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美达霉素产生菌中立体专一性酮基还原酶基因med-ORF12的表达: 2012年; 美达霉素是链霉菌产生的具有强抗肿瘤活性的芳香聚酮类抗生素,其砒喃环并内酯结构对于其抗癌活性非常重要。位于美达霉素生物合成基因簇中的基因med-ORF12编码立体专一性酮基还原酶,可能参与美达霉素的砒喃环并内酯结构中手性中心(C3S)的形成,但在美达霉素产生菌中的功能和表达还未曾研究。【目的和方法】为了研究med-ORF12在野生菌中的表达情况以及与美达霉素生物合成的关系,本文采用了原核表达、抗体制备、免疫杂交等技术方法对这个基因展开了体内表达研究。【结果】首先利用pET载体建立了med-ORF12的原核表达系统,在优化诱导表达条件的基础上获得了可溶性目的蛋白,制备了相应的多抗血清;然后利用多抗血清对美达霉素产生菌中的基因med-ORF12的表达情况进行了检测,表明在美达霉素产生菌中参与次生代谢的med-ORF12在稳定期大量表达,同时伴随美达霉素的大量积累。【结论】这些结果表明在美达霉素产生菌中,基因med-ORF12参与次生代谢,其表达与美达霉素生物合成有一定相关性。; 孙锐刘明宫彩霞王蔚曾爱兵李爱英; 关键词：链霉菌次生代谢

极端环境分离的氧化微杆菌的嗜碱性及其基因组文库的构建被引量：2: 2011年; 从极端环境分离的微生物因适应特殊的生境而具有特殊的生理生化性质,已经成为重要的生物研究材料,而目前关于嗜碱氧化微杆菌的相关研究却非常少。为了解一株从新疆碱湖环境中分离的氧化微杆菌HSL10的生理特性以及进行其功能基因的克隆和分析,文章首先对菌株HSL10进行生长特性的研究,发现此菌株在培养基pH 5~12范围内生长良好,且生长较快;然后提取其总DNA建立基因组文库,重组率为100%。试验结果说明从碱性环境中分离的氧化微杆菌菌株HSL10具有嗜碱性,其基因组文库的构建可为相关功能基因的克隆和分析打下基础。; 吴小丹刘明王蔚万娟李爱英; 关键词：极端环境微生物基因组文库

链霉菌来源的苯并异色烷醌家族抗生素的生物合成被引量：1: 2012年; 苯并异色烷醌(benzoisochromanequinones,BIQs)家族抗生素是由链霉菌产生的聚酮类抗生素,其芳香聚酮母核结构中含有并联的两个芳香环和一个吡喃环,具有抗菌、抗肿瘤等多种生物学活性。BIQ抗生素聚酮链的早期生物合成过程代表了芳香聚酮抗生素母核的典型合成机制,而不同的后期修饰则决定了它们结构和生物学活性的多样性。在过去的二十几年中,以放线紫红素和美达霉素为研究重点,BIQ家族抗生素的生物合成机制逐渐得到揭示,但在后期结构修饰方面仍有许多问题有待解决。本文对BIQ家族抗生素的生物合成机制研究进行了综述,比较了不同BIQ家族抗生素结构特点、生物学活性,并重点阐述了它们生物合成中的后期结构修饰和调控过程的研究进展,并对BIQ抗生素在代谢工程方面的研究进行了展望。; 王蔚王慧利李爱英; 关键词：生物合成结构修饰

美达霉素合成中SARP蛋白的功能研究: 本研究以这个SARP同源基因为研究对象，展开功能分析：(1)生物信息学分析确定该基因内部存在DNA-binding结构域，同时在美达霉素基因簇在也鉴定一个启动子区域，含有SARP蛋白保守的识别序列，所以可能是这个调控蛋白...; 王蔚江雅莉黄璐瑶曾爱兵王慧利李爱英; 关键词：生物合成基因表达; 文献传递

分子伴侣协助下抗肿瘤抗生素美达霉素生物合成中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达被引量：11: 2011年; 糖基转移酶在天然产物的糖基化修饰过程中起关键作用。目前链霉菌源抗肿瘤抗生素美达霉素(Medermycin)生物合成途径中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达及酶学性质还未有研究。首先通过结构模拟确定Med-ORF8的端部加上His-标签不会影响其三维结构的正确折叠,然后利用2种pET原核表达载体来进行Med-ORF8的原核表达,发现以pET-28a(+)为载体进行表达时,目的蛋白产量非常高,但是以不可溶的包涵体形式为主。当分子伴侣基因(编码大肠杆菌触发因子)与Med-ORF8的编码基因共表达时,在优化诱导条件的情况下,可以有效减少包涵体的形成,提高了Med-ORF8的可溶性表达效率,为Med-ORF8的酶学分析打下基础。; 万娟邓会群张碧乾王蔚蔡晓凤李爱英; 关键词：糖基转移酶原核表达分子伴侣

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王蔚