鲁絮
- 作品数：5 被引量：40H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杨陵农业生物技术育种中心专项基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟病毒p80基因丝氨酸蛋白酶功能区的原核表达及小鼠免疫试验
- 2007年
- 根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb。将p80基因中的丝氨酸蛋白酶基因克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒pET-p80。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达得到分子量约为43ku的目的蛋白,与理论大小相符。将菌体蛋白经Ni柱纯化,获得纯化重组p80蛋白,Western blot检测表明,表达的目的蛋白能与CSFV阳性血清发生反应。用纯化的p80蛋白免疫Bal b/c小鼠,成功制备了抗p80蛋白的抗血清。
- 鲁絮许信刚张彦明张淼涛李少方
- 关键词：猪瘟病毒原核表达免疫
- 猪瘟病毒石门株NS3基因在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2007年
- 采用PCR技术,扩增了猪瘟病毒石门株NS3基因的丝氨酸蛋白酶、NTPase、RNA解螺旋酶活性功能区长度为2 000 bp的片段,将其克隆到pET-32a中,构建了原核表达载体pET-NS3,并将其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行了表达,同时对表达产物进行了SDS-PAGE和Western blotting检测。结果表明,IPTG诱导表达得到的pET-NS3融合蛋白的相对分子质量约为97 ku,与预期结果一致,且该重组蛋白能被CSFV阳性血清所识别。
- 鲁絮张彦明许信刚
- 关键词：猪瘟病毒大肠杆菌
- 猪瘟病毒NS3基因的原核表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
- 为了研究NS3蛋白与CSFV致CPE的关系，探索CSFV对猪专一性致病机理，需要研制出NS3蛋白的单克隆抗体，来检测CSFV感染后NS3蛋白在发生CPE的细胞与其他不发生CPE的细胞中的表达差异以及将NS3基因转入猪细胞...
- 鲁絮
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体重组蛋白纯化骨髓瘤细胞细胞病变
- 文献传递
- 小麦线粒体DNA快速提取体系的建立被引量：22
- 2005年
- 为了建立小麦线粒体DNA(m tDNA)快速提取体系,以小麦黄化苗为材料,分别研究了材料的研磨、线粒体的抽提和m tDNA的提取及纯化过程中众因素的影响。结果表明,经高速组织匀浆捣碎机研磨小麦黄花苗,简易的密度梯度离心技术快速抽提大量的高纯度的线粒体,5%SDS和蛋白酶K裂解线粒体及有机溶剂抽提去除蛋白质可获得纯度较高的m tDNA。该方法比常规方法具有简捷、快速、经济等优点。
- 唐群姚雅琴张改生牛娜杨靖鲁絮余欣
- 关键词：小麦线粒体MTDNA
- 抗猪瘟病毒NS3(p80)蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：14
- 2008年
- 在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达猪瘟病毒石门株NS3基因部分功能片段,以纯化的重组NS3(p80)蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA筛选及3次连续克隆化获得了4株可分泌抗NS3单抗的杂交瘤细胞(2G7,2F11,5D2和6F11),通过小鼠体内诱生法制备腹水,并对杂交瘤细胞和单克隆抗体的特性进行鉴定。结果表明,杂交瘤细胞染色体正常,抗体分泌稳定,单抗效价高,亲和力各不相同,Ig亚类鉴定均为IgG1。Westernblot分析证明4株单抗均能与原核表达的NS3蛋白特异性结合,6F11株与真核表达的NS3蛋白有较强的特异性反应。
- 鲁絮张彦明郑增忍穆杨龚振华李葳徐浩余欣
- 关键词：猪瘟病毒蛋白纯化单克隆抗体
