徐良
- 作品数：13 被引量：7H指数：2
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 14-3-3 h1蛋白在TMV侵染烟草叶片中的应用
- 本发明提出了烟草14‑3‑3 h1蛋白的编码基因14‑3‑3 h1在防御TMV侵染烟草中应用，14‑3‑3 h1基因序列为SEQ ID NO.1；烟草14‑3‑3 h1蛋白通过抑制Arf蛋白促进囊泡转运功能抑制TMV在细...
- 王静郝风声徐良宋佳倩宋坤锋郭红祥石永春王潇然刘卫群
- 文献传递
- 重组Exendin-4工程菌表达体系优化被引量：1
- 2013年
- 为了提高大肠杆菌中重组Exendin-4的表达量,给中试奠定基础,利用单因素试验和正交试验研究了培养基、接种量、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度、诱导时长以及MgSO4浓度等对重组大肠杆菌生长和融合蛋白表达的影响。结果表明最佳培养基为2×YT,最佳接种量为3%,于细菌对数生长期中后期(OD600约1.5)开始诱导,诱导温度为34℃、乳糖浓度为0.1g/L,于诱导9h后重组Exendin-4表达量最大。
- 杨光王文静徐良杨好冬王小纯
- 关键词：工程菌
- 下丘脑STAT3磷酸化水平的调控及其对瘦素介导的动物能量代谢的影响
- 动物代谢性疾病属于非传染性疾病，包括营养缺乏或过度导致的营养性疾病和机体代谢过程异常的代谢性疾病。STAT3的磷酸化对下丘脑POMC途径中信号的转导是不可或缺的，许多学者也一致的认为STAT3的磷酸化水平代表了瘦素的敏感...
- 徐良
- 关键词：瘦素下丘脑磷酸化水平分子调控
- 肠激酶消化融合蛋白Trx-Exendin-4的特性被引量：4
- 2012年
- 选用Invitrogen公司开发的重组肠激酶,在不同反应条件下消化融合蛋白Trx-Exendin-4,用16%的Tricine-SDS-PAGE检测目的多肽Exendin-4与其他切割产物的量.结果表明:温度对肠激酶消化融合蛋白Trx-Exendin-4的影响很大,37℃时酶活力高,以非特异性切割为主;16℃时酶活力居中,特异性切割与非特异性切割共存;4℃时酶活力较低,但以特异性切割为主.获得Exendin-4的最佳消化条件是:1 U肠激酶在4℃条件下6 h消化3 mg的Trx-Exendin-4,效率最高,特异性最好.
- 徐良王文静祖向阳王小纯
- 关键词：肠激酶酶活力
- 重组Exendin-4鼻腔喷雾剂及其制备方法
- 本发明公开一种重组Exendin-4鼻腔喷雾剂及其制备方法，每100ml制剂中含：10-100mg重组Exendin-4、1mg粘膜渗透强化剂、0.01mg防腐剂、加缓冲液至100ml、所述的缓冲液组成为20mMTri-...
- 王小纯杨光徐良杨好冬
- 文献传递
- Exendin-4基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 根据GenBank中已公布的编号为AAB2200的Exendin-4氨基酸片断,及酵母密码子偏好性,设计了Exendin-4在酵母中的表达序列。利用基因工程技术,将编码Exendin-4的蛋白基因亚克隆到含有分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成分泌型重组表达栽体pPIC9K-E4。用电转化法将线性化的pPIC9K-E4转化入毕赤酵母菌株GSll5,转化子经MD平板筛选,得到的阳性菌株再用浓度梯度递增的G418筛选多拷贝重组子。将MM和MD平板筛选得到Muts菌株用甲醇诱导表达6d,每隔24h取样。Tricine-SDS-PAGE检测结果显示,诱导后第6天表达量达到最高。
- 徐良王文静邱宇航杨好冬王小纯
- 关键词：毕赤酵母EXENDIN-4真核表达
- 一步层析法从大肠杆菌中纯化Exendin-4的工艺
- 一步层析法从大肠杆菌中纯化Exendin-4的工艺，它是按下述步骤进行的：(1)菌体裂解、(2)重组Exendin-4吸附、(3)杂蛋白漂洗、(4)树脂平衡、(5)融合端切除及Exendin-4收集、(6)Exendin...
- 王小纯安帅徐良
- 文献传递
- FoxO1突变体转基因小鼠的建立被引量：1
- 2018年
- 为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制,本研究构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD,并将其转染于293Rb细胞,应用Western blotting检测突变体FoxO1ΔDBD的表达;然后采用DNA原核显微注射的方法制备含有突变体FoxO1ΔDBD的转基因小鼠模型,以鼠尾基因组DNA为模板,PCR扩增鉴定基因型;采用实时荧光定量PCR和免疫共沉淀方法检测FoxO1ΔDBD在转录水平和翻译水平的表达,并对FoxO1ΔDBD转基因鼠进行表型分析。结果显示,试验成功构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD,并在293Rb细胞中检测到了突变体FoxO1ΔDBD的表达,继而获得了10只首建鼠,建立了10个繁育系。试验建立了高G-C含量PCR扩增产物的基因型鉴定方法,并成功地应用于转基因小鼠中。实时荧光定量PCR和免疫共沉淀结果显示,在转录水平和翻译水平上成功地检测出FoxO1ΔDBD的表达,表型分析结果显示,转基因小鼠体重显著低于野生型小鼠(P<0.05),提示瘦素的作用增强。综上所述,本试验成功构建了FoxO1ΔDBD转基因小鼠,为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制提供研究模型。
- 周国丽李浩路万平徐良杨冉杨国庆
- 关键词：转基因小鼠基因型鉴定瘦素
- NtLRR-RLK基因在TMV侵染烟草中的应用
- 本发明提出了烟草NtLRR‑RLK基因通过增加防御相关蛋白的表达，在防御TMV侵染烟草中应用，NtLRR‑RLK基因序列为SEQ ID NO.1。本发明深入理解TMV侵染寄主免疫的分子基础，有利于对TMV的防治和抗TMV...
- 王静郝风声徐良宋佳倩宋坤锋郭红祥石永春王潇然刘卫群
- 文献传递
- 重组Exendin-4鼻腔喷雾剂及其制备方法
- 本发明公开一种重组Exendin-4鼻腔喷雾剂及其制备方法，每100ml制剂中含：10-100mg重组Exendin-4、1mg粘膜渗透强化剂、0.01mg防腐剂、加缓冲液至100？ml、所述的缓冲液组成为20mM？Tr...
- 王小纯杨光徐良杨好冬
- 文献传递
