方芳
- 作品数：163 被引量：253H指数：10
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程航空宇航科学技术农业科学更多>>
- Rho激酶抑制剂对先天性膈疝大鼠模型胎仔肺血管重构的作用被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)大鼠模型胎仔肺Rho激酶的表达及其抑制剂法舒地尔对肺血管重构的影响。方法:将定时配种成功的SD雌鼠随机分为对照组(5只)、膈疝组(6只)和法舒地尔干预组(6只)。分别给予膈疝组和干预组除草醚(100 mg/只)一次性灌胃建立CDH动物模型,对照组灌等量橄榄油。孕16.5 d给予干预组腹腔注射法舒地尔(15 mg/kg,1次/d,连续3 d),对照组和膈疝组予等量生理盐水腹腔注射。定时剖宫产取出胎肺,光镜下进行肺血管重构观察,采用RT-PCR法和Western blot法观察肺组织Rho激酶表达变化;Western blot法检测Rho激酶底物肌球蛋白磷酸酶的磷酸化状态。结果:膈疝组肺小动脉管壁厚度占血管外径百分比(WT%)和肺小动脉中膜厚度百分比(MT%)均明显高于对照组[(26.88±2.41)vs.(13.50±1.45);(25.59±2.57)vs.(16.47±2.07),P=0.000];管腔面积与血管总面积百分比(LA%)明显低于对照组[(39.22±2.23)vs.(61.20±3.23),P=0.000]。法舒地尔干预组WT%、MT%显著低于膈疝组[(15.38±2.14)vs.(26.88±2.41);(17.69±1.79)vs.(25.59±2.57),P=0.000],LA%明显高于膈疝组[(58.67±3.06)vs.(39.22±2.23),P=0.000]。与对照组相比,膈疝组Rho激酶mRNA和蛋白质表达明显升高,肌球蛋白磷酸酶磷酸化水平也明显增高(P=0.000)。法舒地尔干预后Rho激酶mRNA和蛋白、肌球蛋白磷酸酶磷酸化水平均较膈疝组明显降低(P<0.01)。结论:先天性膈疝胎仔肺内存在肺血管重构,Rho/Rho激酶信号通路参与此过程,产前给予法舒地尔明显改善CDH胎仔的肺血管重构。
- 周昉党红星陈应富白科方芳许峰
- 关键词：RHO激酶抑制剂先天性膈疝肺血管重构
- 高氧性肺损伤中MAPK信号途径的表达及其作用机制
- 谭利平许峰匡凤梧方芳卢仲毅王兴勇
- 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养被引量：9
- 2009年
- 目的:探讨胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar epithelial cell typeⅡ,AECⅡ)的分离、纯化及原代培养方法,为有关胎儿肺发育及新生儿肺部疾病的研究奠定基础。方法:采用胰酶结合胶原酶的消化方法,分离肺组织细胞成份,然后经差速离心和差速贴壁的方法纯化AECⅡ,进行原代培养;通过台盼蓝染色检测细胞活力,倒置相差显微镜观察细胞生长特点及形态特征,透射电镜鉴定,改良巴氏染色检测细胞纯度以及免疫荧光技术检测表面蛋白C(Surfactant proteinc,SPC)的表达。结果:每3～5只胎鼠可获得AECⅡ(36±5)×106,活力98%±2%。镜下观察原代AECⅡ呈岛状生长,外观呈多边形或立方形。透射电镜可见特征性的板层小体,改良巴氏染色见胞质内有较多颗粒,纯度为96%±3%,呈现SPC绿色免疫荧光的细胞占96%以上。结论:利用胰酶和胶原酶消化,以及差速离心和差速贴壁的方法可成功分离出高产量、高纯度的胎鼠AECⅡ,能满足体外进一步实验的需要。
- 付红敏许峰黄波杨鸣符跃强方芳匡凤梧
- 关键词：胎鼠原代培养
- Rock抑制剂法舒地尔及Rho/Rock信号通路在高氧致新生大鼠肺纤维化中的作用
- 目的探讨Rock抑制剂法舒地尔(FAS)及Rho/Rock信号通路在高氧致新生SD大鼠肺纤维化中的作用及机制。方法新生SD大鼠24只按随机数字表法分为空气+生理盐水(NS)组、空气+FAS组、高氧+NS组和高氧+FAS组...
