殷杰
- 作品数:37 被引量:75H指数:5
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省基础研究计划卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用
- 本发明公开了抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用,所述单克隆抗体SZ175属于IgG1亚类抗体,由杂交瘤细胞株SZ175(2B10)产生;其中,杂交瘤细胞株SZ175(2B10)的保藏编号为CCTCC ...
- 马珍妮殷杰凌婧苏健谢丽倩张婷婷阮长耿
- 文献传递
- 人外周血来源的过度生长内皮细胞的分离、培养及鉴定被引量:3
- 2014年
- 与内皮干细胞相比,外周血来源的过度生长内皮细胞(blood outgrowth endothelial cells,BOECs)富含血管新生和细胞黏附所需的蛋白,生物学特性更像内皮细胞;同时它克服了成熟的人脐血内皮细胞体外培养扩增量少和表型易发生改变的缺点,成为一种研究血管异常相关性疾病的新工具。本研究旨在建立从人外周血中体外培养、扩增BOECs,并进行鉴定的方法。采集外周血,梯度离心获得单个核细胞,接种于胶原铺板的细胞培养皿上,EGM-2培养4周。观察BOECs的形态学特征,流式细胞术分析细胞表面抗原表达。血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)多聚体分析BOECs上清v WF多聚体分布,荧光共聚焦显微镜鉴定细胞内v WF的贮存及v WF的刺激分泌。结果表明,体外诱导培养4周左右,出现克隆性生长的细胞集落,BOECs呈现"铺路石"样外观。经过3周左右的扩增后,过度生长的内皮细胞表达CD31、CD34、EPCR阳性,CD14、CD45、CD133阴性。收集BOECs上清,进行v WF多聚体分析,与正常血浆相比v WF多聚体分布无差异。在荧光共聚焦显微镜下观察,BOECs内贮存v WF,加入佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后,细胞内v WF增加,细胞表面可见v WF丝状结构。结论:本研究运用该实验方法在国内首次实现了人BOECs的体外培养、扩增及鉴定。该方法可以为血管性血友病病人发病机制的探讨提供天然的细胞模型,并可能为病人基因治疗提供新工具。
- 殷杰马珍妮赵小娟阮长耿
- 关键词:外周血细胞表型血管性血友病因子
- 维生素K依赖性凝血因子的临床意义被引量:16
- 2020年
- 维生素K(VK)是维持正常凝血过程必不可少的维生素。凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ均是VK依赖性凝血因子。VK缺乏引起相关凝血因子活性下降,导致维生素K依赖性凝血因子缺乏症(VKCFD),临床上患者表现为各种出血症状,补充VK后出血症状可被纠正。我们现对VK的凝血作用、VKCFD的诊治及VK拮抗剂的应用进行综述。
- 殷杰王兆钺
- 关键词:维生素K凝血因子抗凝
- 抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ176及其应用
- 本发明公开了抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ176及其应用,所述单克隆抗体SZ176属于IgG1亚类抗体,由杂交瘤细胞株SZ176(3C1)产生;其中,杂交瘤细胞株SZ176(3C1)的保藏编号为CCTCC NO...
- 马珍妮殷杰凌婧沈飞陈少慕张之蕙赵赟霄阮长耿
- 血管性血友病因子前导肽的作用及临床价值被引量:3
- 2015年
- 血管性血友病因子(von Willebrand factor, VWF)是血浆中参与止血和凝血过程的重要蛋白分子。在初期止血中, VWF一头连接在受损的内皮细胞表面,一头锚定血小板表面的糖蛋白Ⅰb,介导血小板在血管损伤部位发生黏附反应。在二期止血中,VWF作为凝血因子Ⅷ(FⅧ)的载体,保护血液循环中的FⅧ不被降解,从而延长了FⅧ的半衰期。VWF的前导肽(VWF propeptide, VWFpp)在细胞合成、分泌等过程中发挥重要作用,VWFpp突变可导致血管性血友病。近年来研究表明,VWFpp在VWD和其他疾病的诊断中也具有重要价值。
- 殷杰阮长耿
- 关键词:血管性血友病因子血小板表面VWF蛋白分子凝血过程
- PLASMIC积分对血栓性血小板减少性紫癜和弥散性血管内凝血鉴别的临床价值被引量:3
- 2018年
- 目的比较PLASMIC积分在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)和弥散性血管内凝血(DIC)患者中的差异,评价该积分系统对于两种疾病鉴别诊断的临床价值。方法回顾性分析24例TTP和41例DIC患者的临床资料,以及血小板计数、平均红细胞体积、间接胆红素、肌酐和凝血酶原时间.国际标准化比值,统计PLASMIC积分。结果根据PLASMIC积分预测伴有ADAMTSl3严重缺乏的TTP的危险度分层,24例TTP患者中,3例(12.5%)存在中度风险,21例(87.5%)存在高度风险。而在41例DIC患者中,38例(92.7%)存在低度风险,2例(4.9%)存在中度风险,仅有1例(2.4%)患者存在高度风险。在65例患者中,PLASMIC积分达高度风险对于TTP诊断的敏感性为87.5%,特异性为97.6%。结论PLASMIC积分系统高度风险的患者诊断为TTP的可能性大。该积分系统对于TTP和DIC的鉴别诊断有较高的临床价值。
