聂简琪 作品数:11 被引量:29 H指数:3 供职机构: 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 国家大学生创新性实验计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 农业科学 更多>>
生物过程工程研究在创新生物医药开发中应用的驱动力--生物反应器 被引量:6 2016年 近年创新生物医药在生物产业中的比重逐渐增大,也给生物产业带来了巨大的经济效益,靶点筛选及分子构建等上游技术的进步是促进生物医药进步的主要原因。随着目前细胞培养技术在生物医药生产中的广泛应用,对细胞培养技术的要求也不断提高,同时细胞培养技术的实现载体——生物反应器的技术改进和创新也越发凸显其重要性。本文介绍了生物反应器在创新生物医药产业中的应用种类、发展趋势及发展驱动力,回顾了全球范围内新型生物反应器的发展成果,包括新型反应器技术及过程分析技术在生物医药中的应用,最后,分析了中国生物反应器的发展现状与问题,指出了生物反应器的发展与进步应以提高生物培养过程的稳定性最终提高产品的质量而不是以提高产量为主要目标。本文详细阐述现代生物反应器技术及基于"质量源于设计"的质量控制理念在其中所起到的关键作用,以及生物反应器的技术发展的现状和未来走向。 孙杨 聂简琪 刘秀霞 杨艳坤 戴晓峰 白仲虎关键词:生物反应器 生物工程 微反应器 高通量培养技术在生物过程研发中的应用进展 被引量:3 2015年 对近年来高通量培养技术在质量源于设计(Qb D)驱动下的研究进展与应用进行了阐述,重点对一些从DNA到大规模生产的放大过程中能够缩短培养时间并广泛应用于工业生产的高通量培养技术进行了详细介绍。这些技术主要包括微孔板(MTP)培养、微型生物反应器、平行发酵系统等, 孙杨 聂简琪 白仲虎 杨艳坤 戴晓峰关键词:生物过程 发酵系统 微孔板 微流控 微流体 微型反应器 新型固定床生物反应器在细胞源猪伪狂犬病毒生产中的应用 被引量:2 2021年 针对目前固定床生物反应器结构复杂、易产生泡沫等缺点,研发结构简单且可无泡通气的新型固定床生物反应器,并对该反应器的混合时间、k L a、细胞分布均匀性和细胞捕获能力进行测定。并进一步利用该反应器实施低密度接种Vero细胞进行细胞培养并扩增猪伪狂犬病毒。试验结果表明,该新型固定床反应器的混合时间、k L a与传统STR反应器相当,细胞捕获能力良好且细胞在反应器中分布均匀。采用低密度接种时Vero细胞可在该反应器中进行良好的生长,接毒5 d后累计收获的病毒总颗粒数达到10.37 log 10 TCID 50,相当于2.3×10^5剂量疫苗。该研究为细胞源疫苗的生产提供了新的反应器与技术。 聂简琪 聂简琪 杨艳坤 孙杨 李业 杨艳坤关键词:固定床生物反应器 VERO细胞 猪伪狂犬病毒 疫苗 南瓜汤宝的研制 2011年 对一种即食性的南瓜产品——南瓜汤宝的制作工艺进行了研究。结果表明,南瓜汤宝的最佳工艺参数为:去皮、去瓤的南瓜蒸煮16 min后,加入新鲜南瓜1/2质量的水进行打浆。调配250 mL的南瓜果汁时,最佳配料比为:南瓜浆100 g,白砂糖15 g,柠檬酸0.4 g,复合增稠剂(卡拉胶与CMC-Na按1∶1复合)0.375 g。南瓜浆在100℃下水浴浓缩2 h,然后分3次加入增稠剂,继续浓缩1.5 h,得到的最终产品性状最佳。 刘政 葛佩富 王丽威 聂简琪 张凤霞 徐英帅关键词:南瓜 调配工艺 风味 高渗胁迫和灌流培养策略提高HEK 293细胞生产重组腺病毒载体产量 2023年 由于各种疾病在全球范围内的肆虐,国际市场对重组腺病毒载体(adenoviralvector,Adv)疫苗的需求量急剧增加,而工艺研究是解决这一问题的有效手段之一。在细胞接毒前施加高渗胁迫可以提高分批培养模式下的Adv产量,新兴的灌流培养也可以显著提高Adv的产量。将高渗胁迫工艺与灌流培养相结合,有望进一步提升高细胞密度生产过程中的Adv产量。本研究利用摇瓶结合拟灌流培养作为生物反应器灌流培养的缩小模型,使用渗透压为300–405 mOsm的培养基研究了高渗胁迫对细胞生长和Adv生产的影响。结果显示,在细胞生长阶段使用370mOsm的高渗透压培养基,在病毒生产阶段使用300 mOsm的等渗透压培养基的灌流培养工艺有效地提高了Adv的产量。进一步研究发现这可能归因于病毒复制后期HSP70蛋白的表达量增加。