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基于SELDI-TOF-MS技术的患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组谱分析被引量：1: 2014年; 旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得组间差异表达蛋白,并进行决策树分析。结果获得了7个差异峰,经鉴定得到6种差异表达蛋白质。经决策树模型分析得出神经分泌蛋白VGF片段和淀粉样β蛋白4可能为诊断健康牛和亚临床低血钙症牛的生物标志物。应用SELDI-TOF-MS技术可有效分离健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白质,其中有可能存在能够成为该疾病的诊断标识物,其具体发生机制有待研究,该结果对探究奶牛亚临床低血钙症发病机制及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。; 王朋贤舒适王博许楚楚刘健男夏成吴凌王哲; 关键词：奶牛 SELDI-TOF-MS 血浆蛋白质组学

奶牛酮病与肝功和氧化应激之间的关系被引量：3: 2014年; 为了了解奶牛酮病与机体肝功和氧化应激之间的关系,选取产后14～21 d的奶牛48头,分成酮病组（K组,24头）和健康对照组（C组,24头）,分析血液能量代谢指标、肝功指标以及抗氧化指标。结果表明：与健康对照组比较,酮病组奶牛β-羟丁酸和游离脂肪酸含量极显著升高（P〈0.01）,而葡萄糖含量显著降低（P〈0.05）;天门冬氨酸转移酶活性和直接胆红素含量极显著升高（P〈0.01）,总胆红素含量显著升高（P〈0.05）,而胆碱酯酶活性极显著降低（P〈0.01）,总蛋白含量显著降低（P〈0.05）;超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量显著增高（P〈0.05）。说明酮病组奶牛机体处于能量负平衡状态,机体肝功发生异常,遭受氧化应激。; 刘健男史国纯孙照磊王博许楚楚夏成张洪友; 关键词：奶牛酮病肝脏功能氧化应激

肝功能指标与奶牛酮病的关系及其对酮病的预警作用被引量：13: 2015年; 利用二元Logistic回归分析确立肝功能指标与奶牛酮病的因果关系；通过受试者工作特征（ROC）曲线确定葡萄糖（GIc）、游离脂肪酸（NEFA）、天门冬氨酸转移酶（AST）、胆碱脂酶（CUE）、直接胆红素（I）BIL）和血中总胆红素（TBIL）对酮病的预警作用。从2012年4至6月，在中国黑龙江省某个采取自由卧栏、TMR饲喂，具有完善的牛场管理系统的集约化奶牛场，随机选取表面健康和酮病奶牛共60头，在产后14～21d之间清晨空腹采取血浆样品。奶牛血浆β-羟丁酸（BHBA）浓度超过1．20mmol／L被归类为酮病状态。通过ROC分析确定酮病预测的临界值。结果显示：NEFA、AST、CHE和TBIL可作为预测酮病发生的有效指标，预警值分别为NEFA〉0．76mmol／L，AST〉104．0U／L，CHE〈139．5U／L，TBIL〉3．25μmol／L；NEFA敏感度为64．5％、特异度为91．7％，AST敏感度为74．2％、特异度为85．4％，CHE敏感度75．0％、特异度59．4％，TBIL敏感度58．1％、特异度83．3％。结果表明：Glc、AST、CHE、TBIL、DBIL和NEFA与酮病紧密相关。与Glc和DBIL不同的是，AST、CHE、TBIL和NEFA可作为预测酮病发生的有效指标，并且一些肝功指标可以作为预测酮病发生的高风险指标。; 王博孙照磊舒适夏成张洪友徐闯吴凌; 关键词：Β-羟丁酸酮病肝功能 ROC分析