- 殷杰余自强孔丹青王兆钺金钧王俊王雪明苏健张威阮长耿
- 关键词:血栓性血小板减少性紫癜
- 获得性血管性血友病三例报告并文献复习被引量:3
- 2016年
- 目的加深对获得性血管性血友病(AVWS)的认识。方法对3例AVWS患者的临床资料进行分析,并复习相关文献。结果①例1,男,70岁,诊断:华氏巨球蛋白血症、AVWS。表现为自发鼻腔、皮肤出血,血管性血友病因子抗原(VWF:Ag)16%。予输注冷沉淀、VDT方案(硼替佐米+沙利度胺+地塞米松)化疗2个疗程,获部分缓解,随访半年无活动性出血。②例2,女,48岁,诊断:意义未明的单克隆丙种球蛋白m症、AVWS。表现为反复齿龈出血,VwF:Ag7%,给予观察随诊。③例3,男,50岁,诊断:意义未明的单克隆丙种球蛋白血症、AVWS。表现为轻微外伤后肌肉血肿,VWF:Ag12%,给予血浆、冷沉淀、大剂量静脉丙种球蛋白输注及利妥昔单抗治疗,随访半年中仍有反复出血。结论AVWS临床表现具有异质性;对原因不明的出血患者应进行血浆VWF:Ag检测;成年AVWS患者应注意寻找原发病;治疗包括控制出血、原发病的治疗和预防出血;预后与原发病有关。
- 欧阳皖雁余自强殷杰赵小娟王兆钺张威马珍妮苏健白霞阮长耿
- 关键词:血管性血友病获得性WALDENSTROM巨球蛋白血症
- VWF前导肽对D1区VWF突变体的作用机制研究
- 2022年
- 目的:探讨野生型VWFpp与前导肽D1区VWF突变体共转染是否能纠正D1区突变引起的VWF缺陷。方法:将4个定点诱变的VWF D1区突变体质粒单独瞬时转染HEK 293细胞;VWF D1区突变体质粒与VWFpp质粒共同瞬时转染HEK 293细胞,通过ELISA、垂直多聚体电泳分析细胞上清液及裂解液中的VWF,免疫荧光共聚焦显微镜下观察细胞内质网中VWF的滞留。结果:在垂直多聚体分析中,VWF突变体和VWFpp共表达后VWF多聚体条带消失。共表达后,无论是细胞上清液还是裂解液中VWF抗原含量均减少。在免疫荧光共聚焦显微镜下,共表达后,虽然细胞内VWF含量减少,但VWF在内质网滞留比率下降。结论:VWFpp虽然能减少D1区VWF突变体在内质网的滞留,促进了VWF在亚细胞器间的转运,但进一步抑制了D1区突变体VWF的合成及分泌。
- 虞秀群马珍妮凌婧赵赟霄殷杰余自强阮长耿
- 关键词:血管性血友病因子生物合成
- 硼替佐米、糖皮质激素为基础的联合方案治疗6例复发/难治免疫性血栓性血小板减少性紫癜被引量:1
- 2023年
- 目的观察硼替佐米联合糖皮质激素为基础的联合治疗方案在复发/难治免疫性血栓性血小板减少性紫癜(iTTP)中的疗效和不良反应。方法纳入6例复发/难治iTTP患者,采用硼替佐米联合糖皮质激素为基础的联合方案治疗。观察患者临床缓解情况、ADAMTS13活性/ADAMTS13抑制物变化及治疗相关不良反应的发生情况。结果6例iTTP患者中,男2例,女4例,中位年龄为21.5(18~68)岁,难治性1例,复发性5例。糖皮质激素参照泼尼松1 mg·kg^(-1)·d^(-1)等效剂量给药,获得临床缓解后逐渐减量;硼替佐米1.3 mg/m^(2)皮下注射,第1、4、8、11天,28 d一个疗程,共2个疗程。6例iTTP患者均获得临床缓解,ADMATS13活性恢复正常,ADAMTS13抑制物转为阴性。不良反应包括血小板减少、末梢神经炎和腹痛,均恢复正常。中位随访26(9~41)个月,5例患者持续缓解,1例患者16个月后复发。结论以硼替佐米硼替佐米联合糖皮质激素为基础的联合治疗对复发/难治iTTP具有较满意的疗效且不良反应可控。
- 殷杰田竑孔丹青李云顾骋圆吴德沛余自强
- 关键词:硼替佐米血栓性血小板减少性紫癜
- 抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立被引量:1
- 2017年
- 目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截短型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠。用ELISA方法测定免疫小鼠与ADAMTS13-T7蛋白的抗血清效价。取小鼠脾脏,制成单细胞悬液与SP2/0骨髓瘤细胞以10∶1的比例混合,进行细胞的融合,并将杂交瘤细胞稀释培养。2周后选生长良好的克隆孔检测,阳性克隆孔扩大培养并再次检测。结果:获得真核表达截短型血管性血友病因子裂解蛋白酶ADAMTS13-T7蛋白纯品。利用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,ELISA检测免疫后抗血清效价约为1∶20 000。利用杂交瘤技术通过融合,获得多株分泌抗重组ADAM TS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株。将其中的30株转入液氮中冻存,以备进一步分选及功能研究。结论:融合获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株,为进一步筛选出具有一定功能活性的单克隆抗体及研究ADAMTS13结构和功能提供更多的有力工具。
- 凌婧马珍妮殷杰沈飞谢丽倩赵云霄阮长耿
- 关键词:ADAMTS13真核表达杂交瘤单克隆抗体