成君军
- 作品数：9 被引量：28H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 对虾白斑综合症病毒的一种结合蛋白BP53的表达与功能研究
- 对虾白斑综合症病毒/(white spot syndrome virus,WSSV/)自1992年首次暴发以来对全球虾类养殖业造成严重危害,是广受关注的甲壳类病毒新种/(Whispovirus/)。各国相关研究的焦点逐渐...
- 成君军
- 关键词：WSSV同源克隆系统树
- 文献传递
- 真核表达载体pcDNA3.1(+)-vp28的构建及其在细胞中的表达被引量：3
- 2010年
- [目的]为研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白与虾细胞之间的作用机制奠定基础。[方法]采用PCR扩增方法构建含白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-vp28,用磷酸钙共沉淀法将重组质粒转染到293T细胞中,采用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。[结果]VP28的PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中呈现出1条634bp左右的条带,与GenBank中vp28的序列完全一致。对pcDNA3.1(+)-vp28转染后的阳性单克隆菌落进行PCR鉴定、扩大培养和质粒提取,并对所得质粒进行HindⅢ和BamⅢ双酶切,获得了5409和610bp左右的2条带,与预期结果一致;所获扩增产物与vp28序列完全一致,说明重组质粒pcDNA3.1(+)-vp28被成功转染到293T细胞中;SDS-PAGE和Westernblot检测结果显示,pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中的表达产物与预期结果相符。[结论]pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中可成功表达VP28。
- 姜坤黄健张峥成君军石正丽刘庆慧
- 关键词：WSSVVP28细胞转染293T细胞
- 中国明对虾肝胰腺细小病毒全基因组的克隆及序列分析被引量：2
- 2011年
- 中国明对虾肝胰腺细小病毒是一种单链、线性DNA病毒。本研究利用DNA末端加尾和嵌套PCR首次完成了对虾肝胰腺细小病毒(hepatopancreatic parvovirus,HPV)中国分离株(HPV-Pc)全基因组序列的测定,研究结果表明,HPV-Pc株(GenBank登录号GU371276)的全基因组由6 085个核苷酸组成,包含3个开放阅读框(ORF)(分别代表ns1、ns2和cp基因)和2个非编码区。ORF1、ORF2和ORF3分别编码由427、578和821个氨基酸组成的蛋白,分子量分别为50.4 kD、68.2 kD和92 kD。分析HPV-Pc基因组结构,发现该基因组没有末端反向重复序列(ITR),cp基因编码的CP区有HPV特异的"GAA"正向重复序列,及富含甘氨酸的上游和下游不同位置存在精氯酸残基,可造成蛋白裂解。不同地区、不同对虾HPV基因组有较大差异,HPV-Pc株基因组与其他已知HPV序列同源性在78%～91%之间,差异遍布整个序列中。将HPV-Pc各基因片段与已报道的其他地区HPV相应序列进行比较,结果表明,HPV-Pc各基因片段与AY008257(韩国株)同源性最高。与已知HPV代表株的NS2、NS1和CP蛋白氨基酸序列同源性比较也显示,HPV-Pc株与韩国株同源性最高。这些特征表明HPV-Pc属于细小病毒科的一个新分离株。
- 张峥黄倢高强成君军王明森
- 关键词：中国明对虾基因组序列
- 凡纳滨对虾造血激素基因全长序列分析及其克隆与表达被引量：1
- 2012年
