王春晖
- 作品数：53 被引量：144H指数：7
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省卫生科技计划项目云南省技术创新人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 凋亡素蛋白多克隆抗体的制备及免疫学评价被引量：1
- 2011年
- 凋亡素由鸡贫血病毒中的VP3基因编码,能诱导多种肿瘤细胞发生凋亡。以真核表达载体pcDNA3.0-VP3为模板构建原核表达载体pET8a-VP3,经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切鉴定和基因测序无误后,在IPGT诱导下表达VP3蛋白并对其进行纯化,将纯化后的VP3蛋白与弗氏完全佐剂或不完全佐剂乳化后,分别对两只新西兰大耳白兔进行皮下多点注射,间接ELISA检测免疫后血清效价,效价达到指标后第2天以心脏穿刺的方法采全血后分离抗血清。抗血清效价高的兔子进一步采用Protein A纯化总IgG,最终纯化后的抗体效价可以达到1∶243 000。用重组腺相关病毒rAAV-VP3感染细胞后对抗体的特异性进行免疫学评价。首先利用免疫荧光技术检测VP3基因在人膀胱癌细胞株T24、EJ细胞以及Vero细胞中的表达情况,观察到凋亡素在T24、EJ细胞中主要定位于细胞核,而在Vero细胞中则定位于细胞质。其次通过Western blotting检测纯化后的抗体能与细胞内腺相关病毒介导表达的凋亡素蛋白特异性结合。实验证明了制备的凋亡素蛋白多克隆抗体的有效性和特异性,为进一步阐明凋亡素抗肿瘤效应的分子机制及生物学特性奠定了基础。
- 王春晖王剑松王文举詹辉李鸿钧颜汝平徐鸿毅
- 关键词：VP3蛋白多克隆抗体膀胱肿瘤腺相关病毒
- 复方玄驹胶囊治疗少弱精及畸形精子症的疗效观察
- 目的 观察复方玄驹胶囊治疗少、弱精,畸形精子症的临床疗效及对精子参数水平的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用随机对照的临床研究,将确诊的66例患者随机分为A、B两组,每组33例,A组给予复方玄驹胶囊联合维生素C、维...
- 张鹤云李健赵云张宏景毕晓方王春晖杨洋熊杰史云强钟一鸣
- 复方玄驹胶囊治疗少弱精及畸形精子症的疗效观察
- <正>目的观察复方玄驹胶囊治疗少、弱精,畸形精子症的临床疗效及对精子参数水平的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用随机对照的临床研究,将确诊的66例患者随机分为A、B两组,每组33例,A组给予复方玄驹胶囊联合维生素C、...
- 张鹤云李健赵云张宏景毕晓方王春晖杨洋熊杰史云强钟一鸣张春和
- 文献传递
- 微创技术在泌尿外科的应用现状和前景被引量：1
- 2006年
- 王剑松王春晖
- 关键词：微创泌尿外科腹腔镜内镜激光
- RNA干扰靶向Survivin促进膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡的研究被引量：2
- 2010年
- 目的针对凋亡抑制因子Survivin应用RNA干扰技术(RNA interference,RNA)i抑制膀胱癌细胞株BIU-87细胞内源性Survivin基因的表达进而促进膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡.方法构建重组质粒pshRNA-survivin1、pshRNA-surv-ivin2和pshRNA-survivin 3并转染BIU-87细胞株,应用免疫组化法检测细胞中Survivin蛋白的表达,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长增殖抑制率,利用流式细胞术检测细胞凋亡率.结果重组质粒转染BIU-87细胞后,Survivin蛋白表达明显下调,细胞凋亡率显著增加,细胞生长明显受抑.结论膀胱癌细胞高表达Survivin,RNA干扰特异性抑制Survivin表达,可以促进膀胱癌细胞凋亡和增殖活性明显下降.
