张蕊
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省海洋渔业科技推广专项项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白的原核表达被引量：3
- 2013年
- 根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系。通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。结果显示,所构建的2种VP5蛋白原核表达载体,均在大肠杆菌中成功表达了分子质量大小(约80ku)与预期相符的重组蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。诱导表达后的菌体经离心、洗涤与超声破碎,离心收集包涵体。包涵体通过变性、透析与复性,获得纯化的重组蛋白,其中pET30c-M5/BL21(DE3)工程菌的目的蛋白占全菌蛋白的22.5%,纯化后获得了高纯度的重组蛋白(>95%)。比较2种表达载体的表达结果,pET30c-M5具有诱导表达耗时少、获得重组蛋白量大的优势,可为下一步的研究提供足量的蛋白。
- 王杭军叶星田园园张莉莉瞿兰张蕊
- 关键词：免疫印迹原核表达纯化
- 罗非鱼3种C型溶菌酶重组蛋白的制备及与几种鱼虾溶菌酶溶菌谱的比较被引量：7
- 2012年
- 应用基因工程技术制备了3种奥利亚罗非鱼C型溶菌酶的重组蛋白,并应用比浊法比较了它们与草鱼C型溶菌酶、G型溶菌酶和斑节对虾C型溶菌酶重组蛋白对无乳链球菌、嗜水气单胞菌等8种细菌的溶菌作用。研究发现,6种重组溶菌酶对这8种菌均具有溶菌活性,但是溶菌活力强弱不一。其中罗非鱼C3溶菌酶对革兰氏阳性菌无乳链球菌的溶菌作用最强,草鱼C型与G型溶菌酶次之;所有重组溶菌酶对革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌均具较强的溶菌活性。与斑节对虾C型溶菌酶、草鱼C型与G型溶菌酶相比,罗非鱼的C型溶菌酶对嗜水气单胞菌具有较强的溶菌作用,且以C1的溶菌活性最强。本研究结果可为选择具较强溶菌活力的溶菌酶应用于养殖生产提供依据,并可为应用转基因技术培育抗病品种提供靶基因。
- 瞿兰叶星田园园张莉莉高风英卢迈新张蕊
- 关键词：罗非鱼草鱼斑节对虾溶菌酶
- 尼罗罗非鱼转录组与数字基因表达谱分析及Siglecs基因的表达研究
- 尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）隶属于鲈形目（Percifomes）、丽鱼科/(Cichlidae/)、罗非鱼属/(Tilapia/)。因其具有适应性强、生长快、繁殖力高和食性广等优点，被联合国粮...
- 张蕊
- 关键词：转录组差异表达基因SIGLEC
- 文献传递
