卢权威
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离与生物学特性鉴定被引量：3
- 2013年
- 采用PCR方法对河南采集的疑似PPV病料进行PCR检测，PCR检测为阳性的病料接种猪睾丸细胞，分离到1株病毒，命名为HP104。通过观察细胞病变（CPE）、病毒滴度TCID50和血凝效价的测定、理化特性试验等研究病毒的特性，利用电镜观察病毒的形态，NSI基因PCR扩增及测序分析。该病毒在sT细胞上连续盲传10代后，细胞出现了较稳定的CPE，传代至第15代时病毒血凝效价基本稳定为2，到第20代时TcID50达到10TCID／0．1mL左右。该毒株对热、pH3．0酸、氯仿、胰蛋白酶有抗性。在电镜下可观察到近似球形的病毒粒子，大小约23～26nm。PCR扩增产物与预期一致，与其他PPV毒株NSI基因序列同源性高达99％以上。该病毒特征与猪细小病毒特征基本相符，初步证实分离的病毒为猪细小病毒。
- 吴宇阳陈龙彪崔保安王林青卢权威钞安军李坤魏战勇陈红英
- 关键词：猪细小病毒
- 猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析被引量：5
- 2012年
- 利用PCR方法,对河南郑州、南阳、焦作等地采集的疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,接种无PCV污染的PK-15细胞中盲传6代,克隆11株PCV2全基因组并进行序列分析。结果表明,11株PCV2中有10株基因组全长为1 767bp,基因组分型为PCV2b,1株为1 768bp,说明PCV2b是河南省断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)发生的主要因素;11个毒株的同源性位于94.9%～100%,与其他毒株的同源性为94.7%～100%;10株基因组为1 767bp的毒株处于一大分支上,遗传进化比较稳定;本试验为PCV2在河南地区的分子流行病学、遗传变异及防治奠定了基础。
- 王亚丹卢权威陈红英崔保安王淑娟朱前磊王子馨钞安军
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因序列克隆
- 猪TOLL样受体7全基因的扩增、克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2013年
- 根据猪Toll样受体7基因(TLR7)序列设计、合成1对引物,直接从三元猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增三元猪TLR7全基因,并进行克隆和测序。测序结果表明,获得了三元猪TLR7全基因序列,其大小为3 160 bp,包含一个完整阅读框(3 153 bp),编码1 051个氨基酸残基,有15个潜在的N-糖基化位点和4个潜在的磷酸化位点,信号肽切割部位位于第29～30位氨基酸之间,跨膜基因序列为第844～866位。TLR7基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。三元猪TLR7基因的成功克隆为进一步研究猪TLR7基因表达、生物学功能、揭示ssRNA病毒入侵宿主的致病机制以及猪抗病毒免疫及育种的相关研究奠定了基础。
- 钞安军吴宇阳李坤卢权威崔保安陈红英
- 关键词：三元猪克隆进化分析
- 猪圆环病毒2型和猪细小病毒混合感染的PCR检测被引量：1
- 2013年
- 2012年9月河南省新乡市某养猪场发生一例以初产母猪流产、死产,断奶仔猪精神沉郁、呼吸困难、食欲不振、轻微腹泻、渐进性消瘦为特征的疾病。采用PCR技术进行检测,结果表明猪圆环病毒2型和猪细小病毒均为阳性,结合发病情况、临床症状及剖检变化,初步确定为PCV2和PPV混合感染。
- 吴宇阳陈龙彪王林青崔保安卢权威钞安军李坤陈红英魏战勇
- 关键词：猪圆环病毒2型猪细小病毒PCR检测
- 2株猪圆环病毒2型的分离鉴定及全基因组序列分析被引量：6
- 2013年
- 【目的】对河南部分地区疑似猪圆环病毒2型（Porcinecircovirustype2，PCV2）感染猪进行病毒分离鉴定，并对分离株的全基因组序列进行分析。【方法】对郑州、焦作两地疑似PCV2感染的猪淋巴结、脾脏和肺脏组织进行PCR检测，对检测为阳性的病料进行PCV2的分离，利用间接免疫荧光试验和PCR扩增进行初步鉴定。用PCR扩增PCV2全基因，经克隆、测序后，用MEGA5．1软件对克隆的序列与GenBank上获取的其他PCV2全基因组进行序列比对。【结果】分离到2株病毒，分别命名为ZHENGZ-12株和JIAOZ-12株。间接免疫荧光试验结果显示，感染病毒的细胞出现了特异的亮绿色荧光。2个分离株全基因组长度均为1767bp，与国内外PCV2参考毒株核苷酸序列同源性为92．6％～99．9％，2个毒株之间的核苷酸序列同源性为96．0％，与PCV1核苷酸序列同源性分别为74．6％和77．7％。系统进化树分析结果显示，2个PCV2分离株同国内外分离株的亲缘关系很近；PCV2核苷酸序列比较稳定，其进化不存在明显的地域相关性。【结论】初步证实分离病毒为PCV2，ZHENGZ-12株基因型为PCV-2a，JIAOZ-12株基因型为PCV-2b。
- 卢权威郭官鹏崔保安陈红英魏战勇郭敬吴宇阳李坤钞安军
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒分离全基因组
- 猪细环病毒两种基因型双重PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 为建立检测猪细环病毒两种基因型(PTTV1和PTTV2)的双重PCR方法,本研究根据GenBank中PTTV1、PTTV2的UTR基因序列,设计合成了2对特异引物,并通过对扩增条件的筛选,建立了PTTV1和PTTV2的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PTTV1的324 bp和PTTV2的522 bp特异性片段,而扩增猪圆环病毒2型和猪细小病毒DNA结果均为阴性,对PTTV1和PTTV2的最低检出量分别为100 copies和10 copies。该方法适合对PTTV1和PTTV2的联合检测。
- 李坤钞安军王子馨王淑娟朱前磊吴宇阳卢权威陈红英
- 关键词：双重PCR
- 一种猪圆环病毒Ⅱ型毒株
- 本发明公开了一种猪圆环病毒Ⅱ型毒株，猪圆环病毒Ⅱ型(Circoviridae)，CCTCC NO：V201312。本发明对PCV2体外培养增殖条件进行优化并筛选出一株对PCV2敏感性较高的命名为L8的PK15细胞克隆株，...
- 崔保安陈红英卢权威郭官鹏郭敬李新生魏战勇
- 文献传递
- 河南PCV2株的分离鉴定及增殖敏感PK15细胞系的克隆与筛选
- PCV2是圆环病毒科家族成员之一,无囊膜,单股环状DNA病毒。基因全长1767-1768bp。在其反义方向有两个主要的开放阅读框。ORF1编码其复制蛋白(Rep),ORF2编码其衣壳蛋白(Cap),含有免疫显性的抗原表位...
- 卢权威
- 关键词：圆环病毒2型细胞克隆
- 文献传递