奶牛酮病对机体代谢和生产性能的影响被引量：4: 2013年; 在黑龙江省某集约化奶牛场采集产后14 d、21 d的75头奶牛乳样和血样,通过酮粉法定性判定酮病,测定血浆β-羟丁酸(BHBA)、游离性脂肪酸(NEFA)和血糖(Glu)的含量,记录试验牛泌乳量、左方变位发生和受胎天数。结果显示:该牛场酮病发病率为41.33%;酮粉检测乳酮判定酮病效果假阳性为9.4%,假阴性为3.9%、准确率为89.2%±2.4%;泌乳量在产后14 d极显著低于同期健康组(P<0.01),而产后21 d酮病组比同期健康组降低4.3 Kg,但差异不显著;酮病组奶牛成功受精时间极显著长于健康组(P<0.01);酮病奶牛Glu极显著低于健康组(P<0.01),NEFA和BHBA极显著高于健康组(P<0.01);奶牛发生左方变位前3-7 d的血浆BHBA水平达到酮病水平。结论:该牛场奶牛酮病发病率高.病牛处于能量负平衡状态,但多数在产后21 d能自我恢复;酮病严重影响奶牛生产性能和正常代谢;酮粉法假阳性高、特异性低,但假阴性率低、敏感性高和准确性较高,故它应广泛的用于现场快速诊断奶牛酮病。; 孙照磊夏成张洪友舒适刘健男王博姚远寇利军孙志军史国纯; 关键词：奶牛酮病泌乳量繁殖性能

奶牛酮病与胰岛素抵抗关系探讨被引量：5: 2013年; 为探讨奶牛酮病与胰岛素抵抗的关系,选取产后14d的酮病组(T)16头和健康对照组(C)24头奶牛,比较酮病与对照组在能量平衡、肝功能状况、氧化应激、胰岛素敏感性以及耐糖量试验的差异。结果显示:酮病奶牛机体处于能量负平衡状态;肝功能指标中酮病组奶牛血浆天门冬氨酸转移酶、直接胆红素含量极显著高于健康对照组(P<0.01),总胆红素含量显著高于健康对照组(P<0.05),胆碱酯酶含量极显著低于健康对照组(P<0.01),总蛋白含量显著低于健康对照组(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶、间接胆红素、白蛋白、球蛋白含量与健康对照组差异不显著,表明病牛肝脏受到一定程度的损害;酮病组奶牛血浆丙二醛、超氧化歧化酶含量显著高于健康对照组(P<0.05),表明病牛处于氧化应激状态;酮病奶牛血浆胰岛素敏感指数显著低于健康对照组(P<0.05),表明病牛的胰岛素敏感性下降。葡萄糖耐量试验显示部分酮病奶牛血糖含量显著高于健康对照组(P<0.05),在注射完葡萄糖120min后血糖浓度高达4.24mmol/L,组间差异极显著(P=0.006),表明病牛存在胰岛素抵抗。奶牛酮病与胰岛素抵抗存在密切的关系,可能与肝功能与氧化应激有关。; 孙照磊王朋贤舒适刘健男王博姚远夏成张洪友王哲; 关键词：奶牛酮病能量负平衡肝功能状况氧化应激胰岛素抵抗

基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术的奶牛乳热血浆蛋白质组学分析: 引言奶牛乳热是以分娩母牛血浆钙浓度降低,产后瘫痪甚至昏迷为临床特征的一种主要的营养代谢性疾病。以往的研究多针对乳热发生中生理、生化和病理的变化,缺乏深入系统的蛋白组学研究。目的本研究应用荧光差异双向凝胶电泳技术和质谱分析...; 舒适夏成张洪友刘建楠王博王朋贤; 关键词：质谱分析差异蛋白

乳热奶牛与亚临床低血钙奶牛的血浆理化指标检测被引量：5: 2013年; 为了解奶牛分娩当天低血钙发生状况及其调节作用,本试验选取分娩奶牛30头,按照血钙水平和临床表现将这些牛分为对照组(Ca>2.20 mmol/L)、乳热组(Ca<1.70 mmol/L)、亚临床低血钙组(1.70 mmol/L0.05)。结论:奶牛发生乳热时血钙稳态调节机制发挥了一定的作用,但未充分发挥其作用。; 舒适夏成张洪友孙照磊刘健男王博; 关键词：奶牛低血钙症

