张黎
- 作品数:51 被引量:137H指数:5
- 供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市研究生教育教学改革研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学天文地球更多>>
- 小鼠巨噬细胞Ipr1基因真核表达载体的构建及表达
- 2008年
- 目的构建小鼠Ipr1(intracellular pathogen resistance 1)基因真核表达载体。方法从C57BL/6J小鼠胸腺组织提取总RNA,以RT-PCR法调取Ipr1基因编码序列,克隆至pMD19-Tsimple载体中,转化大肠杆菌JM109,筛选的阳性克隆作PCR及酶切鉴定后测序分析。其中的突变碱基经点突变修复后将Ipr1基因亚克隆于原核真核双系统表达质粒pQE-TriSystem中得到pQE-TriSystem-Ipr1,用脂质体瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,RT-PCR鉴定Ipr1基因的表达。结果从C57BL/6J小鼠胸腺组织内扩增出大小为1338bp片段。阳性克隆测序鉴定发现一个点突变,经点突变修复后与GenBank报道的Ipr1基因序列一致。亚克隆获得重组质粒pQE-TriSystem-Ipr1,转染RAW264.7细胞经RT-PCR扩增出Ipr1基因相应大小的DNA片段。结论成功调取小鼠Ipr1基因并成功构建含Ipr1基因的真核表达载体,为进一步研究Ipr1基因的功能奠定基础。
- 李娜朱道银何永林张黎
- 关键词:结核病真核表达载体
- Application Values of IMAR Algorithm on CT Scanning of Cardiac Pacemaker Implanted Patients Based on Chest Phantom Study
- 静坤孙曾雨薇王国树张黎
- 人颗粒溶素的生物学活性研究被引量:1
- 2007年
- 目的全面研究 Mr 9000人颗粒溶素(GLS)的生物学活性,为其作为生物治疗剂应用奠定基础。方法将含 Mr9000GLS 编码基因的 pZM03质粒转染肝癌细胞株 SMMC-7721,通过 MTT 实验、流式细胞仪、Hoechst 染色法检测 GLS 的致肿瘤细胞凋亡活性;将 pZM03转染已感染结核分枝杆菌毒力株 H37Rv 的 RAW264.7细胞,96 h 后裂解细胞作细菌培养及菌落计数,检测 GLS 的细胞内直接杀菌活性。结果将 pZM03质粒转染 SMMC-7721细胞后,从多个角度检测到了 GLS 的致肿瘤细胞凋亡活性;转染荷菌的 RAW264.7细胞96 h 后,菌落计数实验证明 GLS 具有一定的细胞内直接杀菌活性。结论 pZM03质粒编码的 Mrg000GLS 具有天然 GLS 的杀瘤活性和一定的细胞内直接杀菌活性。
- 张黎伊正君杨春何永林朱道银
- 关键词:颗粒溶素肿瘤分枝杆菌结核
- 视网膜结构及功能的损害评估在阿尔茨海默病诊断中的意义被引量:3
- 2020年
- 目的结合图形视觉诱发电位(pattern visual evoked potential,PVEP)和光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)来评估阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者的视网膜变化及其在AD诊断中的意义。方法收集2018年8月到2019年11月在重庆医科大学附属第一医院老年科诊断明确的AD患者31例,以及年龄匹配的健康老年人37例,分别对其进行PVEP和OCT检查,记录PVEP中P100波的潜伏期和幅值、OCT中的各象限的视乳头周围视网膜神经纤维层(peripapillary retinal nerve fiber layer,pRNFL)厚度,分析AD组和HC组之间的差异,研究其在AD诊断中的价值。