金迎新
- 作品数：7 被引量：33H指数：4
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- 知母皂苷元对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用研究被引量：11
- 2013年
- 目的观察知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用。方法大鼠乳鼠大脑皮层神经元,培养7 d后用于实验。倒置相差显微镜观察神经元树突生长发育情况;用MTT法测定细胞活力;Ho-echst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;Western印迹法检测神经元SYP、caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达水平。结果形态学观察结果显示谷氨酸可明显抑制神经元树突的生长发育,表现为神经元树突总长度明显降低、一级树突数目明显减少、最大分支级数明显减少及胞体面积缩小。SAR(10、30、100μmol.L-1)可明显抑制谷氨酸对神经元树突生长发育的抑制作用,并呈明显浓度依赖。MTT和Ho-echst33258核染色结果显示谷氨酸可降低神经元细胞活力及增加神经元细胞凋亡百分比。SAR(10、30、100μmol.L-1)能明显对抗谷氨酸引起的神经元细胞活力降低及细胞凋亡百分比增加。Western印迹结果显示谷氨酸可明显降低SYP蛋白表达水平及增加活性caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达水平。SAR(10、30、100μmol.L-1)可明显对抗谷氨酸引起SYP蛋白表达降低及活性caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达增加。结论知母皂苷元能够明显对抗谷氨酸引起的皮层神经元损伤作用。
- 王琦隋海娟屈文慧郁盛雪金迎新刘卓金英
- 关键词：知母皂苷元谷氨酸皮层神经元突触素
- 阿托伐他汀对体外培养皮层神经元Rho-GTP酶家族的影响被引量：3
- 2013年
- 阿托伐他汀（atorvastatin，Ato）属于他汀类调血脂类药物。许多研究表明他汀类药物可以降低AD的患病风险，但机制尚不完全清楚。另有很多证据显示他汀类药物有不依赖于其降脂作用的神经细胞保护作用。他汀类药物防治AD的机制除了与降低血清胆固醇有关外，
- 金迎新隋海娟屈文慧郁盛雪张玲玲金英
- 关键词：阿托伐他汀皮层神经元RHO异戊二烯甲羟戊酸
- 知母皂苷元对高糖引起的体外培养大鼠海马神经元损伤的保护作用被引量：13
- 2013年
- 目的探讨知母皂苷元(sarsasapogenin,Sar)对高糖引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取海马,进行海马神经元体外培养,培养7 d用于实验。实验分为正常对照组、高糖组、高糖+Sar(10、30、100μmol.L-1)组;对照组:加入等量含0.1%DMSO培养基;高糖处理组:分别加入葡萄糖(30、50、100 mmol.L-1)作用48 h;高糖+Sar(10、30、100μmol.L-1)组:先加入不同浓度Sar(10、30、100μmol.L-1)作用1 h,然后加入葡萄糖(50 mmol.L-1)作用48 h;应用MTT方法观察细胞活力,免疫荧光和Western免疫印迹方法观察神经元突触素表达的改变。应用Hoechst 33258核染色检测神经元凋亡。应用Western免疫印迹方法观察caspase-3和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白表达改变。结果加入葡萄糖(30、50、100 mmol.L-1)作用48 h可使培养神经元细胞活力明显降低,神经元突触素蛋白表达明显降低。另外高糖也可引起神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较对照组明显提高。在加入高糖前加入不同浓度Sar(10、30、100μmol.L-1)可明显对抗高糖引起的这些变化。培养海马神经元突触素蛋白表达较高糖组(50 mmol.L-1)明显增加,神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较高糖组明显降低。结论 Sar对高糖引起的海马神经元损伤具有明显的保护作用。
- 肖复茜李洪秀隋海娟刘卓屈文慧郁盛雪金迎新金英
- 关键词：知母皂苷元海马神经元高糖突触素
- 阿托伐他汀通过激活PI3K/Akt/mTOR信号转导而促进神经元突起生长被引量：1
- 2013年
- 目的探讨阿托伐他汀(Ato)对体外培养大鼠皮质神经元突起生长促进作用的信号转导机制。方法 取培养7 d大脑皮质神经元,分为Ato 10μmo.lL-1作用48 h组和阻断剂+Ato组,先分别加入阻断剂PD98059 50μmo.l L-1、LY294002 30μmol.L-1、曲西立滨(TCBN)2.5μmol.L-1和西罗莫司(雷帕霉素,Rapa)100 nmo.l L-1作用1 h,再加入Ato共同作用48 h。应用倒置相差显微镜观察神经元突起生长状况;Western印迹法检测磷酸化的磷酸肌醇依赖激酶1(PDK1)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)、磷酸化西罗莫司靶蛋白(mTOR)、磷酸化的核糖体S6激酶(p70S6K)和磷酸化的真核翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4E-BP1)的表达。结果 形态学观察结果显示,Ato 10μmo.lL-1组可明显促进突起生长,表现为突起总长度增加、一级突起数目增多、末端分支数增多及胞体面积增大。PD98059,LY294002,TCBN和Rapa均可阻断Ato对神经元突起生长的促进作用。Western印迹结果显示,Ato 10μmo.lL-1可显著上调p-PDK1,p-Akt(Ser473),p-mTOR,p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平(P<0.01)。LY294002可显著阻断Ato引起的p-PDK1,p-Akt(Ser473)蛋白表达水平增加(P<0.01)。TCBN可显著阻断Ato引起的p-mTOR蛋白表达水平增加(P<0.01)。Rapa可明显阻断Ato引起的p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平增加(P<0.01)。结论 Ato对体外培养皮质神经元突起发育的促进作用可能与激动MEK/ERK信号转导通路有一定的关系,主要可能与通过激活PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。
- 屈文慧郁盛雪隋海娟金迎新金向楠金英
