蔡顺风
- 作品数:14 被引量:28H指数:3
- 供职机构:浙江大学动物科学学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目浙江省科技厅项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 家蚕胚胎期感染微粒子病的个体对健康群体的影响被引量:3
- 2017年
- 胚胎期感染家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)的家蚕个体,其携带Nb在健康家蚕群体中的传播扩散规律是流行病学需要解决的问题,也是家蚕微粒子病检验技术的科学基础。采用流行病学的方法,通过混育和个体育试验,研究胚胎期感染Nb的家蚕个体对健康群体的影响。研究结果表明:胚胎期感染Nb的家蚕中,存在可以完成1个世代(即可以发育到化蛾产卵)的个体;胚胎期被感染的家蚕个体在健康家蚕群体中的感染扩散规律为"连续感染传播扩散"模式;病害在家蚕健康群体的传播扩散与胚胎期感染个体数量和感染程度有关,在幼虫期低剂量感染情况下,感病个体混入率≥5%对群体的化蛾率有明显影响,感病个体混入率≤2%对群体的化蛾率未见明显影响。上述结果可供感染Nb的家蚕子代对健康群体影响的风险阈值确定,以及家蚕微粒子病检验判别标准的评价和检验技术研究参考。
- 鲁兴萌呼思瑞邵勇奇林秀秀蔡顺风傅张梧可李明乾何欣怡邱海洪马焕艳陆颖刘涵何祥康李光才陈勃生
- 关键词:家蚕家蚕微孢子虫幼虫饲养
- 蚕病检测中免疫学技术的研究与应用被引量:5
- 2011年
- 本文介绍了有关应用免疫学技术蚕病进行检测的研究。根据已有研究和养蚕业的特点,认为家蚕微粒子病的检测是一项非常值得研究的技术。家蚕微粒子病检测的技术根本是解决基于实际应用条件下的灵敏度和特异性问题。
- 鲁兴萌蔡顺风邱海洪孙文静何永强
- 关键词:蚕病免疫学技术灵敏度特异性
- 破碎法提取家蚕微孢子虫孢子核酸的PCR检测灵敏度试验被引量:3
- 2011年
- 蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项重要技术,本文在通过破碎法提高模板核酸获取量的基础上,对纯化家蚕微粒子虫孢子的PCR检测灵敏度进行了测试。提取核酸-模板稀释测试12对引物的灵敏度中有4对引物达到0.05粒(102粒/mL)、4对引物5粒(104粒/mL)、1对引物50粒(105粒/mL)、2对引物500粒(106粒/mL)和1对引物5000粒(107粒/mL)。两对灵敏度较高的引物(NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R)灵敏度临界值(0.05粒和0.005粒)的PCR重复检测率均为90%。纯化家蚕微粒子虫孢子稀释后提取核酸再进行PCR检测试验中,NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R的灵敏度分别为:5粒(104粒/mL)和0.5粒(103粒/mL)。
- 李光才蔡顺风何祥康何欣怡马焕艳孟祥坤邱海洪何永强鲁兴萌
- 关键词:家蚕微粒子病孢子聚合酶链式反应
- 家蚕微粒子病的水平传染-混育感染模拟试验
- 本研究设计了混育感染试验模拟粒子病的传播情况,研究家蚕微粒子病在蚕座中水平传播的特性。实验采用不同浓度的家蚕微孢子虫添食原种蚕,制备感染家蚕微粒子虫的一代杂交蚕卵,再将其孵化的蚁蚕按照不同的比例混入到健康的蚕中进行群体饲...
- 蔡顺风
- 关键词:家蚕微粒子病疾病传播
- 一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法被引量:13
- 2011年
- 家蚕微孢子虫孢子壁坚厚不易破碎,并对许多化学物质有很强的抵抗性,使用常规的核酸和蛋白抽提方法效果不够理想。研究建立玻璃珠破碎法快速制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法,采用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析所得DNA的完整性和所得总蛋白的差异性,并对提取蛋白进行双向电泳试验。结果表明:使用玻璃珠破碎法对微孢子虫孢子壁的破碎率可达到90%以上,基因组DNA得率约为7.65 fg/粒,总蛋白得率约为788.3 fg/粒,均显著高于常用的发芽法和液氮冻融研磨法的得率。双向电泳结果显示玻璃珠破碎法能有效提取家蚕微孢子虫总蛋白,经考马斯亮蓝染色可检测到约350个蛋白点,蛋白信息丰富,可进一步用于质谱分析。
- 蔡顺风何欣怡何祥康邱海洪李光才何永强鲁兴萌
- 关键词:家蚕微孢子虫核酸蛋白双向电泳
- PCR法检测蚕卵中家蚕微粒子虫的样本处理方法及检测方法
- 本发明公开了一种PCR法检测蚕卵中家蚕微粒子虫的样本处理方法,包括:将蚕卵样本加入前处理液中,放置30min以上,捣碎蚕卵并调节溶液pH值为中性,制得PCR模板;所述前处理液为碱性且包含1~10mol/L的甜菜碱。另外,...