结果与HC组相比,AD患者P100波的幅值显著降低(P<0.05),潜伏期没有显著差异(P>0.05)。AD患者的鼻侧、鼻上方、颞上方、颞下方pRNFL厚度显著变薄(P<0.05),颞侧和鼻下方pRNFL则没有显著性差异(P>0.05);并且通过受试者工作特征(ROC)曲线分析发现视网膜功能或结构单个参数的曲线下面积(area under curve,AUC)低于多个参数组合的AUC。结论 P100波幅值和颞上方、鼻上方pRNFL厚度相结合,对于鉴别患者有无AD具有较高的诊断效能。提示PVEP和OCT联合应用有望成为AD诊断的临床生物标记。
- 邬涵韵李欣秦张瑾杨文凯吕洋张黎
- 关键词:光学相干断层扫描视觉诱发电位阿尔茨海默病
- 重组BCG联合抗痨药物对小鼠结核病治疗作用的实验研究被引量:2
- 2008年
- 目的:探讨携带编码人天然颗粒溶素(Granulysin,GLS)和小鼠IL-12基因的重组BCG与抗痨药物对结核分枝杆菌感染的协同治疗效果。方法:将结核分枝杆菌H37Rv感染的BALB/c小鼠40只随机分成4组。感染4周后分别用生理盐水、重组卡介苗(BCG)、INH+PZA和重组BCG联合INH+PZA治疗,于第一次治疗后3个月,处死小鼠,检测器官荷菌量、脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的分泌水平、血清IL-12和IFN-γ、肺、脾组织中GLS表达,同时观察小鼠肺、脾组织病理改变情况。结果:重组BCG联合INH+PZA治疗组肺、脾组织荷菌量(logCFU/g)比重组BCG和INH+PZA治疗组显著降低;重组BCG和INH+PZA治疗组肺、脾组织荷菌量比生理盐水组显著降低。重组BCG组经PPD刺激后IFN-γ和TNF-α分泌水平明显高于其它组。重组BCG联合INH+PZA治疗组和重组BCG组血清IL-12和IFN-γ水平明显高于生理盐水组。重组BCG组用免疫组化检测到小鼠肺及脾组织中GLS的表达。重组BCG和INH+PZA组病变轻且局限,生理盐水组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛。重组BCG联合INH+PZA治疗组肺组织病变最轻。结论:GLS/IL-12重组BCG对小鼠结核病有一定免疫治疗作用;重组BCG联合临床常用的抗痨药可增强抗结核病的疗效。
- 杨春张黎何永林徐蕾伊正君李娜王渝伟朱道银
- 关键词:颗粒溶素IL-12重组BCG结核病抗痨药
- 弱视的治疗进展被引量:5
- 2015年
- 弱视是眼科常见病,不仅使患儿视力低下,更重要的是会影响双眼视觉功能的发育,从而影响患儿立体视的建立。部分弱视经过及时适当的治疗是可逆的,其疗效与年龄等因素有密切关系。近年来,国内外在弱视的临床治疗方面取得了很大进展,治疗方法多种多样,主要包括屈光矫正、遮盖疗法、药物治疗、压抑疗法、手术治疗、知觉学习及综合治疗等。不同类型的弱视治疗方案的选择各有不同。
- 赵倪张黎
- 关键词:弱视
- 基于仿真胸部体模的IMAR算法对心脏起搏器植入患者CT扫描应用价值的研究
- 孙静坤曾雨薇王国树张黎
- 9ku颗粒溶素活性肽重组减毒沙门菌的构建与表达被引量:2
- 2007年
