以核磁共振法证明了分离产物为C-Mx1和Rb3皂苷。 陈双 刘春莹 王亚芳 鱼红闪 金凤燮关键词:人参皂苷RB3 三七茎叶皂苷 纤维素水合蛋白作用机理的探究 纤维素作为一种重要的生产生物乙醇的来源物质,由于结构复杂而很难被微生物直接利用。近年来,纤维素的生物降解研究还处于起步阶段,但对于降解过程的机理已经有学者做出各种推测。其中,C1-Cx理论得到学术界的普遍认可。该理论认为... 王亚芳关键词:纤维素 结晶度 文献传递 高产虫草素Cordyceps militaris菌的诱变育种 被引量:2 2015年 以一株生长性状优良的Cordyceps militaris FFCC5111为出发菌株,通过复合诱变,筛选高产Cordycepin双重营养缺陷型(Xan-+Gua-)菌株。采用200 W、22kHz超声强度联合1%DES复合诱变,获得双重营养缺陷型突变株7株,经抗菌试验、摇瓶培养/发酵复筛至第16天,突变株C.militaris FFCC5111-c产生的Cordycepin总量为4.142g/L,比亲株提高44.5%。试验证明,筛选Xanthine和Guanine双重营养缺陷型突变株是获得Cordycepin高产菌种的有效方法,Cordycepin的生物合成与Guanine代谢相关。 曹照平 周广麒 杨吉祥 武博 金美芳 王亚芳关键词:蛹虫草 虫草素 营养缺陷型 复合诱变 液体发酵 一种虫草皂及其制备方法 本发明公开了一种虫草皂及其制备方法,属于生物化工领域,本发明将虫草菌接种于液体培养基中,在摇瓶机中培养6~20天,培养结束后将菌液进行匀浆处理,经离心获得虫草培养液,将虫草培养液与皂基融合修饰,与椰子油、橄榄油、棕榈油、... 周广麒 金美芳 王亚芳 王雪 赵文良 任彩侠 阎瑞 刘嘉璐 田晶 李佥文献传递