- 鲁兴萌蔡顺风李明乾马焕艳何永强李光才
- 文献传递
- 中国株家蚕传染性软化病病毒的全基因组的克隆及序列分析
- 家蚕传染性软化病病毒(Bombyx mori infectious flacherie virus,BmIFV)是单链正义RNA病毒,属于Iflavirus。虽然类似病毒性软化病的情况在许多国家也有报道,但GenBank...
- 李明乾陈孝学蔡顺风苘娜娜金伟鲁兴萌
- 文献传递
- 粉纹夜蛾培养细胞对家蚕微孢子虫的吞噬及与孢壁蛋白的关系被引量:2
- 2010年
- 解明家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)入侵宿主细胞的相关因素,有助于深入研究Nb对家蚕的侵染机制。利用激光共聚焦显微镜观察Nb孢子接种粉纹夜蛾(Trichoplusiani,Tn)培养细胞48h后孢子的分布状态和培养细胞的生长情况,并对接种Nb孢子后的Tn培养细胞培养物总蛋白进行SDS-PAGE分析,证实经0.2mol/LKOH预处理的Nb孢子可以被Tn培养细胞所吞噬。对Nb孢子孢壁蛋白的SDS-PAGE分析显示,Nb孢子经KOH预处理后,大小为80kD和12kD的孢壁蛋白带缺失或明显减弱,30kD的孢壁蛋白带丰度降低。推测KOH预处理使Nb孢子部分孢壁蛋白被分解(部分或完全)或使蛋白结构发生变化,由此影响了Nb孢子与Tn培养细胞的相互作用关系,有利于Tn培养细胞对Nb孢子的吞噬。
- 吴晓霞冯真珍邱海洪蔡顺风李明乾鲁兴萌
- 关键词:家蚕微孢子虫孢壁蛋白激光共聚焦显微镜观察
- 家蚕微孢子虫孢子母细胞的分离及孢子吞噬作用的研究
- 微孢子虫(Protozoan: Microsporidia)是一类专性细胞内寄生的单细胞真核微生物,其种类繁多,寄主广泛,目前已发现的微孢子虫有近150属超过1200个种。自1959年首次发现微孢子虫可以感染免疫缺陷型病...
- 蔡顺风
- 关键词:家蚕微孢子虫体外培养
- 基于养蚕环境样本检测的流行病学调查方法被引量:6
- 2013年
- 家蚕病害流行规律是蚕病防控的技术基础和依据。根据家蚕病原微生物为归因危险度极高流行因子的特点,设计了分层抽样法和光学显微镜检测方案,对12 059个养蚕环境样本进行病原微生物检测和流行病学的过程性分析。结果表明:病原微生物的检出率在不同蚕区和不同蚕室环境样本间存在较大差异,不同养蚕技术水平农户部分蚕室环境样本间的差异显著(P<0.05);在养蚕前的清洁消毒方面,养蚕技术水平较高的农户与养蚕技术水平较低的农户间并不存在明显差异;在家蚕饲养过程及上蔟后的病源物扩散管理方面,养蚕技术水平较高的农户比养蚕技术水平较低的农户具有更高的管理水准。由此认为:病源物扩散控制是目前家蚕病害防治中需要得到进一步重视的工作,重视家蚕饲养过程中的病害防控技术实施可以减少病害流行。桑树害虫、蚕沙坑、蚕室内地面和蚕室前地面是病源物扩散控制及清洁消毒技术实施的重要靶标或范围。
- 鲁兴萌孟祥坤沈柏民朱丽君蔡顺风诸葛翀彭建学马焕艳李明乾何欣怡赵新华
- 关键词:分层抽样归因危险度