将这种工艺放大至生物反应器中,Adv的产量达到3.2×10^(10)IFU/mL,是传统灌流培养工艺的3倍。本研究首次将高渗胁迫工艺与灌流培养相结合的策略应用于HEK 293细胞生产Adv,同时揭示了高渗胁迫工艺增产Adv的可能原因,为HEK 293细胞生产其他类型Adv的工艺优化提供了借鉴。 张卓曦 白仲虎 刘光胤 聂简琪 杨艳坤关键词:腺病毒载体 速溶性大豆分离蛋白生产工艺优化 被引量:1 2012年 以中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复配为工具酶,以水解度为指标,通过单因素试验与响应面分析对大豆分离蛋白的酶解工艺进行优化,并添加磷脂、蔗糖,以溶解性为指标优化调配工艺,提高其速溶性。结果得到最佳酶解工艺参数为pH7.08,温度51.6℃,酶(木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按质量比1∶1复配)添加量22.45 mg.g-1,酶解时间3 h;在此酶解条件下,大豆分离蛋白的水解度达20.3%,溶解度达72%。最佳调配工艺为磷脂添加量0.8%,蔗糖添加量3.0%,最终产品溶解度达92.9%。样品溶于水后下沉快,易溶解,无团块。 闫晗 聂简琪 葛佩富 桓旭影关键词:大豆分离蛋白 酶解 溶解性 速溶性 微波法提取沙棘茶中茶多酚的工艺研究 被引量:3 2010年 用微波法提取沙棘茶中茶多酚,考察了乙醇浓度、微波功率、加热时间、料液比对茶多酚含量的影响。结果表明,微波法提取茶多酚的最佳工艺参数为乙醇浓度50%,微波功率640 W,加热时间50 s,料液比1∶60,在此条件下,茶多酚含量可达16.9%。 刘玲玲 娄伦蛟 张波 胡欣培 聂简琪关键词:沙棘茶 茶多酚 微波提取 南瓜籽能量棒的研制 被引量:7 2011年 以南瓜籽为干果原料,单糖、二糖、低聚糖为糖源,制作能量棒。采用焙烤法生产工艺,对影响南瓜籽能量棒品质的主要因素进行分析。结果表明,在每条能量棒中南瓜籽添加量固定为25 g的前提下,最佳调配比例为:糖液添加量为120%,乳清蛋白添加量为4%,燕麦片添加量为100%,葡萄干添加量为40%,食盐添加量为0.2%。能量棒最佳烘烤工艺参数为:120℃,10 min。计算表明,每条能量棒中含热量1 722.66 kJ,脂肪16.395 g,蛋白质12.34 g,碳水化合物56.265 g,钠9.2 mg。该能量棒产品营养搭配合理,产品口感好,风味佳,是一种很好的快速补充能量的营养保健产品。 刘政 葛佩富 王丽威 王楠 聂简琪 张凤霞 徐英帅关键词:乳清蛋白 烘烤 普鲁兰酶突变体文库高通量筛选方法的建立及应用 被引量:4 2016年 在摇瓶水平实现普鲁兰酶基因(Gen Bank Accession No:AX203843)在大肠杆菌BL21(DE3)的异源表达,并成功按规格缩小实现了基于深孔板的高通量细胞培养,同时建立了基于深孔板的普鲁兰酶酶活快速高效的高通量检测方法。利用易错PCR技术对普鲁兰酶基因进行定向进化,突变基因产物重组于表达载体p ET-28a(+)-pel B中,并导入大肠杆菌BL21(DE3)构建突变体文库,利用该高通量筛选方法实现了突变体文库的快速高效筛选并获得了一株突变菌株4A4,其表达量提高了46.5%。该方法不仅适用于淀粉酶、纤维素酶等酶类的高通量筛选,同时为菌株文库的筛选以及蛋白质的定向进化提供了一种新思路。 聂简琪 陈阿娜 刘秀霞 杨艳坤 白仲虎关键词:普鲁兰酶 高通量筛选 CAR-T细胞疗法的自动化设备及展望 被引量:1 2017年 嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。通过从患者或者捐献者外周血分离获得T细胞,并进一步激活、基因修饰、扩增从而获得CAR-T细胞,洗涤浓缩后回输患者体内进行治疗。修饰后的T细胞肿瘤靶向性、杀伤活性更强,在血液肿瘤疾病临床试验中疗效明显,在实体瘤的临床试验中也崭露头角。CAR-T细胞疗法整个过程的安全性、无菌性、纯度等质量控制极其重要。确保CAR-T细胞疗法生产过程的标准化、封闭化与自动化,做到药效和风险可控是首要任务。对CAR-T细胞疗法工艺与自动化设备以及面临的工程化问题进行综述,以期为CAR-T细胞疗法工程化提供参考。 聂简琪 聂简琪 杨艳坤 孙杨 刘秀霞 杨艳坤 白仲虎关键词:细胞治疗 自动化设备 工程化