王新
- 作品数：16 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生天文地球生物学更多>>
- 水貂出血性肠炎的诊治
- 2009年
- 刘贺何剑斌王新杨志勇陈晨
- 关键词：出血性肠炎水貂诊治发病情况水样粪便成年
- 牛结核杆菌诊断模型的建立被引量：1
- 2008年
- 姚鹏杰刘欣陈永生任晓东李欣曹阳刘冬梅吴洪涛王新
- 关键词：养牛业结核杆菌人畜共患传染病牛结核病畜牧业生产野生动物
- 人tau蛋白外显子2和外显子3特异性抗体的制备
- 2009年
- 目的制备人微管相关蛋白tauN端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体。方法从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T，表达纯化重组融合蛋白GST—E2、GST-E3；以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清，通过ProteinG／A、偶联GST蛋白的溴化氰（CNBr）活化柱对抗血清进行亲和纯化；用WesternBlot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性。结果在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3，相对分子质量为29×10^3。免疫实验动物后获得抗血清，经系列纯化后WesternBlot和ELISA检测显示，制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价。结论成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体，为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础。
- 陈操王桂荣石琦张宝云梅国勇李媛王新周瑞敏韩俊赵玉军董小平
- 关键词：蛋白质类外显子抗体病毒朊病毒病
- 定位表达于溶酶体、泛素的PrP载体的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建定位于溶酶体、泛素的PrP表达载体，并进行蛋白表达特点及定位的鉴定。方法将泛素基因、溶酶体膜定位信号序列基因和PrP基因连接，克隆至pcDNA3．1载体中，构建表达载体pcDNA3．1-UPrP,pcDNA3．1-PrPL；瞬时转染真核表达细胞，经Western Blot和间接免疫荧光技术检测PrP表达特点。结果构建的各种PrP定位表达载体均可定位表达具有三种类型的糖基化分子的PrP，以双糖基化分子类型最多。带有泛素、溶酶体信号的质粒pcDNA3．1-UPrP、pcDNA3．1-PrPL的PrP表达随着时间的延长蛋白表达量下降，提示泛素、溶酶体信号能加速表达PrP在细胞内的降解。结论成功构建了溶酶体、泛素定位表达的PRNP核酸疫苗载体pcDNA3．1-uPrP、pcDNA3．1-PrPL，为PRNP核酸疫苗的研究奠定了一定的基础。
- 李媛梅国勇姜慧英王桂荣田婵陈操王新王克霞韩俊董小平
- 关键词：朊病毒疫苗DNA
- 细胞内朊蛋白神经保护性功能
- 2008年
- 朊蛋白（PrP）是细胞内的一种正常的带有GPI锚的、由PRNP基因编码的糖基化蛋白。PrP存在于动物和人的多种组织当中，而在脑组织中的含量相对较高。对其研究的重点主要集中在被人们称之为朊蛋白疾病或海绵状脑病的神经退行性疾病上。Prion这个词最初被称做“蛋白浸染颗粒”回。不巧的是，内源性表达的PrP和与感染相关的疾病的PrP都被称做同一个名字，这是因为细胞内的PrP和感染性的朊蛋白具有完全相同的一级结构，
- 王新吴佳宁李海鹏刘贺姚鹏杰刘虹吴洪涛刘欣赵玉军
- 关键词：神经退行性疾病朊蛋白细胞内海绵状脑病PRIONPRP
- 人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用被引量：1
- 2010年
- 目的体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白——截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较。方法通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态。结果两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24 h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞AnnexinV/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低。结论瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程。
- 徐琨王新田婵石崧王桂荣石琦周瑞敏姜惠英楚雍烈董小平
- 关键词：朊蛋白细胞毒性作用细胞凋亡
- 细胞浆中PrP蛋白的表达及其细胞毒性作用的研究被引量：1
- 2008年
- 为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP的细胞毒性作用。结果显示,CytoPrP在胞浆内的存在受蛋白酶抑制剂的控制;与野生型PrP相比,CytoPrP具有相对较强的蛋白酶K(PK)抗性。MTT和细胞计数实验均显示,Cyto-PrP的存在可诱导明显的细胞毒性效应,而CytoPrP的细胞毒性作用受蛋白酶抑制剂含量的影响,呈剂量依赖关系。上述结果为研究CytoPrP在朊病毒病的发病机制中的意义提供了一定的科学数据。
- 王新董辰方石琦石崧王桂荣雷艳君安润徐琨姜慧英韩俊赵玉军董小平
- 关键词：朊病毒细胞毒作用
- 一种基于连续PMCA的PrP^Sc体外扩增方法的建立被引量：1
- 2008年
- 为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测。结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制。连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc。
- 石崧董辰方张宝云石琦王桂荣王新韩俊董小平
- 关键词：PRION病
- 牛磺酸跨膜转运的研究进展被引量：4
- 2007年
- 牛磺酸(taurine,TAU)是动物组织细胞内含量丰富的游离β-氨基酸,具有广泛的生物学效应,而牛磺酸跨膜转运是其发挥生物学效应的基础。本文综述了牛磺酸转运体(taurine transporter,TAUT)的特征、分布、影响因素等方面,阐明了牛磺酸转运体在牛磺酸跨膜转运中的重要作用。
- 刘虹刘贺王新胡建民姚鹏杰陈永生
- 关键词：牛磺酸转运
- 苏门答腊虎胸膜间皮肉瘤诊断报告被引量：1
- 2008年
- 周景博赵玉军吴长德张交尔栾承贵光海红王新刘倩林颖田宝中张波李秀霞胡玉苗
- 关键词：肉瘤腹膜病理组织学检查恶性肿瘤病理解剖学
