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食管癌Eca109单克隆细胞株的干细胞特性研究被引量：8: 2013年; 为分离及鉴定食管癌Eca109肿瘤干细胞。将购买上海生命科学研究院的食管癌Eca109细胞株采用有限稀释法进行单克隆培养并进行HE染色;应用免疫细胞化学技术检测Eca109单克隆细胞株中P75NTR、Oct-4的表达;MTT法和平板克隆实验检测细胞体外增殖情况。Transwell小室法检测各细胞株侵袭能力。结果显示,HE染色示细胞形态有圆形、核大和短梭形、核小两种;在Eca109单克隆的细胞中P75NTR强表达、Oct-4表达相对较弱,且在圆细胞株中表达定位于胞核;MTT法测增殖示圆细胞株增殖率明显高于其他细胞株,差异有统计学意义(P<0.001);平板克隆实验示圆细胞株形成克隆团数高于其他细胞株且细胞团大;Transwell法结果示各细胞株侵袭能力相当。由此可知,Eca109细胞中P75NTR、Oct-4核表达阳性的圆细胞有可能为食管癌干细胞。; 赵生霞黄燕燕慕晓玲; 关键词：食管癌肿瘤干细胞干细胞特性

多种肿瘤干细胞标志物在食管鳞癌 Eca109细胞球细胞中的表达被引量：2: 2014年; 目的观察肿瘤干细胞标志物P75NTR、Oct-4、Sox-2、Lin28、Nanog在食管鳞癌Eca109细胞系富集的细胞球细胞中的表达。探讨食管鳞癌的肿瘤干细胞标记物。方法采用无血清成球培养法,富集培养细胞球细胞,观察其增殖过程。培养5d获得小细胞球继续培养至14d获得又大又圆的悬浮生长的细胞球,收集第14天的细胞球,一部分用于实验,一部分予以传代。应用免疫荧光技术检测细胞球细胞中P75NTR、Oct-4、Sox-2、Lin28、Nanog的表达和定位。结果 P75NTR、Oct-4荧光定位于细胞球细胞的细胞核上,贴壁的Eca109为细胞核和细胞质表达,但是Oct-4荧光强度比P75NTR弱;Lin28在细胞球细胞上为细胞核表达,贴壁的Eca109上为细胞核和细胞质表达;Nanog和Sox-2在食管鳞癌Eca109细胞球细胞和贴壁的Eca109上均为细胞质表达。结论 P75NTR、Oct-4、Lin28核表达阳性的细胞球可能为食管癌干细胞。; 黄燕燕裴学莲刘洋李秋霞王玉婷慕晓玲; 关键词：P75NTR OCT-4

神经生长因子在食管鳞癌细胞中的表达及分泌被引量：4: 2015年; 目的探讨神经生长因子(NGF)与食管鳞癌细胞分化的相关性。方法采用有限稀释法分选出圆形和梭形单细胞克隆,采用无血清悬浮培养获得细胞球细胞,贴壁的Eca109细胞分别在含血清和不含血清培养基中培养48h;分别采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫印迹法,检测NGF在食管鳞癌细胞中mRNA水平和蛋白水平的表达;免疫荧光技术检测NGF在食管鳞癌细胞中的表达定位;免疫组织化学法检测食管鳞癌组织中NGF的表达定位;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NGF在Eca109细胞培养基中的分泌情况。结果在Eca109细胞中能检测到NGF的mRNA水平和蛋白水平的表达,其中NGF在细胞球细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达量最高。食管癌组织中检测到NGF表达于细胞质。Eca109细胞在无血清培养条件下能够分泌NGF,且明显高于含血清培养基中的含量。结论食管癌细胞系Eca109表达并分泌NGF,并且食管癌组织中表达NGF,NGF可能在维持食管鳞状细胞癌的干细胞特性发挥了重要作用。; 李秋霞裴学莲刘洋王玉婷黄燕燕周宗瑶慕晓玲; 关键词：食管鳞状细胞癌神经生长因子 ECA109细胞反转录-聚合酶链反应免疫印迹法

人食管鳞癌Eca109细胞株中肿瘤干细胞的分离与鉴定被引量：6: 2014年; 为分离富集人食管鳞癌Eca109细胞株中肿瘤干细胞,并对其"干细胞"特性进行鉴定。采用无血清(DMEM/F12 1∶1,无血清)成球培养法获得细胞球,应用免疫荧光细胞化学技术检测Eca109细胞株中细胞球细胞中干性相关转录因子的表达;平板克隆和MTT法检测细胞体外增殖情况;Transwell小室法检测其细胞侵袭能力。结果显示,无血清培养4 d获得Eca109细胞球;P75NTR和Oct-4荧光定位于细胞球细胞的细胞核上,Eca109细胞为细胞核和细胞浆表达,但是Oct-4荧光强度比P75NTR弱;MTT法测增殖显示细胞细胞球增殖率明显高于Eca109细胞,差异有统计学意义(P<0.001);平板克隆实验显示细胞球细胞形成克隆团数高于Eca109细胞;Transwell小室法结果显示细胞球细胞侵袭力高于Eca109细胞。由此可知,食管鳞癌Eca109细胞系通过无血清成球培养法获得细胞球,细胞球存在肿瘤干细胞。; 黄燕燕赵生霞李秋霞刘洋慕晓玲; 关键词：肿瘤干细胞 P75NTR OCT-4

人食管癌细胞系Eca109无血清培养细胞球的干细胞特性研究: 目的：富集人食管癌细胞系Eca109中的肿瘤干细胞，探讨p75NTR表达特点与Eca109肿瘤干细胞的关系。方法：食管癌细胞系Eca109细胞调整细胞密度为l×105个//ml，置于无血清培养基中培养14天获得肿...; 黄燕燕; 关键词：食管癌干细胞干细胞标记物; 文献传递

一种利用人食管鳞癌细胞球培养富集癌干细胞的方法: 本发明公开了一种利用人食管鳞癌细胞球培养富集癌干细胞的方法，运用无血清成球培养法,富集到第1代的肿瘤干细胞球样细胞,对其进行离心、接种,得到第2代直至第9代细胞球细胞。检测第1代、3代、5代、7代、9代细胞球细胞中肿瘤干...; 慕晓玲李秋实刘洋王玉婷李秋霞黄燕燕许健李步强; 文献传递

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黄燕燕