刘晓娟
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
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- Rac1在缺氧条件下培养的人视网膜色素上皮细胞的表达被引量：3
- 2007年
- 目的观察Rac1在缺氧条件下培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epitheli-um,RPE)细胞的表达,以探讨其在脉络膜新生血管形成中可能的作用。方法将人RPE细胞在含有200μmol·L-1CoCl2的培养液内分别培养0.5h、1h、2h、4h、8h、12h和24h。运用免疫细胞化学方法及Western-blot技术检测缺氧条件下RPE细胞Rac1的表达及时相变化。常氧状态下培养的RPE细胞作为对照。结果缺氧条件下RPE细胞早期即有Rac1的表达,主要位于胞浆,随着缺氧时间的延长,阳性表达量上调,在8h达到高峰,12h开始下降。与常氧组对照,差异有统计学意义(P<0.05)。Western-blot分析结果与免疫细胞化学染色结果一致。结论Rac1在缺氧早期的RPE细胞中呈瞬时高表达,可能与脉络膜新生血管形成有关。
- 郝晓凤惠延年王雨生张鹏谢晓繁刘晓娟赵炜朱洁
- 关键词：RAC1视网膜色素上皮细胞缺氧免疫细胞化学
- 培养人视网膜色素上皮细胞脂褐素形成对胞内钙离子和细胞活力的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察培养人视网膜色素上皮(retinal pigment epithe-lial,RPE)细胞在吞噬牛光感受器外节(photoreceptor outer segments,POS)膜盘形成脂褐素的过程中,胞内钙离子浓度及细胞活力的变化。方法:将培养人RPE细胞与制备的2×1010/L牛POS共培养,在形成脂褐素过程中,用钙荧光指示剂Fluo-3/AM和激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal micro-scope,LSCM)观察培养0.5,1,2,4和8d时间点胞内钙离子的变化;用MTT比色法观察培养0.5,1,2,4和8d的细胞活力。结果:对照组RPE细胞内钙离子荧光强度为165.4±29.9U,而与POS培养的细胞内钙离子荧光强度在0.5d达到高峰值777.3±63.9(P<0.01),4d下降至316.9±36.1U(P<0.01),但至8d仍维持在较高值334.1±30.6U(P<0.01)。细胞内脂褐素自发荧光平均强度在培养8d达到350.2±26.5U(P<0.01),而对照组为105.5±15.4U。MTT法显示共培养0.5,1,2,4和8d细胞相对增殖率分别为4.9%,84.4%,54.7%,21.1%和11.2%,细胞增殖活力在共培养1d达到最大值,之后下降。结论:在培养人RPE细胞和牛POS共培养形成脂褐素过程中,钙离子大量内流,细胞增殖活力增加。
- 张乐惠延年马丽娜王静波刘晓娟王雨生
- 关键词：脂褐素视网膜色素上皮细胞钙离子MTT
- 缺氧下外源性血管内皮生长因子对体外大鼠Müller细胞的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:观察缺氧条件下外源性血管内皮细胞生长因子(VEGF)对体外大鼠Müller细胞的影响。方法:体外酶消化法纯化培养并鉴定大鼠Müller细胞。台盼兰染色测定细胞活性。应用光镜、细胞计数、免疫细胞化学、MTT法、原位细胞凋亡等方法分析Müller细胞在不同的缺氧时间(0～24h)、添加不同浓度VEGF(10～100μg/L)及VEGF受体Flk-1阻断剂SU1498处理后,细胞中VEGF和Flk-1,Flt-1的表达、细胞活性及凋亡等变化。结果:纯化培养至第3代的Müller细胞,经鉴定其纯度为90%,活力是87.3%。缺氧8～12h时Müller细胞胶质源纤维酸性蛋白(GFAP)染色增强,VEGF和Flk-1,Flt-1表达增加,可见细胞肿胀、脱落。缺氧20h时,与对照组相比,细胞增生降低到79.3%,细胞凋亡指数增加了6.5倍。缺氧24h前加入75μg/LVEGF使细胞活性增强了1.3倍,凋亡指数下降到2/3。VEGF在10～75μg/L范围内此作用呈剂量依赖性。正常情况下,Flk-1,Flt-1表达很少,但是缺氧后,表达量明显上升,Flt-1更显著。加入SU1498后能部分抑制VEGF对Müller细胞的作用。结论:短时间缺氧使Müller细胞反应性增生,VEGF和Flk-1,Flt-1表达增加,外源性VEGF可能部分地借助于受体Flk-1和Flt-1对缺氧的Müller细胞起到保护作用。
- 刘晓娟惠延年郭斌张乐郝晓凤
- 关键词：血管内皮生长因子MÜLLER细胞血管内皮生长因子受体1血管内皮生长因子受体2缺氧
- Rac1和HIF-1在激光诱导小鼠脉络膜新生血管模型组织中的表达被引量：3
- 2007年
- 目的研究Rac1和缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)在激光诱导实验性小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型组织中的表达及意义。方法用532nm激光诱导小鼠CNV模型,分别在光凝后1d、3d、7d、14d、28d行荧光素眼底血管造影后处死小鼠,摘除眼球制作标本,行病理切片观察及免疫组织化学检测Rac1和HIF-1α蛋白在CNV组织中的表达。结果正常小鼠视网膜脉络膜组织未见Rac1和HIF-1α蛋白阳性表达。激光诱导的小鼠CNV组织形成过程中均有Rac1和HIF-1α蛋白的表达,激光光凝早期二者表达均增高;光凝后1d即有明显的阳性表达,二者的阳性表达率分别是11.21%和24.80%;光凝后3～7d均达到高峰,Rac1蛋白的阳性表达率分别为34.58%和53.35%,而HIF-1α蛋白的阳性率为33.05%和50.35%;光凝后14d,二者的表达均下降,阳性率分别为25.50%和31.97%;光凝后28d,阳性率分别为9.32%和11.26%;二者表达呈显著正相关(r=0.943,P=0.016)。结论Rac1和HIF-1α在CNV组织中存在高表达,且二者表达密切相关。
- 郝晓凤惠延年王雨生张鹏徐建锋刘晓娟赵炜
- 关键词：激光脉络膜新生血管RACL缺氧诱导因子1Α
- 缺氧条件下外源性血管内皮生长因子对大鼠Müller细胞的影响
- 研究背景在缺血性视网膜疾病中,多种视网膜细胞分泌大量VEGF。它不仅能促进新生血管形成、增加血视网膜屏障通透性,还对各种视网膜细胞产生一定影响。尽管VEGF抑制剂已应用于临床,但是其对某些视网膜细胞作用的机制尚不清楚,如...
- 刘晓娟
- 关键词：血管内皮生长因子MÜLLER细胞血管内皮生长因子受体1血管内皮生长因子受体2缺氧
- 文献传递