奶牛酮病早期预警指标的确立与评估被引量：15: 2015年; 为了早期预测奶牛酮病的发生，在黑龙江省东、西部2个集约化牛场（均有250多头泌乳牛）随机选取产前15—2d，分娩当天，产后2—15d的奶牛为试验动物。通过检测试验牛血浆中葡萄糖（Glu）、β-羟丁酸（BHBA）和游离脂肪酸（NEFA）的浓度，了解产后奶牛酮病发生状况；通过检测试验牛产前和产后各肝功指标，阐明奶牛围产期肝功指标与酮病间的关系以及对产后酮病发生风险的预警作用。结果表明：酮病发病率在东部牧场为40％，在西部牧场为45．16％；两牧场产后奶牛的血浆谷草转氨酶（AST）、NEFA和BHBA的水平均显著高于产前奶牛并与酮病呈显著正相关，血浆Glu水平显著低于产前奶牛并与酮病呈显著的负相关。根据受试者工作特征曲线（ROC）分析确定了东部牧场的预警值为产前血浆AST〉69．5U／L、G1u〈4．16mmol／L、NEFA〉0．25mmol／L、BHBA〉0．32mmol／L。西部牧场预警值为血浆AST〉68．0U／L、Glu〈3．97mmol／L、NEFA〉0．27mmol／L、BHBA〉0．43mmol／L。结果显示，奶牛产前血浆NEFA、Glu、AST和BHBA指标超过预警值可作为奶牛发生酮病的早期风险预测依据。; 肖鑫焕许楚楚王博夏成徐闯张洪友吴凌郑家三; 关键词：酮病肝功奶牛 ROC分析

黑腹果蝇保幼激素受体Met泛素化修饰位点预测及功能验证: 2019年; 目的预测黑腹果蝇保幼激素(juvenile hormone,JH)受体Methoprene tolerant(Met)的泛素化修饰位点,并验证其功能。方法利用UbPred和CKSAAP_UbSite在线预测工具对Met的泛素化位点进行预测;通过重叠PCR技术将预测的各泛素化修饰位点赖氨酸分别突变为丙氨酸,同时将第46和526位赖氨酸突变为丙氨酸;将突变后的Met插入至表达载体p Ac5. 1/V5-His B中,构建各位点突变的表达质粒;转染果蝇Kc细胞,并经格尔德霉素(geldanamycin,GA)处理,Western blot法检测各位点突变后Met的表达。结果根据UbPred和CKSAAP_UbSite在线网站预测结果,选取7个赖氨酸位点作为Met的潜在泛素化修饰位点,CKSAAP_UbSite及UbPred预测分值最高的分别为第46和526位赖氨酸。构建的Met各位点突变表达质粒转染果蝇Kc细胞后,于相对分子质量约82 000处均可见Met目的蛋白的表达,经GA处理后,Met表达下降。结论成功构建了Met的7个预测泛素化修饰位点的单突变表达质粒及1个双突变表达质粒,这些位点的突变均不足以抑制GA诱导Met的降解。; 陈金霞陈姗姗董文韬王博郭小舟张凯悦何倩毓; 关键词：黑腹果蝇保幼激素 MET

围产期酮病奶牛高糖现象的研究被引量：1: 2014年; 在黑龙江省某集约化奶牛场随机选取产后14、21 d的69头奶牛,旨在调查产后酮病奶牛的高血糖现象。根据血浆β一羟丁酸(BHBA)浓度,将试验牛分成酮病组(K)和健康对照组(C)。在酮病组中将产后14d和21 d都发病的分为病程长组(LTK),否则分为病程短组(STK)。检测所有试验牛血浆中GLU,游离性脂肪酸(NEFA)、BHBA和肝功指标。结果显示,围产期高血糖现象主要集中在STK组中;LTK组BHBA极显著高于STK组和C组。LTK组和STK组NEFA极显著高于C组,而LTK组与STK组之间差异不显著。LTK组GIU显著低于C组和STK组,而STK组与C组之间无显著差异。结论是肝功正常的酮病奶牛病程短,血糖维持正常,具有高糖现象;反之,肝功异常的酮病奶牛病程长,血糖水平低于正常。因此,患病奶牛的病程长短与奶牛血糖的调节能力及肝脏的功能状况密切相关。; 姚远王博孙雨航刘健男孙照磊夏成张洪友徐闯; 关键词：奶牛围产期酮病高血糖肝功能

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