田宝磊
- 作品数：21 被引量：40H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 原生质介导的外源性GRF基因在小鼠体内表达时间的初探被引量：2
- 2002年
- 将含GRF重组质粒的JM10 9菌株大量培养 ,制备原生质体 ,经 1%的戊二醛处理后注射于小鼠肌肉 ,给予电刺激 ,提取DNA ,进行PCR鉴定。结果表明 ,电镜观察到原生质体可以与小鼠肌肉细胞融合 ;电击可以促进原生质体与肌肉细胞的融合 ,但 10 0V/cm ,5 0ms的低压、短脉冲电击对GRF在动物体内的表达量上没有被观察到显著差异 ;可以确认原生质体介导的GRF基因至少可以在小鼠体内滞留 2
- 白忠彬张永亮田宝磊刘松财欧阳红生
- 关键词：原生质体生长激素释放因子基因转染
- 原生质体介导的外源性GRF基因在家兔体内的表达被引量：5
- 2002年
- 白忠彬张永亮田宝磊刘松财欧阳红生张玉静
- 关键词：家兔
- 人外周血活化淋巴细胞中Survivin蛋白表达的分子机制研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨活化淋巴细胞中Survivin蛋白诱导表达的信号转导通路、分子级联反应和生物效应,揭示Survivin蛋白表达调控的分子机制。方法:用PHA和rhIL-2刺激培养人外周血单个核细胞,附加JAK抑制剂—AG490的处理,以Western blot检测Survivin和相关蛋白的表达;以流式细胞术(FCM)分析细胞周期和细胞分裂增殖。结果:刺激培养的细胞按照时序先后出现的分子和细胞学反应为:Stat3和Stat5磷酸化→CyclinD3、CyclinE蛋白水平上调→细胞进入S期及Survivin蛋白起始表达→细胞有丝分裂及Survivin蛋白表达水平增加。AG490对于上述反应均呈现明显的抑制作用,但对周期抑制蛋白P21和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平没有影响。结论:Survivin蛋白的表达依赖JAK-Stat信号转导通路的早期活化,通过上调CyclinD3和CyclinE周期蛋白水平,启动细胞周期的运行,诱导Survivin蛋白的周期时相依赖性表达,参与细胞有丝分裂与增殖。
- 董燕梅柱中钱俊杰宋宜田宝磊刘斌孙志贤
- 关键词：SURVIVIN蛋白活化淋巴细胞信号转导
- 电离辐射造成的DNA损伤反应中PML调控p53凋亡信号转导通路机制的研究
- 早幼粒细胞白血病蛋白PML(promyelocytic leukemia)在Fas、TNF、 IFN、神经酰胺、电离辐射等多种因素诱发的细胞凋亡反应中均发挥着关键性的调控作用,它借助其N末端的RBCC结构募集将近50种分...
- 田宝磊宋宜钱俊杰董燕刘华刘斌瞿文全刘继来祝晓梅孙志贤
- 关键词：P53MDM2电离辐射凋亡
- 文献传递
- TSA诱导MOLT-4细胞中p21^(WAF1/Cip-1)表达的功能机制研究被引量：2
- 2005年
- 为了研究去乙酰化酶抑制剂TSA诱导MOLT-4细胞周期阻滞和凋亡反应中p21WAFl/Cip-1的表达及其功能, 以组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4,流式细胞仪和细胞吖啶橙染色、瑞士染 色检测细胞周期和凋亡,Western检测p21p21WAFl/Cip-1的表达。结果表明:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA可有效的诱导 MOLT-4细胞发生G2／M阻滞和凋亡,并且呈现明显的剂量效应关系和时间效应关系;在此周期阻滞与凋亡反应过 程中,p21WAFl/Cip-1蛋白的表达水平在周期阻滞前快速增高,而在凋亡早期开始下降。p21WAFl/Cip-1分子在细胞中的表 达规律与TSA诱导的细胞G2／M阻滞和凋亡反应间存在明显的剂量效应关系和时间效应关系;蛋白酶体抑制剂 MG-132提升p21WAFl/Cip-1分子在细胞中的表达可以增进细胞的G2／M阻滞反应而延缓凋亡。结论:蛋白酶体途径参 与TSA诱导的MOLT-4细胞周期阻滞向凋亡转换过程中p21WAFl/Cip-1分子的降解调控;p21WAFl/Cip-1在TSA诱导的 MOLT-4细胞G2／M阻滞和凋亡反应中起着重要调节作用。
- 宋宜刘梅菊赵国伟钱俊杰董燕刘华孙国敬梅柱中刘斌田宝磊孙志贤
- 关键词：TSAMOLT-4细胞MG-132
- 染色体间区区室化核结构PML-NB在DNA损伤反应中的功能意义被引量：1
- 2013年
