肖娟
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
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- Wistar大鼠卵巢颗粒细胞的分离、培养与鉴定被引量：7
- 2012年
- 目的探讨Wistar大鼠卵巢颗粒细胞的分离、培养与鉴定的方法。方法选用21～29天龄wistar大鼠,皮下注射PMSG,取出卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,于CO2培养箱中培养。用HE染色和免疫细胞化学法观察FSHR蛋白表达的方法来对卵巢颗粒细胞进行鉴定,并用MTT法测定细胞生长曲线,同时检测E2、P的分泌情况。结果分离培养出的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞存活率>90%,细胞纯度达到90%以上;体外培养的颗粒细胞对数生长期为48～96小时;HE染色在镜下可见贴壁细胞形态完整,细胞浆和细胞核染色均匀,核染深蓝色,位于细胞中央,胞浆淡红色并含有许多颗粒;激素的分泌趋势与细胞的生长情况基本一致,于在96～120小时左右达到峰值,随后逐渐下降。结论采用机械分离法分离培养的卵巢颗粒细胞纯度高、活性好,用FSHR表达染色鉴定颗粒细胞是一种简便快速的方法。
- 肖娟邬静屠迪袁慧文利新李荣芳
- 关键词：卵巢颗粒细胞
- T-2毒素对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响
- 2013年
- 将未成熟的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养,用不同浓度的T-2毒素染毒细胞24h。染毒结束后,采用MTT法检测细胞相对活力,荧光染料Hoechst 33258检测卵巢颗粒细胞的凋亡变化,RT-PCR检测凋亡调控基因Bcl-2、Bax和P53mRNA的表达。结果显示,随着T-2毒素染毒剂量的增加,颗粒细胞的细胞活力逐渐下降;而细胞凋亡率、Bcl-2、Bax、P53mRNA表达水平、Bax mRNA/Bcl-2mRNA比值则逐渐上升;除1nmol/L剂量组外,其余各剂量组与对照组比较差异显著(P<0.05)。结果表明,T-2毒素可显著抑制大鼠卵巢颗粒细胞活力,诱导颗粒细胞凋亡,并呈浓度依赖关系。
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- 关键词：T-2毒素卵巢颗粒细胞细胞活力细胞凋亡
