郑元敬
- 作品数：5 被引量：9H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗菌肽Dermadistinctin串联表达载体的构建及表达产物抗菌活性的鉴定被引量：3
- 2009年
- 根据GenBank中Dermadistinctin K(DDK)和Dermadistinctin L(DDL)的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏嗜性密码子,采用SOE法合成了DDK和DDL基因。在DDK及DDL基因序列中引入肠激酶裂解位点,并将其依次克隆入pET-32a(+)质粒,构建了串联体融合表达载体P-DDK,并将其转入Rosetta(DE3)中进行融合表达;表达产物在终浓度为0.1 mmol/LIPTG诱导4 h后可达到最大表达量。对重组蛋白DDK进行镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后,对酶切产物进行了抑菌活性分析。分析结果表明,抗菌肽DDK与DDL的混合物对金黄色葡萄球菌(CowanⅠ)、大肠杆菌DH5α、致病性大肠杆菌O1、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌均具有一定的抑菌活性。
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- 关键词：串联体抗菌活性
- 湖南省猪链球菌的分离与鉴定被引量：3
- 2009年
- 从病猪脏器病料中通过细菌培养、生化试验分离鉴定出了121株猪链球菌。经PCR技术鉴定马链球菌兽疫亚种28株,占23.1%,猪链球菌24株,占19.8%,其中猪链球菌2型4株,占3.3%,猪链球菌9型2株,占1.7%,猪链球菌1型和7型都没检测到,证实省内除了猪链球菌2型外,也存在其他血清型的猪链球菌。
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- 关键词：猪链球菌生化试验聚合酶链反应
- 蛙皮肤抗菌肽基因Dermadistinctin-L的克隆表达与活性检测
- 抗菌肽是一种具有两亲活性阳离子短肽,在动物植物和人体内天然免疫中都发挥着重要作用。抗菌肽具有高效、广谱、不易产生耐药性等特点。是极具潜力的新一代抗菌药物。由于抗菌肽天然产量低,从生物机体提取成本高、工序复杂,因此,利用基...
- 郑元敬
- 关键词：抗菌肽原核表达抑菌活性
- 文献传递
- 蛙皮肤抗菌肽Dermadistinctin-L原核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 根据GenBank中公布的猴蛙皮肤抗菌肽Dermadistinctin-L(DDL)成熟肽氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱密码子,设计合成了3条互补引物,通过PCR扩增得到完整的Dermadistinctin-L基因序列。将获得的基因序列克隆到原核表达载体pET-32a(+),经酶切鉴定和序列分析证明成功构建了pET32a-DDL表达载体,表达载体的正确构建为Dermadistinctin-L的高效表达和生物学活性研究奠定了基础。
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- 关键词：密码子优化PCR扩增表达载体构建
- 重组表达抗菌肽Hadrurin抗菌活性分析被引量：4
- 2010年
- 为了给表达高活性的抗菌肽Hadrurin提供开发应用的依据,进一步为用基因工程方法生产具有多种生物活性的抗菌肽Hadrurin蛋白提供研究基础,本研究表达获得重组抗菌肽Hadrurin(rHadrurin)蛋白的基础上,将纯化的rHadrurin蛋白进行肠激酶酶切,恢复其天然活性结构。用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)方法检测抗菌肽Hadrurin在不同剂量、不同pH值、不同保存温度下对鸡致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性及杀菌活性。并以小鼠为动物模型,进行抗菌肽rHadrurind对小鼠的体内保护实验。结果表明抗菌肽rHadrurin对上述细菌的最小抑菌范围为1.32μg/mL～4.32μg/mL,最小杀菌范围为1.77μg/mL～8.54μg/mL,而且-70℃～100℃及在pH3～pH10条件下仍具有高效抗菌活性。240μg/只剂量的抗菌肽蛋白可有效预防保护小鼠免受致死剂量鸡致病性大肠杆菌攻击,320μg/只剂量可达到保护率85%以上。
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- 关键词：抗菌活性