- 严勇李克功詹辉丁明霞王春晖王剑松
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN膀胱肿瘤
- PKEP术后短期留置尿管的可行性分析
- 2022年
- 目的探讨经尿道双极等离子前列腺剜除术(transurethral plasmamakinetic enucleation surgery,PKEP)术后患者短期留置尿管的可行性。方法回顾性分析2019年2月至2019年12月昆明医科大学附属延安医院收治且采用PKEP治疗良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)的89例患者的临床资料,将其分为对照组和观察组,其中对照组PKEP术后留置尿管,观察组行PKEP术后短期留置尿管,对比2组的手术时间、术中出血量、切除腺体重量等相关指标。结果对照组与观察组的手术时间[(58.40±23.10)min vs(67.40±29.80)min]、切除腺体重量[(54.90±16.60)g vs(61.20±21.50)g]、术中出血量[(31.70±13.60)mL vs(35.50±19.20)mL]相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。但观察组住院时间[(10.80±3.90)d vs(13.70±4.60)d]、住院费用[(1.06±0.49)d vs(1.38±0.53)d]显著低于对照组(P<0.05)。在术后1周尿潴留、尿路感染、尿失禁等并发症的发生率上,2组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论术者严格遵守PKEP操作规范后,术后短期留置尿管在不增加术后并发症发生率的前提下,还能缩短患者住院时间、降低住院费用。既达到了良好的治疗效果,且减轻了患者的经济负担,具有一定的可行性。
- 王春晖徐佩琦史云强平秦榕杨萌王英宝钟一鸣毕晓方
- 关键词：前列腺增生尿失禁尿路感染
- 睾丸扭转31例临床分析被引量：1
- 2015年
- 青少年阴囊急症的常见原因之一是睾丸扭转。随着对睾丸扭转急症认识的提高，临床中彩色多普勒超声的普及，睾丸扭转的误诊率明显下降；但此急症中睾丸切除仍然常见，应加强关于此病科普知识的公众性教育，以避免患者延迟就诊，更要加强临床医生对本病病史、诊断方法、治疗的掌握，以提高正确及时的诊断率，减少切除睾丸严重后果的发生。
- 张鹤云张宏景王春晖毕晓方杨洋熊杰钟一鸣
- 关键词：睾丸扭转阴囊急症睾丸切除科普知识延迟就诊临床医生
- VP3基因联合多西紫杉醇诱导人前列腺癌细胞株凋亡的实验研究
- 2009年
- 目的观察VP3基因、多西紫杉醇各浓度及VP3基因联合多西紫杉醇各浓度对PC-3细胞株的凋亡作用。方法构建重组真核表达载体PcDNA3-VP3,采用基因转染法转染人前列腺癌细胞株PC-3。利用RT-PCR技术检测VP3基因在PC-3细胞株中的表达状况。将多西紫杉醇浓度分为3组,分别为10^(-8) mol/L、10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L。应用光镜、HE染色、透射电镜形态学、MTT法、流式细胞仪TUNEL法观察转染重组质粒PcDNA3-VP3单独或联合多西紫杉醇各浓度对前列腺癌细胞株PC-3的影响。结果 VP3基因转染PC-3细胞后在细胞中得到了表达。HE染色和透射电镜下观察到PC-3细胞的典型凋亡形态学特征。MTT法检测结果显示转染质粒PcDNA3-VP3,单独应用10^(-7) mol/L以上浓度的多西紫杉醇及转染质粒PcDNA3-VP3联合应用10^(-8) mol/L以上浓度的多西紫杉醇均可使PC-3细胞株的增殖活性明显下降(P<0.01)。流式细胞仪TUNAL法检测单独转染质粒PcDNA3-VP3、质粒PcDNA3-VP3联合10^(-8) mol/L浓度组及质粒PcDNA3-VP3联合10^(-7)mol/L浓度组后24h、48h、72h各个时间点上的PC-3细胞株凋亡率分别为(20.31±1.96)%、(41.50±1.03)%、(50.03±3.00)%,(P<0.01);(31.10±0.59)%、(53.10±0.77)%、(68.90±2.66)%(P<0.01);(40.01±0.53)%、(62.23±0.74)%、(75.20±0.53)%(P<0.01)。结论联合10^(-8) mol/L以上浓度的多西紫杉醇能明显增加VP3基因诱导人前列腺癌PC-3细胞株凋亡。
- 李天庆王剑松詹辉袁顺辉王春晖颜汝平李解方
- 关键词：VP3基因多西紫杉醇PC-3细胞
- 结构-过程-结果三维模式在腹壁尿路造口患者全程化管理中的应用被引量：11
- 2020年
- 目的探讨结构-过程-结果三维质量评价模式在膀胱全切+腹壁尿路造口患者全程化管理中的应用效果评价。方法选取2016年1月至2018年9月在昆明市某三级甲等医院泌尿外科住院治疗的膀胱癌尿流改道行腹壁尿路造口的65例患者为研究对象,将2016年1月至2017年6月住院治疗的33例患者设为对照组,实施常规的护理措施及出院后电话回访;2017年7月至2018年9月住院治疗的32例患者设为干预组,实施三维质量评价模式管理方案。结果干预组患者住院满意度和自我护理能力得分明显优于对照组(P<0.05),术后3个月内总体并发症发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论结构-过程-结果三维质量评价模式可以作为膀胱癌腹壁尿路造口患者全程化管理的有效干预模式,值得临床推广应用。
- 李瑞欧密李艳杨瑛王春晖吕凤琳
- 关键词：膀胱癌膀胱全切尿流改道
- 膀胱肿瘤BIU-87细胞耐药诱导及逆转的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的诱导BIU-87细胞对羟基喜树碱(HCPT)产生耐药,检测多药耐药相关蛋白和交叉耐药,观察维拉帕米(VPM)逆转耐药性的效果.方法用间隙给药法诱导BIU-87细胞对HCPT产生耐药,MTT法测定交叉耐药性,细胞免疫组化染色检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、Bcl-2和生存素Survivin,MTT法和流式细胞仪测定VPM逆转耐药性的效果.结果耐药诱导5个月,BIU-87/HCPT细胞对HCPT、长春新碱(VCR)、丝列霉素(MMC)和顺铂(CDDP)的耐药性均有提高,其中HCPT为55倍,VCR为26.88倍,而对阿霉素(ADM)耐药性提高不明显.经检测P-gp和MRP1均为++,Bcl-2和Survivin均为+++.VPM逆转耐药性有一定效果.结论BIU-87/HCPT细胞具有多药耐药性,对VCR的耐药指数最大,VPM能逆转其耐药性,但逆转效率低于文献报道,这些结果都可能与肿瘤细胞产生多药耐药的机制复杂和BIU-87/HCPT细胞的Bcl-2与Survivin的表达量比P-gp与MRP1高有关.
- 王辉涛王剑松黄训丰詹辉王春晖袁顺辉
- 关键词：羟基喜树碱多药耐药膀胱肿瘤生存素
