郎斌
- 作品数：9 被引量：4H指数：1
- 供职机构：辽宁医学院畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡GABA(A)α1多肽抗体的制备与鉴定
- 2013年
- 根据GenBank中报道的鸡GABA(A)α1一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNAstar软件分析GABA(A)α1蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其他因素,设计出一段16个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联,用与BSA偶联的GABA(A)α1多肽免疫新西兰兔,3个月后获取血清,亲和纯化GABA(A)α1多肽抗体。通过ELISA法检测抗体效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。通过该方法得到了高效价与高特异性的鸡GABA(A)α1多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的鸡GABA(A)α1抗体具有高特异、高效价等特点,将为鸡GABA(A)α1基因的功能研究提供有用的研究材料。
- 郎斌朱弘焱王佳美苏玉虹田玉民
- 关键词：多肽抗体特异性
- 猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化研究
- 2015年
- 运用生物信息学方法对猪CFL2基因启动子区CpG岛进行预测,并采用甲基化特异性PCR （MSP）和重亚硫酸盐测序（BSP）分析猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化状态.生物信息学研究发现,猪CFL2基因启动子区存在CpG岛,并且在启动子区的995 ～2 045 bp区域的GC分布密集.通过BSP法证明了长白猪CFL2基因启动子区CpG岛出现甲基化,MSP法出现部分甲基化,提示只有1条链被甲基化,为猪CFL2基因在肌肉组织中的表达可能受甲基化调节提供了理论基础。
- 解放王佳美朱弘焱郎斌丛玲毕雪苏玉虹
- 关键词：CPG岛甲基化MSPBSP
- 鸡刺鼠相关蛋白多肽抗体的制备与鉴定
- 2014年
- 制备鸡刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)多肽抗体并鉴定。根据GenBank中报道的AgRP一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNA Star软件分析其蛋白跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性等,设计出1段13个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联,用与BSA偶联的AgRP多肽免疫新西兰大白兔,获取血清后亲和纯化出抗AgRP多肽抗体。通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。结果获得了高效价的鸡AgRP多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,并可用于免疫组化研究。
- 毕雪郎斌王佳美朱弘焱解放苏玉虹田玉民
- 关键词：多肽抗体
- 猪CFL2基因荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析
- 2013年
- 为了进一步深入研究猪CFL2基因转录调控机制,通过PCR方法,从猪基因组DNA中获得CFL2基因起始密码子上游12段逐步缺失的CFL2启动子序列,分别定向克隆至含有荧光素酶报告基因的pGL4.10载体上。构建了12种荧光素酶报告基因载体:pGL4.10-222、pGL4.10-383、pGL4.10-482、pGL4.10-666、pGL4.10-912、pGL4.10-1021、pGL4.10-1093、pGL4.10-1305、pGL4.10-1369、pGL4.10-1554、pGL4.10-1680、pGL4.10-1826。以pGL4.74为内参质粒,分别瞬时转染小鼠成肌细胞C2C12、小鼠成纤维细胞NIH3T3、人宫颈癌细胞HeLa,48 h后采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性。结果表明:pGL4.10-1554(-1 502^+51 bp)的转录活性最强,初步证实-1 502^-1 317 bp区域为CFL2启动子的活性区域,从而为进一步研究CFL2的转录调控奠定了基础。
- 王佳美郎斌朱弘焱苏玉虹
- 关键词：启动子
- 鸡刺鼠相关蛋白多肽抗体的制备与鉴定
- 鸡刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)多肽抗体并鉴定,根据GenBank中报道的AgRP一级结构信息,用TMHMM2.0和DNA star软件分析其蛋白跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水...
- 毕雪郎斌王佳美朱弘焱解放苏玉虹田玉民
- 关键词：多肽抗体特异性鉴定
- 猪CFL2基因启动子的克隆与序列分析被引量：3
- 2013年
- CFL是真核生物肌动蛋白结合蛋白家族的成员。CFL2主要在哺乳动物的骨骼肌和心肌表达,在肌肉纤维的形成过程及肌肉的再生起重要作用。为了深入研究猪CFL2基因转录的调控机制,本研究利用染色体步移法首次获得了CFL2基因起始密码子上游约2.5 kb区域的序列。应用相关生物信息学软件对该序列进行分析,预测了其启动子核心区域及转录起始点,发现在起始密码子上游-508 bp和-453 bp两处存在TATA-box,另外还发现了GC-box、CAAT-box;该序列还包含SP1、AP1、AP2、GATA-1等转录因子结合位点。本试验结果为进一步研究该基因表达调控与肌肉发育的关系奠定了基础。
- 王佳美赵微郎斌朱弘焱苏玉虹
- 关键词：染色体步移启动子
- 鸡阿黑皮素原多肽抗体的制备与鉴定
- 2014年
- 根据NCBI GenBank中报道的鸡阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin,POMC)一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNA Star软件分析POMC蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其他因素,设计出1段12个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)偶联,用与BSA偶联的POMC多肽免疫新西兰兔,3个月后获取血清,亲和纯化出抗POMC多肽抗体。通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。通过该方法得到了高效价与高特异性的鸡POMC多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的鸡POMC抗体具有高特异、高效价等特点,将为鸡POMC基因的功能研究提供有用的研究材料。
- 郎斌朱弘焱王佳美田玉民苏玉虹
- 关键词：多肽抗体特异性
- 鸡黑素皮质素受体-4多肽抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 根据GenBank中报道的鸡黑素皮质素受体-4(melanocortin-4 receptor,MC4R)一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNAstar软件分析MC4R蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其他因素,设计出1段15个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联,用与BSA偶联的MC4R多肽免疫新西兰兔,3个月后获取血清,亲和纯化出抗MC4R多肽抗体。通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。通过该方法得到了高效价与高特异性的鸡MC4R多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的鸡MC4R抗体具有高特异、高效价等特点,将为鸡MC4R基因的功能研究提供物质基础。
- 郎斌朱弘焱王佳美苏玉虹田玉民
- 关键词：MC4R多肽抗体特异性
- 猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化研究
- 探究猪CFL2基因在猪肌肉组织中的甲基化情况,本实验运用生物信息学方法对猪CFL2基因启动子区CpG岛进行预测,并采用甲基化特异性PCR(MSP)和重亚硫酸盐测序(BSP)分析猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化状态....
- 解放王佳美朱弘焱郎斌丛玲毕雪苏玉虹
- 关键词：猪肌肉组织基因启动子区CPG岛甲基化状态