- 目的构建人9ku颗粒溶素(granulysin)的重组减毒沙门菌,并在真核细胞中表达,为下一步利用颗粒溶素基因治疗肿瘤奠定基础。方法以含有颗粒溶素cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得含分泌肽编码基因的9ku的颗粒溶素基因片段后,定向插入真核表达载体pBudCE4.1中,获得重组表达质粒pBudCE4.1-S9K,通过PCR、双酶切及插入片段序列测定对重组质粒进行鉴定;采用RT-PCR,免疫细胞化学与Dot-ELISA法检测pBudCE4.1-S9K在RAW264.7细胞的瞬时表达与分泌;重组质粒电转化减毒沙门菌后,将重组菌感染巨噬细胞,以RT-PCR检查颗粒溶素的表达。结果成功扩增出含分泌肽编码基因的9ku的颗粒溶素基因片段;经酶切,PCR及测序鉴定证明得到读码框正确的重组质粒;转染细胞证实可分泌表达9ku颗粒溶素;重组减毒沙门菌感染细胞后,检测到颗粒溶素的表达。结论成功构建含9ku颗粒溶素活性肽基因的重组减毒沙门菌,该菌能成功递呈携带基因在感染细胞内表达。
- 何永林张黎朱道银伊正君杨春徐蕾
- 关键词:颗粒溶素真核表达质粒
- 耻垢分枝杆菌与卡介苗作为载体在鼠结核病治疗中的作用比较被引量:3
- 2008年
- 目的比较耻垢分枝杆菌(MS)与卡介苗(BCG)作为载体在鼠结核病治疗中的作用。方法分别以不同剂量的MS和BCG免疫BALB/c小鼠,观察二者的致病作用。以结核分枝杆菌H37Rv感染BALB/c小鼠4周后,分别用生理盐水、MS、GLS/IL-12、重组MS、BCG及GLS/IL-12重组BCG治疗6次,于第6次治疗后7d处死小鼠,检测肺、脾荷菌量、血清IL-12和IFN-γ水平、脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的水平及肺、脾组织中颗粒溶素表达,并观察小鼠肺组织病理改变。结果重组MS和重组BCG组器官荷菌量明显低于MS和BCG组;重组MS和重组BCG组血清IL-12和IFN-γ水平明显高于MS和BCG组,MS和BCG组明显高于生理盐水组;重组MS和重组BCG组脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的水平明显高于其他组;MS与BCG组比较,重组MS与重组BCG比较,荷菌量、病理变化、肺、脾中的IL-12和IFN-γ水平差异均无显著意义;淋巴细胞中的IFN-γ和TNF-α水平,MS与BCG组差异有显著意义,而重组MS与重组BCG组差异无显著意义;重组MS和重组BCG组在肺、脾中均有颗粒溶素表达;MS所致病变比相同剂量BCG轻。结论MS与BCG一样,可将要表达的基因靶向递送到相应的组织,并诱导特异性细胞免疫,同时其在体内的副作用低于BCG,因此可作为良好的有机载体。
- 杨春张黎何永林徐蕾李娜王渝伟朱道银
- 关键词:耻垢分枝杆菌卡介苗颗粒溶素结核病
- 携带颗粒溶素活性肽基因的减毒沙门菌对小鼠黑色素瘤的治疗作用被引量:1
- 2011年
- 目的观察携带颗粒溶素(Granulysin,GLS)活性肽基因的减毒沙门菌对小鼠黑色素瘤的治疗作用。方法将小鼠黑色素瘤细胞株B16接种C57 BL/6J小鼠,复制小鼠黑色素瘤模型。将pBudCE4.1-S9K重组沙门菌以不同剂量及不同时间接种于小鼠肿瘤内,检测肿瘤体积,确定最佳治疗剂量和起始时间。将模型小鼠随机分为PBS组、减毒沙门菌组、pBudCE4.1重组沙门菌组和pBudCE4.1-S9K重组沙门菌组,分别采用最佳治疗剂量,在最佳治疗起始时间开始治疗,每周1次,共3次。从成瘤开始,每2 d测量肿瘤的最长径(L)和最短径(S),计算肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,并观察小鼠的荷瘤存活期。结果小鼠黑色素瘤模型复制成功。重组沙门菌的最佳治疗剂量和起始时间分别为107个/ml和第4天。与PBS组、减毒沙门菌组和pBud-CE4.1重组沙门菌组相比,pBudCE4.1-S9K重组沙门菌组能明显抑制模型小鼠肿瘤的生长,使肿瘤体积增长延缓,并明显延长荷瘤小鼠的存活期。结论 pBudCE4.1-S9K重组减毒沙门菌对小鼠黑色素瘤具有一定的治疗作用。
- 何永林杨春张黎徐蕾王瑜伟
- 关键词:颗粒溶素减毒沙门菌黑色素瘤小鼠