- 漆秀洁方芳李静许峰
- TLR2基因小干扰RNA对高氧所致氧化应激状态下肺泡上皮细胞功能的影响
- 目的研究Toll样受体2(TLR2)基因小干扰RNA(siRNA)对体外高氧暴露条件下A549细胞TLR2基因、蛋白表达变化及其下游信号通路的功能的影响,进一步证实细胞内ROS可激活TLR2—NF-kB—炎症介质这一信号...
- 黄栋方芳许峰
- 高氧暴露下新生大鼠肺组织Smo和Gli1蛋白的表达和意义
- 目的 探讨Sonic hedgehog 信号通路中Smo 和Gli1 蛋白在高氧诱导的急性肺损伤中的表达及其意义.方法 通过持续吸入高浓度氧气,建立新生大鼠高氧肺损伤模型.
- 党红星方芳许峰
- Rock抑制剂法舒地尔及Rho/Rock信号通路在高氧致新生大鼠肺纤维化中的作用
- 探讨Rock抑制剂法舒地尔(FAS)及Rho/Rock信号通路在高氧致新生SD大鼠肺纤维化中的作用及机制.新生SD大鼠24只按随机数字表法分为空气+生理盐水(NS)组、空气+ FAS组、高氧+ NS组和高氧+FAS组,分...
- 漆秀洁许峰方芳李静
- 新博柴黄颗粒对内毒素致热新西兰兔脑脊液中发热介质的影响
- 目的 研究新博柴黄颗粒对内毒素致热新西兰兔的解热作用及其对脑脊液中内生致热原和中枢发热介质的影响,进一步阐明新博柴黄颗粒的解热作用机制.方法 用内毒素复制发热模型,新西兰兔随机分为对照组,发热组,柴黄1组,柴黄2组,柴黄...
- 刘聪杨林方芳许峰
- 关键词：内生致热原
- p38 MAPK信号在N-乙酰半胱氨酸保护高氧肺损伤中作用的研究
- N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcystdne,NAC)是一种有效的抗氧化剂，但关于NAC在高氧性肺损伤中的保护机制仍不清楚。p38蛋白激酶是MAPK家族控制炎症反应最重要的成员，可因许多胞外刺激而被激活。本文通过复制...
- 谭利平许峰匡凤梧方芳卢仲毅
- 关键词：高氧肺损伤N-乙酰半胱氨酸新生儿呼吸窘迫综合征
- 文献传递
- Rock抑制剂法舒地尔改善高氧致新生大鼠肺纤维化的作用机制
- 2014年
- 目的探讨Rho激酶(Rock)抑制剂法舒地尔(FAS)改善高氧致新生大鼠肺纤维化的作用机制。方法将24只SD新生大鼠,按随机数字表法分为空气组(正常对照组)、FAS空气组、高氧组和FAS高氧组,分别建立动物模型。在造模的第21日取各组新生大鼠行肺组织辐射状肺泡计数(RAC),Western blotting检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白及Rho/Rock信号通路中Rock1和磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶靶亚单位1(p-MYPT1)蛋白的表达。结果与空气组比较,高氧组RAC值明显下降(P<0.05);FAS高氧组RAC值较高氧组上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。高氧组肺组织TGF-β1蛋白的表达较空气组显著升高(P<0.05),而FAS高氧组肺组织TGF-β1蛋白较高氧组明显降低(P<0.05)。与空气组比较,高氧组肺组织Rock1蛋白表达有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),而p-MYPT1蛋白表达明显升高(P<0.05);FAS高氧组肺组织Rock1蛋白表达较高氧组下降,但差异无统计学意义(P>0.05),而p-MYPT1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 FAS可通过减少TGF-β1的表达,一定程度改善高氧致新生大鼠肺纤维化,其调控机制可能与抑制Rho/Rock信号通路的活化有关。
- 漆秀洁李静许峰方芳
- 关键词：高氧肺纤维化法舒地尔转化生长因子Β1RHO/ROCK信号通路