- 虾造血激素(astakine,AST)是节肢动物中具有促进造血组织细胞分化和增殖的一种细胞因子。在对白斑综合征病毒(WSSV)感染分子机制的研究中发现,WSSV的一个可能受体蛋白与AST存在特异性结合。为进一步了解WSSV感染与对虾细胞分化之间的关系,本研究应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术,成功克隆了凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei造血激素基因(lvast)全长cDNA(GenBank登录号:HM594944),并对该基因进行了生物信息学分析。lvast全长共1846bp,含有1个372bp的开放阅读框,编码124个氨基酸,估算分子量为13.3kD。其编码的氨基酸序列包含一个前动力蛋白(Prokineticin)结构域。基因序列和氨基酸序列同源性比较表明,凡纳滨对虾造血激素(LvAST)与斑节对虾和软尾太平蝲蛄AST同源性较高,与脊椎动物的同源性较低。通过构建包含lvast基因ORF重组表达载体pBAD/gIIIA-lvast,本研究成功表达出与预期相符合的目的蛋白,为进一步研究LvAST的结构与功能提供了理论依据和实验基础。
- 梁高峰梁艳成君军张士璀黄倢
- 关键词：凡纳滨对虾RACE原核表达
- 美人鱼发光杆菌对凡纳滨对虾非特异性免疫功能及抗病力的影响被引量：20
- 2010年
- 在基础饲料中分别添加0.1%和1%美人鱼发光杆菌灭活菌、0.1%美人鱼发光杆菌活菌配制成3种免疫实验饲料,以基础饲料为空白对照组饲料,每组设3个平行样。对个体质量为(4.83±0.36)g的凡纳滨对虾进行为期20 d的饲养实验,分别在0、5、10、15和20d进行取样,以血清中的酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(UL)活性为免疫指标,探讨了美人鱼发光杆菌作为免疫制剂对凡纳滨对虾非特异性免疫效应的影响;在投喂免疫饲料后的第22天,按0.004 2 kg/kg体重的剂量,直接投喂对虾白斑综合征病毒(WSSV)病料,并记录累积死亡率。结果表明,美人鱼发光杆菌免疫实验组对凡纳滨对虾血清中PO、ACP、AKP、UL和SOD活性影响明显高于对照组,并且在饲料中添加美人鱼发光杆菌后,明显提高了对虾抵御WSSV感染的能力。其中0.1%美人鱼发光杆菌活菌实验组的抗病毒感染能力最强,WSSV感染14d内累计死亡率为63.3%±5.8%;而对照组为96.7%±3.3%。研究表明,美人鱼发光杆菌添加在对虾饲料中能提高凡纳滨对虾非特异性免疫水平,增强抵抗疾病的能力,将其作为对虾免疫增强剂具有良好的应用前景。
- 兰萍宋晓玲张辉成君军
- 关键词：凡纳滨对虾非特异性免疫抗病力WSSV
- 细胞表面ATP合酶β亚基及其互作蛋白在WSSV感染中的作用
- 为了更好的阐明病毒致病的分子机理，充分了解病毒与其宿主相互作用，特别是鉴定在病毒感染过程中具有重要作用的宿主与病毒的结合蛋白，可以为研制预防和治疗病毒病的技术手段提供理论支撑。
- 梁艳徐萌霖王晓雯高晓霄成君军李晨黄倢
- 关键词：对虾WSSV受体
- WSSV的可能受体靶点与F1-ATP合酶β亚基在不同宿主中的序列差异
- 梁艳成君军梁高峰黄倢
- 对虾细胞表面ATP合酶β亚基参与WSSV感染的功能分析
- 白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是养殖对虾主要病毒病原之一,给对虾养殖业造成较严重的经济损失。阐明病毒致病的分子机理,特别是充分了解病毒与其宿主相互作用的本质,可以为研制预防...
- 梁艳徐萌霖王晓雯高晓霄成君军李晨黄倢
- 关键词：对虾WSSVATP
- 质膜异位F1F0-ATP合成酶研究进展被引量：1
- 2008年
- F1F0-ATP合成酶过去被认为是严格的线粒体内膜蛋白,近年来的研究表明,该酶的一些亚基广泛分布于一些肿瘤细胞以及脂肪细胞等的质膜表面,称为质膜异位F1F0-ATP合成酶。论文综述质膜异位F1F0-ATP合成酶的发现,发生异位的可能机制以及在质膜表面F1F0-ATP合成酶作为受体蛋白参与的一些生物学现象,也指出了质膜异位F1F0-ATP合成酶在抗肿瘤、抗肥胖,以及其他领域的应用前景。
- 成君军黄倢张士璀
- 关键词：质膜受体蛋白
