李琴山
- 作品数：39 被引量：131H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金贵州省科技计划项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 腺相关病毒载体介导siRNA抑制HBV表达和复制的研究
- 2013年
- 目的构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用。方法将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelper质粒共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装。收获并纯化病毒,感染模型细胞HepG2.215,采用ELISA法和荧光定量PCR法检测包装的rAAV-shRNA-GFP病毒抑制HBV情况。结果经酶切及测序证实,rAAV载体质粒pAAV-shRNA-GFP构建成功,包装的rAAV-shRNA-GFP病毒感染HepG2.215细胞后,可以抑制HBsAg、HBeAg的表达和HBV的复制。结论成功制备出rAAV-shRNA-GFP病毒,其能够抑制HBV的表达和复制。
- 李琴山田硕
- 关键词：RNA干扰基因疗法
- 单核细胞趋化蛋白-1诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡被引量：5
- 2007年
- 目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(hUVEC)凋亡的影响.方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度MCP-1(0.1,1.0,10,100μg/L)对其作用24,48h;Annexin V/PI双染细胞,流式细胞仪观察内皮细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测细胞染色体“DNA ladder”的形成.结果:MCP-1能诱导hUVEC的凋亡,其效应随浓度和时间的增加而增强(P<0.01);Annexin V/PI显示凋亡细胞明显增加;细胞DNA呈明显的“DNA ladder”.结论:MCP-1能诱导hUVEC凋亡.
- 李琴山刘洋冯赞杰钱民章
- 关键词：脐静脉内皮细胞
- 黔产艾纳香黄酮抗氧自由基的研究被引量：7
- 2013年
- [目的]研究黔产艾纳香黄酮对氧自由基的清除能力。[方法]以黔产艾纳香为研究对象,提取其黄酮;采用邻二氨菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系产生羟自由基(·OH),用联苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-·),并采用分光光度法测定黔产艾纳香黄酮对O2-·和·OH的清除作用。[结果]高剂量组的黔产艾纳香黄酮对O2-·具有明显的清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用,清除率为(19.82%±0.17%)。[结论]黔产艾纳香黄酮对O2-·具有明显清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用。
- 李琴山刘洋
- 关键词：艾纳香分光光度法超氧阴离子自由基
- 贵州产天冬水提液对氧自由基的作用被引量：3
- 2011年
- [目的]研究贵州产天冬水提液的氧自由基清除能力。[方法]以贵州产天冬为研究对象,提取其水提液;采用连苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-),采用邻二氮菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系产生羟自由基(·OH),用分光光度法测定天冬水提液对O2-和·OH的作用。[结果]高剂量组天冬水提液对O2-具有显著的清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用,清除率为(22.80%±0.13%)。[结论]贵州产天冬水提液对O2-具有显著的清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用。
- 李艳菊李琴山刘洋
- 关键词：分光光度法超氧阴离子自由基
- 天门冬对慢性辐射损伤大鼠肝脏保护作用
- 2011年
- 天门冬（Riadix asparag）为百合科植物天门冬的块根,具有养阴润燥,清肺生津作用。近年来,国内外研究发现天门冬具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤与抗菌作用,但对其抗辐射的研究报道较少。本实验通过建立慢性辐射损伤大鼠模型,观察天门冬水煎剂对辐射损伤肝脏中血清酶、蛋白合成能力及转化生在因子β1（transforming growth factor-beta 1）mRNA表达影响,探讨天门冬水煎剂对慢性辐射损伤肝脏的保护作用及可能机制。
- 李琴山李艳菊刘洋
- 关键词：肝脏转化生长因子Β1
- 单核细胞趋化蛋白-1对人脐静脉内皮细胞生长的影响及金雀异黄素的干预作用
- 目的：研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(hUVECs)生长的影响、可能机制及金雀异黄素的干预作用。
方法：1.培养并鉴定人脐静脉内皮细胞。2.用不同浓度单核细胞趋化蛋白-1(0.1ng/...
- 李琴山
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1金雀异黄素BAX蛋白FAS蛋白BCL-2蛋白表达
- 文献传递
- 单核细胞趋化蛋白-1诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的分子机制(英文)被引量：4
- 2010年
- 本研究旨在探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotacitic protein-1,MCP-1)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,hUVECs)凋亡的分子机制。胶原酶消化收集hUVECs,体外培养细胞,用胰蛋白酶-EDTA混合液消化传代,用血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和VEGF受体2(KDR)免疫染色证实培养细胞为内皮细胞;用不同浓度MCP-1(0.1、1.0、10、100ng/mL)分别作用hUVECs24h、48h;用流式细胞术及蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2、Bax的表达。如我们前期结果所示,MCP-1能诱导hUVECs的凋亡,其效应随浓度和时间的增加而增强;与对照组比较,MCP-1下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Fas、Bax的表达。以上结果表明,MCP-1能诱导hUVECs凋亡,其作用机制可能与上调Bax、Fas蛋白及下调Bcl-2蛋白表达有关。
- 李琴山刘洋冯赞杰卢志顺钱民章
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1人脐静脉内皮细胞BAX蛋白FAS蛋白BCL-2蛋白凋亡
- 建立皮下注射d-半乳糖大鼠白内障动物模型被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨建立皮下注射d 半乳糖大鼠白内障模型的方法。方法 3w龄Wistar大鼠 5 0只 ,随机分为 3组 :正常对照组 (n =10 )、皮下注射半乳糖组 (n =2 0 )及腹腔注射半乳糖组 (n =2 0 ) ,实验组均注射 5 0 %d -半乳糖(15g·kg-1·d-1) ,连续 30d。用裂隙灯检查并进行晶体摄影。结果 30d后 ,实验组动物均形成核性或核性以上的白内障 ,但皮下注射组动物的存活率为 90 % ,而腹腔注射组存活率仅为 6 0 %。结论 皮下注射d 半乳糖是一种简单、经济而死亡率低的白内障模型复制方法。
- 陆红玲余晓李琴山李小琼曾小平谢兵
- 关键词：皮下注射动物模型D-半乳糖白内障
- 串联亲和纯化技术筛选Bat3的相互作用蛋白质被引量：1
- 2014年
- 目的寻找与Bat3结合的蛋白质。方法采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可与Bat3相互结合。结论成功建立了串联亲和纯化技术平台,分离出可与Bat3相互作用的蛋白质Ubl4A。
- 吴为李琴山宋伟缪时英王琳芳
- 关键词：凋亡串联亲和纯化
- 一种改进的人骨髓间充质干细胞培养方法
- 2010年
- 目的提高体外培养人骨髓间充质干细胞(HMSCs)的获得率和扩增率。方法在无菌条件下采用骨髓穿刺术提取健康人骨髓2～3ml加入含10%胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,按2×106/cm2密度接种于培养瓶中,置于培养箱中培养。第3天半量换液,第6天用PBS冲洗三遍后全量换液,待细胞生长至80%～90%融合时,消化传代;倒置显微镜进行细胞形态学观察;MTT法测定细胞P1和P5生长曲线;应用流式细胞仪检测细胞表面CD34和CD29抗原的表达进行细胞鉴定。结果分离HMCs大小较为均匀,基本上呈梭形或星形;细胞生长曲线测定表明接种后第3天细胞进入指数增生期,至第5天进入平台期,随着传代次数的增加,细胞增殖速度变慢;经流式细胞仪检测显示CD34阴性、CD29阳性。结论本实验采用贴壁法培养的骨髓细胞为HMSCs,本培养体系能有效地提高HMSCs的获得率和扩增率。
- 李琴山刘洋
- 关键词：骨髓间质干细胞细胞培养