- 细胞在长期进化过程中形成的DNA损伤反应防御机制包括转录调节、周期调控、损伤修复、凋亡性和非凋亡性死亡等的一系列细胞学反应,是基因组稳定性维持的基石。其调控异常与肿瘤、衰老、遗传易感综合征等疾病发生直接相关。以早幼粒细胞白血病蛋白(promylocytic leukemia protein,PML)为核心分子构成的、与核基质相连的亚核多蛋白复合体——PML核体(PML nuclear body)既是DNA损伤的动态感受器,又是p53依赖和非依赖的检查点激活、损伤修复、凋亡诱导等细胞学反应的调控核心,在染色质重塑表观遗传调控、基因转录及转录后调控、蛋白共价修饰和活性调控等多个层面整合并协同调节DNA损伤反应。
- 宋宜田宝磊郑晓飞孙志贤
- 关键词：核体
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导H eLa细胞p21^(WAF1/CIP1)表达的分子机制研究被引量：2
- 2005年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HD Is)诱导肿瘤细胞产生周期阻滞以及诱导p21WAF1/C IP1表达的分子机制。方法:以人宫颈癌HeLa细胞为模型,用曲古抑菌素A(TSA)处理HeLa细胞,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡,通过W estern印迹及RT-PCR检测周期相关分子的蛋白及mRNA的表达;并构建TSA靶分子启动子区的荧光素酶报告质粒,进一步检测TSA的主要作用位点,寻找相关作用途径。结果与结论:TSA可诱导HeLa细胞发生周期阻滞,并呈现明显的剂量和时间依赖关系,加大用药剂量及延长用药时间可诱导凋亡。TSA可显著诱导p21WAF1/C IP1的表达,表现为转录水平的调节,其变化可以指示周期阻滞的程度。p21WAF1/C IP1启动子区3′端是TSA作用的主要位点,同样被TSA诱导表达增加的p53很可能通过与其效应元件的结合而使TSA诱导p21WAF1/C IP1表达的总效果增强。
- 赵国伟宋宜董燕钱俊杰梅柱中田宝磊张应玖孙志贤
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A细胞周期阻滞
- 生长激素释放因子肝脏定向表达复合物在家兔体内的表达被引量：4
- 2003年
- 外源基因在体内的转染及表达存在转染效率低、表达时间短等缺点 ,利用受体介导基因转移技术 ,可以将基因定向转入到特定组织 ,并且能提高转染效率和表达时间。在本试验中 ,利用肝脏去唾液酸糖蛋白受体 (ASGR)将生长激素释放因子 (GRF)基因定向转入到家兔肝脏组织并得到了表达。首先通过 DNA阻滞试验确定质粒 DNA与多聚赖氨酸 (poly- L- lysine,PL L)的结合比例及反应液的最佳 Na Cl浓度 ,然后将 PL L 与 α- D-吡喃半乳糖苯基异硫氰酸盐 (α-D- galactopyranosylphenyl isothiocyanate) (物质的量之比为 8∶ 1)在 p H9.0的 Na2 CO3溶液中进行糖基化反应 ,得到糖基化的 PL L(gal PL L)后透析除去未反应的糖并测定反应物糖含量。将糖基化的 PL L 与克隆有 GRF基因的 pc D-NA3- GRF质粒 (质量比为 3.16∶ 1)在 1.0 31m ol/ L的 Na Cl溶液中进行连接 ,最终得到 DNA- gal PL L复合物 ,电镜观察其结构。耳缘静脉注射质粒复合物到家兔体内 (1.5 mg/只 ) ,用 RT- PCR和 EL ISA检测不同组织的表达情况。结果注射后 7d家兔的肝脏 RT- PCR结果呈阳性 ,2 7d仍能检测到 GRF蛋白 ,但同时在其他的组织也检测到表达。并且进行了增重试验 ,发现定向转移
- 张永亮田宝磊段洪涛白忠彬
- 关键词：生长激素释放因子肝脏家兔去唾液酸糖蛋白受体增重试验
- 肿瘤细胞中Ro60的表达及其对肿瘤细胞辐射敏感性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的检测肿瘤细胞中RNA结合蛋白Ro60的表达定位,研究Ro60在肿瘤增殖和辐射敏感性中的作用。方法构建带绿色荧光素酶标签的Ro60真核表达载体,转染肿瘤细胞,观察电离辐射引发的DNA损伤反应中Ro60的表达定位规律;CCK8和锥虫蓝染色实验检测Ro60蛋白对肿瘤细胞增殖和辐射敏感性的影响。结果多种肿瘤细胞中均有较高水平的Ro60蛋白表达。γ射线诱导的DNA损伤反应中Ro60发生显著的表达上调和亚细胞定位改变。过表达Ro60的肿瘤细胞增殖延缓,细胞死亡明显增多,辐射引发的细胞增殖抑制和死亡显著增强。结论辐射引发肿瘤细胞中Ro60表达和定位改变,调控肿瘤细胞增殖和凋亡,提高肿瘤细胞的辐射敏感性。
- 楼敏铭张兴田宝磊刘继来刘斌张令强郑晓飞宋宜孙志贤
- 关键词：肿瘤细胞增殖
- 原生质体介导的外源性GRF基因在家兔肌肉中的表达
- 生长激素释放因子(Growth Hormone Releasing Factor,GRF)是由人和动物下丘脑合成并分泌的一种多肽激素,能特异的诱导生长激素的合成与分泌,提高体内生长激素的水平.GRF在畜牧业上有重大的应用...
- 张永亮田宝磊白忠彬
- 文献传递
