舒雄
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:天津大学更多>>
- 发文基金:天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- HGF基因真核表达质粒的构建及其细胞表达被引量:1
- 2015年
- 目的:构建真核表达质粒p EGFP-N1-HGF并观察干细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在人皮肤成纤维中的表达。方法:从扩增人的间充质干细胞中提取全长RNA为模板,设计合成引物,用RT-PCR法扩增出HGF基因片段,然后将HGF基因片段连接于真核表达质粒p EGFP-N1中。双酶切鉴定及测序分析后,用脂质体包裹转染体外培养的人的皮肤成纤维细胞,通过荧光显微镜观察其转染效果,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测HGF蛋白的表达。结果:经酶切鉴定及测序验证p EGFP-N1-HGF构建正确,经转染的人皮肤纤维细胞中观察到较强的绿色荧光并且可以表达一定量的HGF。结论:成功构建了真核表达质粒p EGFP-N1-HGF,为基因治疗脱发疾病提供实验基础。
- 徐莲舒雄常志静刘文娟王雪周立军
- 关键词:HGF转染成纤维细胞真核表达质粒
- 肝细胞生长因子质粒的建立及其在成纤维细胞的表达与鉴定
- 目的:构建含人的肝细胞生长因子(Human hepatocyte growth factor)基因真核表达载体pEGFP-N1-HGF,探讨其在体外培养人的成纤维细胞的转染与表达,为其在体内应用提供实验依据。方法: RT...
- 舒雄
- 关键词:脂质体肝细胞生长因子基因成纤维细胞基因转染
- 文献传递