- 关键词：阿托伐他汀皮质神经元突起生长蛋白激酶B哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 知母皂苷元改善淀粉样β蛋白引起的体外培养乳大鼠海马神经元的损伤被引量：7
- 2013年
- 目的探讨知母皂苷元(Sar)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d,先加入Sar 10,30和100μmo.lL-1作用1 h,然后加入Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色观察神经元树突的生长;应用Hoechst33258核染色检测神经元凋亡;Western蛋白质印迹法检测海马神经元突触囊泡蛋白(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD95)和活性胱天蛋白酶3表达。结果加入Aβ1-42作用24 h,可使培养海马神经元树突静脉曲张样改变和突起回缩,树突总长度和末梢分枝数明显减少。与正常对照组相比,SYP和PSD95蛋白表达水平明显降低(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与Aβ1-42模型组相比,先分别加入Sar 30和100μmo.lL-1可明显对抗Aβ1-42引起的这些改变,培养海马神经元树突总长度(μm)和末梢分枝数从277±76和6±2分别增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神经元SYP和PSD95蛋白表达水平明显增加(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3表达水平明显降低(P<0.01)。结论 Sar能够改善Aβ1-42引起的海马神经元损伤。
- 王立军金英隋海娟屈文慧郁盛雪金迎新李洪秀
- 关键词：知母皂苷元淀粉样Β蛋白海马神经元突触囊泡蛋白
- 知母皂苷元通过上调PI3K/Akt信号通路减轻淀粉样β蛋白诱导的乳大鼠海马神经元突触损伤被引量：8
- 2013年
- 目的探讨知母皂苷元(Sar)减轻淀粉样β蛋白(Aβ)诱导的海马神经元突触损伤的信号转导机制。方法取出生0～24 h SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d。海马神经元分别加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002 30μmo.lL-1或蛋白激酶B(Akt)特异性阻断剂曲西立滨1μmol.L-11 h后,加Sar 30和100μmo.l L-1作用1 h,再加Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用突触囊泡蛋白(SYP)免疫荧光染色观察突触的改变。Western蛋白质印迹法检测海马神经元SYP、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)表达水平的改变。结果与正常对照组相比,Aβ1-42组培养的海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显减低(P<0.01)。与Aβ1-42组相比,Aβ1-42+Sar 30和100μmo.l L-1组海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显增加(P<0.01)。给予LY294002作用后,SYP和p-Akt表达水平明显降低(P<0.05)。给予曲西立滨作用后,SYP和p-GSK3β表达水平明显降低(P<0.05)。单独给予LY294002,海马神经元SYP表达无变化,p-Akt表达水平明显降低(P<0.01)。单独给予曲西立滨,海马神经元SYP和p-GSK3β蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论 Sar通过上调PI3K/Akt/GSK3β信号通路对抗Aβ1-42诱导的海马神经元突触损伤。
- 卢英金英隋海娟刘卓屈文慧郁盛雪金迎新李洪秀
- 关键词：知母皂苷元海马神经元突触囊泡蛋白
- 阿托伐他汀促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达被引量：2
- 2013年
- 目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对体外培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元树突生长及突触相关蛋白是否有影响。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取大脑皮层,进行皮层神经元体外培养,神经元培养4 d后用于实验。实验分为对照组、不同浓度Ato处理组、Ato处理不同时间组;对照组:加入等量含0.1%DMSO培养基;Ato处理组:培养4 d神经元,加入不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h;Ato处理时间组:将Ato 5μmol.L-1加入培养4 d神经元,分别作用12、24、48 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突的生长,应用Tsview软件测量神经元树突分支总长度(totaldendritic branch length,TDBL)和一级树突数目(primary-or-der dendrite number,PDN);应用免疫荧光染色法和Westernblot检测皮层神经元突触素(synaptophysin,SYP)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)蛋白表达的改变。结果给予不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h后,神经元TDBL较对照组明显增加(P<0.01),神经元PDN较对照组呈浓度依赖性增加,Ato(0.1、1μmol.L-1)时可增加神经元PDN(P<0.05),Ato(5、10μmol.L-1)时明显增加神经元PDN(P<0.01);Ato 5μmol.L-1作用24 h后可增加神经元TDBL、PDN(P<0.05),Ato5μmol.L-1作用48 h后可明显增加神经元TDBL、PDN(P<0.01);应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突TDBL和PDN明显增加;免疫荧光和Western blot结果显示Ato可增加SYP、PSD-95表达水平。结论 Ato促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达。
- 郁盛雪屈文慧隋海娟金迎新金向楠金英
- 关键词：阿托伐他汀突触蛋白突触素突触
