王金龙
- 作品数:7 被引量:12H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金:科技基础性工作专项转基因生物新品种培育专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 高效大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因敲除体系的构建被引量:8
- 2011年
- 【目的】为了深入研究大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)致病基因的功能,构建高效大丽轮枝菌基因敲除体系。【方法】融合PCR构建基因敲除载体;利用农杆菌介导法转化大丽轮枝菌;使用在T-DNA之间加入致死基因的双元载体,使T-DNA随机插入转化子在添加5-氟脱氧尿苷的培养基上不能存活,实现对随机插入转化子的"反向筛选"。【结果】对大丽轮枝菌腺嘌呤合成酶基因和几丁质合成酶基因进行基因敲除验证,基因敲除转化子在总转化子中的比例分别达到87%和44%。【结论】成功构建大丽轮枝菌高效基因敲除体系,为大丽轮枝菌致病基因的功能验证提供了技术平台。
- 田李陈捷胤汪佳妮王金龙戴小枫
- 关键词:大丽轮枝菌基因敲除融合PCR农杆菌介导转化致死基因
- 一种核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒
- 本发明提供了一种核酸,该核酸具有SEQ ID NO:1所示的序列,或者具有SEQ ID NO:1所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸互补的核酸。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法,所述真菌菌株...
- 戴小枫李蕾陈捷胤王金龙陈相永柳少燕
- 文献传递
- 一种核酸和鉴定真菌菌株致病型的方法以及试剂盒
- 发明提供了一种核酸,该核酸具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的序列,或者具有SEQ ID NO:1所示的序列中的特异性序列或SEQ IDNO:2所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸...
- 戴小枫李蕾陈捷胤陈相永柳少燕王金龙肖红利
- 文献传递
- 高毒力大丽轮枝菌特异片段SCF73突变株的构建及其致病力测定被引量:4
- 2012年
- 【目的】初步明确高毒菌株VDG1特异片段SCF73与大丽轮枝菌致病力的关系。【方法】通过比较基因组学分析和PCR鉴定,明确大丽轮枝菌高毒菌株VDG1相对于低毒菌株VDG2的特异片段SCF73;构建SCF73片段敲除质粒,导入农杆菌AGL-1,应用农杆菌介导法转化大丽轮枝菌VDG1,抗性筛选和PCR扩增鉴定SCF73敲除转化子;利用果胶、纤维素和淀粉培养基模拟分析ΔSCF73降解细胞壁组分的能力,采用定量蘸根接种法鉴定其对感病棉种军棉1号的致病力。【结果】确定了大丽轮枝菌VDG1的特异片段SCF73,长度为27.1 kb,预测编码5个基因,推测2个基因具有水解酶功能;筛选获得了3个ΔSCF73突变株;突变株利用细胞壁组分的能力与野生型菌株VDG1相比无显著差异;突变株对感病棉种军棉1号的致病力显著减弱。【结论】高毒力菌株VDG1特异片段SCF73在大丽轮枝菌致病过程中具有重要作用。
- 王金龙陈捷胤柳少燕李蕾戴小枫
- 关键词:大丽轮枝菌特异片段致病力
- 一种核酸和鉴定真菌菌株致病型的方法以及试剂盒
- 发明提供了一种核酸,该核酸具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的序列,或者具有SEQ ID NO:1所示的序列中的特异性序列或SEQ IDNO:2所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸...
- 戴小枫李蕾陈捷胤陈相永柳少燕王金龙肖红利
- 文献传递
- 核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒
- 本发明提供了一种核酸,该核酸具有SEQ ID NO:1所示的序列,或者具有SEQ ID NO:1所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸互补的核酸。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法,所述真菌菌株...
- 戴小枫陈相永李蕾柳少燕王金龙陈捷胤田李
- 文献传递
- 一种核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒
- 本发明提供了一种核酸,该核酸具有SEQ ID NO:1所示的序列,或者具有SEQ ID NO:1所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸互补的核酸。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法,所述真菌菌株...
- 戴小枫李蕾陈捷胤王金龙陈相永柳少燕
- 文献传递