吕洋
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：山东省农业重大应用技术创新课题济南市高校院所自主创新计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 通过敲除口蹄疫病毒受体整合素β6亚基基因获得抗口蹄疫转基因羊或猪的方法
- 本发明公开了一种通过敲除口蹄疫病毒受体整合素β6亚基基因获得抗口蹄疫转基因羊或猪的方法，是将线性化的携带有报告基因的突变的整合素β6亚基基因的打靶载体转染羊或猪的胎儿成纤维细胞，通过同源重组获得替换整合素β6亚基基因的核...
- 何洪彬王洪梅武建明刘蓝吕洋杨宏军宋玲玲孙涛高运东侯明海仲跻峰
- 文献传递
- 脆壁克鲁维酵母基因置换技术的建立
- 2013年
- 以中性乳糖酶生产菌脆壁克鲁维酵母为材料,构建以kan基因为筛选标记、以脆壁克鲁维酵母乳糖酶基因上游调控区为同源臂的质粒pPkan。将质粒pPkan电击转化脆壁克鲁维酵母,对受体菌生长时期、电场强度、电击后培养时间等条件进行优化。结果表明,以OD600为0.8的脆壁克鲁维酵母为受体、电压1.5 kV、电场强度为7.5 kV.cm-1、电击后培养时间为90 min,可获得较高的转化率,最高转化效率为2.37×102转化子.μgDNA。在电击转化的同时加入限制性内切酶10μL,对电击转化的转化率无显著影响。经PCR筛选证实87.5%的转化子为同源重组,从而建立一套有效的脆壁克鲁维酵母基因置换技术。
- 李杰曹宇婷徐欣张旭李璐吕洋卢松冲
- 关键词：电击转化同源重组基因置换
- 牛整合素β6基因的原核表达及其抗血清的制备研究被引量：1
- 2011年
- [目的]为深入研究ITGB6亚基的基因功能奠定基础。[方法]利用基因克隆技术获得整合素β6基因(ITGB6)胞外区,然后将其重组到pET-32a(+)质粒中,经鉴定及序列分析确定获得了重组阳性克隆;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导及蛋白纯化。[结果]SDS-PAGE结果显示,在94 kD处出现特异性条带;对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备ITGB6蛋白抗血清,Western-blot分析表明抗血清可与原核表达的ITGB6蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶2 560。[结论]成功表达了牛的重组整合素β6基因。
- 吕洋陈莉莉王洪梅武建明何洪彬李杰
- 关键词：原核表达抗血清
